贵州省部分马病血清学调查

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（1.贵州省动物疫病预防控制中心，贵州贵阳 550008；

2.贵阳医学院基础医学院生理学教研室，贵州贵阳 550004）

贵州省部分马病血清学调查

冉隆仲1，洪尼宁2

（1.贵州省动物疫病预防控制中心，贵州贵阳 550008；

2.贵阳医学院基础医学院生理学教研室，贵州贵阳 550004）

[目的]调查贵州省马群马流感病毒、马疱疹病毒1/4型或马动脉炎病毒感染情况。[方法]用酶联免疫吸附试验（ELISA）对采自贵州省9个市（州）及第九届民运会参赛马匹的363份血清进行了A型流感病毒、马疱疹病毒1/4型、马动脉炎病毒和非洲马瘟病毒抗体检测。[结果]结果显示这四种病原的血清抗体群阳性率分别为79.49%（31/39）、7.69%（3/39）、43.59%（17/39）和0%（0/39），贵州本地役用马和赛马差异不显著（P>0.05）；血清抗体个体阳性率分别57.85%（210/363）、1.38%（5/363）、11.29%（41/363）和0%（0/363），其中贵州本地役用马阳性率分别为38.16%（87/228）、4.39%（1/228）、8.33%（19/228）和0%（0/228），赛马阳性率分别为91.11%（123/135）、2.96%（4/135）、16.30%（22/135）和0%（0/135）。相比之下，A型流感病毒及马动脉炎病毒抗体阳性率存在差异（P＜0.01或0.01＜P＜0.05），马疱疹病毒1/4型病毒抗体阳性率差异不显著（P>0.05）。[结论]调查表明贵州省部分马群存在不同程度的马流感病毒、马疱疹病毒1/4型或马动脉炎病毒感染。

马；酶联免疫吸附试验（ELISA）；马流感；马鼻肺炎；马病毒性动脉炎；血清学调查

近年来，世界动物卫生组织（OIE）通报了数十起马病疫情，一些疫病出现新情况、新特点，因此，积极预防控制马病就显得十分重要[1]。马流行性感冒（equine inf uenza）简称马流感，主要是由正粘病毒科流感病毒属A型马流感病毒（Equine inf uenza virus，EIV） H7N7或H3N8亚型引起的马属动物急性、高度接触性传染病，以发热、咳嗽、流浆液性鼻液为特征，主要经呼吸道和消化道感染，各种年龄、品种和性别的马都易感[2-3]。马鼻肺炎（equine rhinopneumonitis，ER）是马疱疹病毒1/4型（equine herpesvirus type 1/4，EHV-1/4）引起的以呼吸道症状、妊娠马流产、胎儿死亡及少见的神经症状为特征的马属动物高度接触性传染病，世界各地都有发生，经济损失巨大，销售和赛事过程接触病原体的风险最高[4-5]，我国也有该病流行报道[6-8]。马病毒性动脉炎（equine viral arteritis，EVA）又称马传染性动脉炎，是由马动脉炎病毒（equine arteritis virus，EAV）引起的一种急性传染病，以泛脉管炎诱发的水肿、出血及孕马流产为特征，其自然暴发与实验感染表现症状不同，易与其他马病混淆，可根据病理变化、病原体或血清抗体区分诊断[9]，我国华南、东北及西北地区有流行报道[10-11]。非洲马瘟（African horse sickness，AHS）是由非洲马瘟病毒（African horse sickness virus，AHSV）通过媒介昆虫传播引起的马属动物急性或亚急性传染病，以发热、皮下结缔组织和肺水肿及内脏出血为特征，病死率高达95%[12]。

上述4种马病都是OIE规定的必须报告的动物疫病，其中非洲马瘟被我国列为一类动物疫病。近年来随着赛马业的发展，这类疫病传播速度和范围也在加快和扩大，发生风险不断增加。2011年第九届全国少数民族传统体育运动会在贵州成功举办，马术参赛马匹的检疫开启了马病研究工作，为深入了解贵州贵州省马传染病的流行状况，我们对马流感、马鼻肺炎、马病毒性动脉炎和非洲马瘟这4种病毒性传染病进行了血清学调查。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 样品 待检血清采自贵州省9个市（州）及第九届民运会参赛马匹。全群采集民运会8个参赛代表队马匹血清135份，随机抽样采集9市（州）13县18个乡（镇）30个村及1个市场马匹血清228份。按常规方法采血、分离血清后-20 ℃冷冻备用。

1.1.2 试剂 马A型流感病毒、马疱疹病毒1/4型、马动脉炎病毒和非洲马瘟病毒ELISA抗体检测试剂分别是INGEZIM INFLUENZA A 1.0.FLU. K3、INGEZIM RINONEUMONITIS 14.HVE.K1、INGEZIM ARTERITIS 14.EA.K1和INGEZIM AHSV COMPAC PLUS 14.AHS.K3 （西班牙）。

