“香参”防脱育发液的研制及其性能考察*

赵宁，李伟泽，康雪宁，王欢，崔艳华

“香参”防脱育发液的研制及其性能考察*

赵宁*，李伟泽，康雪宁，王欢，崔艳华

（西安医学院药学院，陕西西安710021）

制备“香参”防脱育发液，并对其抑菌效果及其促毛发生长作用进行研究；方法：在中医药理论指导下选药组方，采用水提醇沉法提取制备“香参”防脱育发液，研究其抑菌作用及对模型小鼠毛发生长的促进作用；结果：“香参”防脱育发液的抑菌效率随作用时间延长而增大，当作用时间超过10min时，其对大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌、白色念球菌的抑制率均达到99%以上，且能显著促进小鼠毛发生长，作用强度具有剂量依赖性；结论：“香参”防脱育发液不仅能够有效抑制细菌生长繁殖，并且对小鼠的毛发生长具有显著的促进作用，具有较好的应用前景。

“香参”防脱育发液；抑菌作用；防脱；毛发生长

脱发是一种临床常见的毛发疾病，据不完全统计，脱发患者约占成年人群体的20%～30%；虽不属于严重疾病，但对人们的精神和心里健康产生极大的影响。中医认为“发为血之余，发为肾之主”，头发稀疏或干枯不荣多为精血、肝肾不足之证[1，2]。另外，很多患者除脱发外，还常表现为头屑多，头皮瘙痒，小红颗粒等症状，有虫蚀咬感等，类似中医的“虫蚀”侵犯，与头部细菌、真菌感染的症状相似。正如陈达仙等报道，对溢脂性脱发患者毛发的扫描电镜观察，发现其病理结构的变化与细菌的感染直接相关[3]，眭维耻等也报道了脱发与细菌的感染有关[4]。

本文以中医药理论为指导，选取广藿香、苦参、桑叶、制首乌、丹参、熟地、侧柏叶、黄芪、墨旱莲、五倍子等12味中药配伍组方，经过提取精制得到“香参”防脱育发液，以达到滋补肝肾、滋阴补血、活血化瘀、祛风除湿、清热凉血、燥湿化痰、健脾补气、化瘀通络之功效，以促进毛发生长，并对其抑菌能力及促进毛发生长的效果进行了验证。实验表明，“香参”防脱育发液经局部给药，不仅可使药物活性成分直达病所，疏通经脉，调和气血，改善脱发症状，还能够显著抑菌细菌滋生，通过局部调理促进毛发生长。

1 仪器与材料

1.1 药材

处方中药材均购自西安市万寿路中药材市场。

1.2 试药

章光101发珍育发剂（北京章光101科技发展有限公司，批号：20091201），Na2S（天津市福晨化学试剂厂，批号：20110105）。

昆明种小鼠：体重15～20g，雌雄各半，第四军医大学动物实验中心提供。

1.4 菌种

大肠埃希氏菌（44102-s-03-01）；金黄色葡萄球菌（1.0089-s-03-01），白色念珠菌（44102-s-03-01）。

1.5 仪器

ALC210.4精密电子天平（赛多利斯）；Olympus DP70生物显微镜；BHC-1300IIA2超净工作台（苏州苏洁净化设备有限公司）；DHP恒温培养箱（常州菲普实验仪器厂）。

随着计算机信息技术的不断进步，人们对传统生鲜产品的消费观念也有所改变，从而促进了冷链物流行业的发展。生鲜产品的保质期不变较短，且在运输的过程中会产生极大的耗损，常温下有易腐，因此，生鲜产品对运输过程中温度的要求非常严格。任何大小型规模的生鲜产品企业中对生鲜产品的冷链物流投入都可达到销售成本的30%～40%之多。所以，一方面企业有效管理冷链物流的投入非常重要。另一方面能否完善生鲜产品冷链物流标准体系化建设对生鲜产品行业意义深远。

2 “香参”防脱育发液的制备

（1）称取处方量广藿香，加入8倍量水，浸泡30min，水蒸汽蒸馏，提取、收集挥发油；分离药液与药渣，药渣中再加8倍量水，煎煮30min，合并2次煎液，过滤，滤液备用；（2）称取处方量剩余药材，加入8倍量水，浸泡30min，煎煮提取2次，每次30min。合并煎液，过滤，滤液备用；（3）将（1）和（2）项中所得滤液合并，浓缩至相对密度1.08，醇沉，静置24h；（4）回收乙醇至无醇味，得药材清膏；（5）在（1）项所得挥发油中加入适量吐温-80，与药材清膏混合均匀；纯化水定容调整浓度；于4℃冷藏24h，过滤，即得棕褐色“香参”防脱育发液。