1.2 方法

1.2.1 检测方法 按商业试剂盒说明书进行操作，样品稀释时说明书中规定的血清及稀释液体积增加1倍，便于充分混匀以减少检测误差。

1.2.2 数据分析 χ2检验使用下载软件《卡方检验计算器》，群阳性率检验采用直接计算概率法、总体阳性率检验使用发生数格式，将发生数（阳性数）和未发生数（阴性数）或样本数（总数）输入相应位置，即可得χ2值及P范围。

2 结 果

具体检测结果见表1。

表 1 马血清抗体检测结果

2.1 群体阳性率

2.1.1 A型流感病毒抗体群阳性率为79.49%（31/39）。其中，贵州群阳性率为74.19%（23/31）、赛马群阳性率为100%（8/8），两者差异不显著（P>0.05）。

2.1.2 疱疹病毒1/4型抗体群阳性率为7.69%（3/39）。其中，贵州群阳性率为3.23% （1/31）、赛马群阳性率为 25.00%（2/8），两者差异不显著（P>0.05）。

2.1.3 动脉炎病毒抗体群阳性率为43.59%（17/39）。其中，贵州群阳性率为41.93% （13/31）、赛马群阳性率为 50.00%（4/8），两者差异不显著（P>0.05）。

2.1.4 非洲马瘟病毒抗体群阳性率为0%（0/39）。

2.1.5 A型流感病毒和马疱疹病毒1/4型双抗体群阳性率为5.12%（2/39）。其中，贵州群阳性率为0%（0/31）、赛马群阳性率为25%（2/8），两者差异显著（P＜0.05）。

2.1.6 A型流感病毒和马动脉炎病毒双抗体群阳性率为28.21%（11/39）。其中，贵州群阳性率为22.58% （7/31）、赛马群阳性率为 50%（4/8），两者差异不显著（P>0.05）。

2.2 样本阳性率

2.2.1 A型流感病毒抗体总体阳性率为57.85%（210/363）。其中，贵州本地役用马阳性率为38.16%（87/228），赛马阳性率为91.11%（123/135），两者差异极显著（P＜0.01）。

2.2.2 疱疹病毒1/4型抗体总体阳性率为1.38%（5/363）。其中，贵州本地役用马阳性率为4.39%（1/228），赛马阳性率为2.96%（4/135），两者差异不显著（P>0.05）。

2.2.3 动脉炎病毒抗体总体阳性率为11.29%（41/363）。其中，贵州本地役用马阳性率为8.33%（19/228），赛马阳性率为16.30%（22/135），两者差异显著（0.01＜P＜0.05）。

2.2.4 非洲马瘟病毒抗体总体阳性率为0%（0/363）。

2.2.5 A型流感病毒和马疱疹病毒1/4型双抗体总体阳性率为1.10%（4/363）。其中，贵州本地役用马阳性率为0%（0/228），赛马阳性率为2.96%（4/135），两者差异显著（0.01＜P＜0.05）。

2.2.6 A型流感病毒和马动脉炎病毒双抗体总体阳性率为5.79%（21/363）。其中，贵州本地役用马阳性率为4.39% （1/228），赛马阳性率为14.81%（20/135），两者差异极显著（P＜0.01）。

3 讨论

本次马传染性疫病血清学调查涉及民运会8个代表队全群马血清135份及随机抽取9市（州）13县18个乡（镇）30个村及1个市场的马血清228份，采样马群未接种过所调查病种疫苗。马A型流感病毒、马疱疹病毒1/4型、马动脉炎病毒和非洲马瘟病毒抗体群阳性率分别为79.49%（31/39）、7.69 %（3/39）、43.59%（17/39）和0%（0/39），样本总体阳性率分别为57.85%（210/363）、1.38%（5/363）、11.29%（41/363）和0%（0/363），贵州本地役用马和赛马A型流感病毒抗体总体阳性率及A型流感病毒和马动脉炎病毒双抗体总体阳性率差异极显著（P＜0.01）、马动脉炎病毒抗体总体阳性率及A型流感病毒和马疱疹病毒1/4型双抗体总体阳性率差异显著（0.01＜P＜0.05）、马疱疹病毒1/4型病毒抗体总体阳性率及同病种抗体（A型流感病毒和马疱疹病毒1/4型双抗体除外）群阳性率差异不显著（P>0.05），这为区别防控这类疫病提供了依据。

自1956年分离H7N7亚型、1963年分离H3N8亚型马流感病毒以来，世界各地两型马流感均有暴发流行，近年来ELISA 检测方法在我国的马流感防治与监测中也发挥着重要的作用[3]。梁基等（1991）采用血凝抑制试验（H I）检测H7N7亚型阳性率为0%（0/879），H3N8 亚型阳性率在30.5%～65.8 % 之间，平均为45.9%（537/1204），非马流感流行区检出率为零[2]。此次血清学调查采用国际上通用的A型流感ELISA试剂检测贵州本地役用马阳性率（38.16%）明显低于赛马阳性率（91.11%）（P＜0.01），考虑到贵州省的马群检出阳性抗体74.19%（23/31）和赛马群阳性率100%（8/8）相比差异不显著（P>0.05），该病在贵州省的流行情况有待进一步调查。

马鼻肺炎在大量养马的国家呈地方性流行，大多数成年马存在EHV-1/4抗体，有些地区感染率高达90%，3岁以下的马常呈急性、热性呼吸道病征经过并很快传遍全群。成年马携带EHV-1/4病毒常呈亚临床感染，1～2周内可完全恢复，但可明显影响赛马比赛，该病容易与其他病原导致的上呼吸道感染、流产或神经性疾病相混淆，需要进行实验室检测进行确诊[4-6]。此次调查显示马疱疹病毒1/4型抗体总体群阳性率为7.69 %、总体阳性率为1.38 %，贵州本地役用马与赛马相比马疱疹病毒1/4型病毒抗体群及总体阳性率差异不显著（P>0.05），与单文鲁等（2003）报道总体阳性率0.86%（25/2821）[7]接近（P>0.05），而与阿依吐拉·肉孜等（2013）报道总体阳性率16.04%（238/1484）[8]差异极大（P＜0.01），考虑贵州省特殊的地理位置和畜群管理实际，本次调查为防治马鼻肺炎提供了一定的参考依据。

马病毒性动脉炎是马的全球性传染病，能引起严重的经济损失[9]。李红梅等（2012）报道华南及华中地区赛马阳性率分别为26%和0%、东北及西北地区役用马阳性率分别为8．26%和7．55%[10]，阿依吐拉·肉孜等（2013）曾报道新疆4个地区马匹总体阳性率为0.46%（2/435）[11]。此次调查显示总体阳性率为11.29%（41/363），其中贵州本地役用马和赛马阳性率分别为8.33%（19/228）和16.30%（22/135），两者差异显著（0.01＜P＜0.05）。近年来随着马术运动和地区贸易的开展，马匹及其产品的流动变得频繁，马病毒性动脉炎有可能危害我国养马业健康发展，有必要加强监测、有效防控此病。

非洲马瘟对社会、经济影响极大，高密度易感马群及库蠓属媒介昆虫的存在是该病暴发的潜在风险[12]，此次调查显示贵州本地役用马和赛马抗体均呈阴性，表明赛马所在省份和贵州省目前还未传入该病，我们要继续加强监控，严防本病。

此次调查还发现在赛马样本中同时检测出A型流感病毒和马疱疹病毒1/4型双抗体阳性率为2.96%，在贵州本地役用马中未发现；而A型流感病毒和马动脉炎病毒双抗体在赛马和贵州本地役用马中均检测出阳性，赛马阳性率为14.81%，20份阳性样品来自4个群，但贵州本地役用马阳性率仅为4.39%，这1份阳性样品仅分布于贵州省的一个采样点，因此，说明同时感染A型流感病毒和马疱疹病毒1/4型或马动脉炎病毒的风险赛马明显高于本地役用马，但两种病之间的关系有待进一步研究。

贵州省马的地方品种较多，民间有遛马、赛马的习惯，饲养马匹主要作为役用和交通工具，这次血清学调查表明贵州省部分马群存在不同程度的马A型流感病毒、马疱疹病毒1/4型或马动脉炎病毒感染，深入开展病原学调查、采取综合防控措施显得非常必要。

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Serological Investigation of some Equine Diseases in Guzhou

Ran Longzhong1，Hong Nining2

（1.Guizhou Animal Disease Prevention and Control Center，Guiyang，Guizhou 550008；
2.Department of Physiology，School of Basic Medical Sciences，Guiyang Medical University，Guiyang，Guizhou 550004）

Serological Investigation of Infections with Equine Inf uenza Virus，Equine Herpesvirus Type 1/4，Equine Arteritis Virus and African Horse Sickness Virus in Guizhou Province. 363 equine serum samples taken from 31 working and 8 racing horse herds in Guizhou Province were examined for antibodies against equine inf uenza virus （EIV），equine herpesvirus type 1/4 （EHV-1/4），equine arteritis virus （EAV） and African horse sickness virus （AHSV）by enzyme-linked immunosorbert assay （ELISA）.The results showed that the positive rates of the four pathogens in the sampled horses were 57.85%（210/363），1.38%（5/363），11.29%（41/363）and 0%（0/363）and the positive rates in herds were 79.49%（31/39），7.69 %（3/39），43.59%（17/39）and 0%（0/39）respectively.The local working horses were different from racing horses in the positive rate of inf uenza A virus antibody （P < 0.01）and of equine arteritis virus antibody （0.01 < P < 0.05），while the positive rates of herds and the total positive rate of equine herpes virus type 1/4 virus antibody were not signif cant （P>0.05）.

equine；enzyme-linked immunosorbert assay（ELISA）inf uenza；rhinopneumonitis；viral arteritis；serological investigation

S858.21

：B

：1005-944X（2014）11-0086-04

贵州省科学技术基金项目“适量采集、安全处理重大动物疫病样品的方法研究”（20102114）

洪尼宁