3 “香参”防脱育发液的抑制作用

3.1 PBS磷酸盐缓冲液的制备

取无水NaH2PO42.83g，KH2PO41.36g加入1000mL蒸馏水中，待完全溶解后，调pH值至7.2～7.4，于121℃高压蒸气灭菌20min，备用。

3.2 “香参”防脱育发液对细菌的抑制作用

脱发患者除脱发外还常表现为头屑多，头皮瘙痒，小红颗粒，有虫蚀咬感，跟头部细菌、真菌感染的症状相似，类似中医的“虫蚀”侵犯。据文献报道，造成脱发的菌种有多种，具有代表性的常见菌种主要有大肠埃希氏菌[5-7]、金黄色葡萄球菌[8]、白色念珠菌[7，9]等，本文即针对此3种常见菌种，对“香参”防脱育发液的抑菌性能进行了初步研究，方法如下：

（1）大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌分别24h斜面培养，培养物用PBS洗下，分别制成浓度为1×104～9×104cfu·mL-1菌悬液，备用；

（2）取测试样液（所制备的“香参”防脱育发液）5mL和对照样液（无菌水）5mL各4管；

（3）分别在测试样液和对照样液内滴加100μL菌悬液，均匀混合，开始计时，分别在2、5、10、20min时用无菌镊将各样液（0.5mL）投入含5mLPBS的试管内，充分混匀并适当稀释，取其中3个稀释度（分别为10-4、10-5、10-6），分别吸取各样液0.5mL，置于2个平皿，用40～45℃的营养琼脂培养基15mL作倾注，转动平皿，使其混合均匀，琼脂凝固后翻转平板，使其倒置。大肠埃希氏菌、金黄葡萄球菌37℃培养48h作活菌菌落计数，白色念球菌28℃培养72h作活菌菌落计数。

式中X:抑菌率%；Nc：对照样品平均菌落数，cfu· mL-1；Ns：测试样品平均菌落数，cfu·mL-1。

3.3 实验结果

结果表明，在实验条件下，“香参”防脱育发液对大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌、白色念球菌的抑制率随着作用时间的延长而增大，当作用时间超过10min时，“香参”防脱育发液对3种细菌的抑制率均达到99%以上，表明该产品对大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌、白色念球菌有较强抑制、杀灭作用。

表1 原液浓度及大肠埃希氏菌菌落数Tab.1 Initial concentration and Escherichia coli colonies

表2 药物作用不同时间后对大肠埃希氏菌的平均抑杀率Tab.2 Average killing rate after the drug effecting on Escherichia coli for different time

表3 原液浓度及金黄色葡萄球菌菌落数Tab3 Initial concentration and Staphylococcus aureus colonies

表4 药物作用不同时间后对金黄色葡萄球菌的平均抑杀率Tab.4 Average killing rate after the drug effecting on Staphylococcus aureus for different time

表5 原液浓度及白色念珠菌菌落数Tab.5 Initial concentration and Candida albicans colonies

表6 药物作用不同时间后对白色念珠菌的平均抑杀率Tab.6 Average killing rate after the drug effecting on Candida albicans for different time

4 “香参”防脱育发液的药效学研究

4.1 对小鼠脱毛区体毛长度及重量的影响

4.1.1 实验方法取小鼠36只，雌雄各半，适应性喂养3d，将其背部毛剪短，将脱毛剂（10%Na2S）涂于小鼠背部，3min后，温水洗净，以小鼠背部光滑，无伤无残毛为净，脱毛面积约2cm×2cm。

次日将脱毛小鼠随机均分为6组，雌雄各半，其分组及给药方案见表7。

表7 分组及给药方案示意表Tab.7 Grouping and administration scheme of table

各组给药后每3天，于同一时间观察小鼠背部皮肤变化及毛发生长情况；并在每组小鼠脱毛区相同位置取最长毛6根，测定长度；18 d后，脱颈处死各组小鼠，取脱毛区毛皮，用14mm打孔器于每鼠脱毛区相同位置取圆形皮片，用手术刀刮下皮片上所有体毛，精密称定。

4.1.2 实验结果

图1 阳性对照组、正常组和阴性对照组对小鼠毛发长度的影响Fig.1 Effect on murine hair length of the positive control group,normal control group and negative control group

由图1可知，阳性对照组药物促进小鼠毛发生长的作用强于正常组和阴性对照组，而“香参”防脱育发液高剂量组促进小鼠毛发生长的作用强于阳性对照组，且随着时间延长差异增大。

图2 阳性对照组、高剂量组对小鼠毛发长度的影响Fig.2 Effect on murine hair length of the positive control group and high dose group

由图2可知，剂量组第3～6d和阳性对照组差异较小，但第9d以后差异变大；低剂量组在9d以前促进毛发生在的速度低于阳性对照组，9d以后其生长速度增大。

图3 阳性对照组、中剂量组对小鼠毛发长度的影响Fig.3 Effect on murine hair length of the positive control group,middle dose group

图4 阳性对照组、低剂量组对小鼠毛发长度的影响Fig.4 Effect on murine hair length of the positive control group,low dose group

由图3、4可知，“香参”防脱育发液促进小鼠毛发生长的作用随着剂量的增大而增强，且高剂量组小鼠的毛发长度显著高于中剂量和低剂量。

图5 高、中、低剂量组对小鼠毛发长度的影响Fig.5 Effect on murine hair length of the high,middle, low dose group

由图5可知，高、中、低剂量组促进生长的毛发的重量高于阳性对照组、正常组和阴性对照组。

图6 各给药组对小鼠脱毛区体毛重量的影响Fig.6 Each group of mice body weight on the hair removal area

结果表明，“香参”防脱育发液具有显著的促进小鼠毛发生长的作用，且其作用强度具有剂量依赖性。

4.2 对小鼠脱毛区皮肤组织学的影响

同4.1实验操作，于第18日将各组小鼠处死，取脱毛区皮肤组织，用10%甲醛固定，沿毛囊纵向切面取组织3块，每块长1.5cm，常规组织脱水、石蜡包埋，HE染色，光镜镜检观察小鼠皮肤组织：（1）真皮浅层血管管径（μm），随机测定5个横切毛细管管径，计算平均数；（2）真皮浅层血管数（个），以200倍视野大小计数，数5个视野，计算平均数；（3）真皮浅层新生毛囊数（个），以100倍视野大小计数，数5个视野，计算平均数。结果见下表5。

表8 “香参”防脱育发液对小鼠脱毛区皮肤组织学的影响Tab.8 Influence on mouse hair removal skin histology of "Xiangshen"hair anti dropping liquid

结果表明，所有小鼠皮肤组织均无破损、水肿、充血、炎症等反应，表皮无明显增生。“香参”防脱育发液高、中、低3剂量组和阳性对照组、阴性对照组相比，均能增加小鼠脱毛区皮肤的真皮血管管径和毛囊数，其中“香参”防脱育发液高、中剂量组小鼠的真皮血管管径增加有明显差异，小鼠的毛囊数增加亦有明显差异。各给药组真皮血管管径和毛囊数比阴性对照组有明显增加。实验表明，“香参”防脱育发液能改善毛发营养，刺激毛囊与毛发再生。

5 结论

外用制剂具有使用方便，克服了长期口服给药的不便、肝肾负担与胃肠道刺激等副作用，且携带方便，可不间断用药而保证药效，使药物活性成分直达病所，本文中所得“香参”防脱育发液是在中医药理论指导下，针对脱发的病因病机进行选药组方，具有滋补肝肾、滋阴补血、活血化瘀、祛风除湿、清热凉血、燥湿化痰、健脾补气、化瘀通络的功效。实验结果表明“香参”防脱育发液具有显著的促进毛发生长的作用，且能够有效抑制细菌滋生，并且可通过药物成分对于经络穴位的刺激增强药效，长期使用，安全可靠。因此，“香参”防脱育发液具有广阔的应用前景。

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Preparation and performance study of“Xiangshen”anti hair dropping and nourishing liquid*

ZHAO Ning，LI Wei-ze，KANG Xue-ning，WANG Huan，CUI Yan-hua
（College of Pharmaceutical Science,Xi'an Medical University,Xi'an 710021，China）

"Xiangshen"anti hair dropping and nourishing liquid was prepared,and the bacteriostatic performance and on hair growth promoting effect was studied;Under the guidance of Chinese medicine theory,"Xiang Shen"anti hair dropping and nourishing liquid was prepared by the method of water extraction and alcohol precipitation.Its antibacterial action and hair growth promoting effect on model mice were studied.The liquid antibacterial efficiency increased with the prolonging of time,when the time is more than 10 min,its inhibitory effect on Escherichia coli,Staphylococcus aureus,Candida albicans rate were more than 99%,and can significantly promote the mice hair grow,the strength of effect in a dose dependent manner.The liquid not only effectively inhibit bacterial growth and reproduction,and has significant effect on mice hair growth.It has good application prospects.

“Xiang Shen”antihairdropping and nourishing liquid；bacteriostatic；antihairdropping；hairgrowth

R932

A

1002-1124（2014）03-0061-04

2014-01-02

陕西省西安医学院校级课题：纯中药“香参”育发精的研制（No.11FZ12）；陕西省大学生创新创业训练计划项目：一种具有防脱育发作用的中草药洗发乳研制（No.201211840013）

赵宁（1985-），女，硕士，讲师。