类风湿性关节炎患者血清超氧化物歧化酶和血管性血友病因子水平变化及意义

刘 莲，蒋红梅，费 樱，胡昌维

类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis，RA)，是一种临床上常见的全身性自身免疫性疾病，主要表现为对称性的、涉及多个关节的、慢性的关节疾病和滑膜关节炎，其基本病理改变是关节滑膜炎症和血管翳的形成[1]，但其具体发病机制现仍尚未完全明确[2]。在我国RA患者较多，发病率为0.32%～0.36%[3-4]。黄健等[5]研究表明，超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)是机体清除含氧自由基的主要酶系之一，其活力反映机体清除氧自由基的能力。多数RA患者病变过程中在关节腔内出现一种特征性的病理产物-血管翳，从而引起血管内皮损伤。血管内皮细胞损伤时，会释放其独特内容物-血管性血友病因子(von willebrand factor，vWF)，其血清浓度升高可视为内皮细胞损伤的标志[6]，C反应蛋白(CRP)、血清类风湿因子(RF)是临床常用的判断RA疾病活动与否的重要指标[7]。本研究旨在探讨RA患者血清SOD与vWF的水平变化，并结合RF和CRP进行分析。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2012年10月—2013年2月贵阳医学院附属医院门诊和住院病房确诊为RA的患者55例作为RA组，其中男17例，女38例；年龄24～76岁，平均(51.3±14.0)岁。患者均符合2009年美国风湿病学会(ACR)和欧洲抗风湿联盟(EULAR)共同发布的RA分类标准[8]。另选取同期在本院体检健康者30例作为对照组，其中男10例，女20例；年龄23～71岁，平均(49.1±13.7)岁。两组受试者性别、年龄比较，差异无统计学意义(χ2=0.053，t=0.698，P>0.05)。

1.2 主要试剂和仪器 SOD检测试剂盒，由上海裕平生物科技有限公司提供；vWF检测试剂盒，由上海裕平生物科技有限公司提供；RF检测试剂盒，由美国贝克曼库尔特商贸(中国)有限公司提供；CRP检测试剂盒，由上海科华生物工程股份有限公司提供；BIO-RAD XMark全波长酶标仪，由上海创萌生物科技有限公司提供；台式低速离心机，由上海医疗器械厂提供。

1.3 方法 于清晨空腹、安静状态下，采集两组受试者静脉血5 ml，以3 000 r/min离心5 min，离心半径为10 cm，置于-20 ℃冰箱中保存。血清RF检测采用免疫散射比浊法，CRP检测采用免疫速率散射比浊法，血清SOD和vWF检测均采用生物素双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)，均严格按照试剂盒说明书操作。

2 结果

2.1 两组血清SOD和vWF比较 对照组血清SOD高于RA组，vWF低于RA组，差异均有统计学意义(P<0.05，见表1)。

Table1 Comparison of serum SOD and vWF between the two groups

组别例数SOD(μg/L)vWF(ng/L)对照组30169.8±53.1691.4±246.4RA组55129.6±27.61134.1±490.7t值3.8685.532P值<0.05<0.05

注：SOD=超氧化物歧化酶，vWF=血管性血友病因子

2.2 RA组血清RF和CRP检测结果 RA组患者中RF阳性42例(76.4%)，阴性13例(23.6%)；CRP阳性32例(58.2%)，阴性23例(41.8%)。

2.3 RF阳性与阴性者血清SOD和vWF比较 RF阳性与阴性者血清SOD和vWF比较，差异均无统计学意义(P>0.05，见表2)。

Table2 Comparison of serum SOD and vWF between the RF positive and RF negative RA patients

例数SOD(μg/L)vWF(ng/L)RF阳性42126.0±28.31179.4±518.1RF阴性13134.4±14.1987.8±368.9t值1.4291.475P值>0.05>0.05

注：RF=血清类风湿因子

2.4 CRP阳性与阴性者血清SOD和vWF比较 CRP阳性与阴性者血清SOD比较，差异无统计学意义(P>0.05)；CRP阳性者血清vWF高于CRP阴性者，差异有统计学意义(P<0.05，见表3)。

2.5 相关性分析 RA患者血清SOD与vWF、RF、CRP均无直线相关关系(r=0.090、-0.072、-0.032，P>0.05)；血清vWF与SOD、RF均无直线相关关系(r=-0.064、0.040，P>0.05)，与CRP呈正相关(r=0.529，P<0.05)。

Table3 Comparison of serum SOD and vWF between the CRP positive and CRP negative RA patients

例数SOD(μg/L)vWF(ng/L)CRP阳性32128.2±22.71288.3±500.6CRP阴性23131.6±29.9934.9±406.2t值0.0802.961P值>0.05<0.05

3 讨论

RA是一种常见的系统性、慢性自身免疫性疾病，通常以滑膜炎症、血管翳形成及关节损伤为主要病理特征，其病因至今尚不完全清楚。孔庆胜等[9]研究显示，RA患者的发病机制与氧化应激密切相关。正常生理情况下，体内存在有效的抗氧化防御体系，使氧化物质的产生与清除保持动态平衡[10]，一旦平衡被打破，就会使细胞内蓄积氧化性物质而引发氧化反应[11]。SOD是一种抗氧化类物质，可清除人体内含氧自由基，其活性高低反映机体清除自由基能力的强弱，是机体清除氧自由基、发挥抗氧化作用及自由基破坏的敏感指标[12]。本研究结果显示，与对照组相比，RA组血清SOD降低，与陈晗等[13]研究结果相符，提示RA患者体内抗氧化能力减弱。氧化应激可以促进活性氧簇和活性氮簇的产生，其可作为信使分子参与调节基因表达等生理病理过程，进而促进对内皮细胞的损伤[14]。内皮受损可释放大量的活性物质，如vWF、一氧化氮(NO)、内皮素1(ET-1)等，其中vWF是反映血管内皮受损的重要指标[7]。vWF主要由血管内皮细胞合成，具有内皮特异性及良好稳定性，因此其变化可反映内皮细胞损伤、异常活化或功能障碍[15]。王艳娇等[16]研究结果显示，当血管内皮损伤时，vWF合成释放增多。本研究结果显示，RA组血清vWF高于对照组，提示RA在发生发展过程中可能存在血管内皮损伤。

CRP、RF是临床常用的判断RA疾病活动与否的重要指标，RF在RA患者中的检出率很高，RF阳性支持早期RA的倾向性诊断。Rojas-Villarraga等[17]报道，无论任何时期发病的RA患者均发现有内皮功能紊乱，并且其证明血清RF阳性与内皮功能紊乱有明显的关系。本研究结果显示，RF阳性与阴性RA患者相比，血清vWF、SOD无差异，可能与RF阴性样本量过少有关，可进一步增大样本量进行探究。CRP是一种急性时相反应蛋白，其在炎症开始数小时即可升高，能较好地反映RA疾病活动与否。CRP阳性与阴性RA患者相比，血清SOD间无差异，而vWF显著升高。且RA患者血清SOD与vWF、RF、CRP及 vWF与SOD、RF均无直线相关关系，仅vWF与CRP呈正相关，与王昌富等[18]研究相符，提示vWF水平与病情的急性期反应有关。

苏敏等[7]研究发现，RA患者均存在血管内皮功能失调，与机体氧化应激水平有关，氧化应激水平升高，活性氧在体内蓄积，可直接由于内皮细胞毒性作用造成血管内皮功能障碍并启动动脉粥样硬化进程。同时，活化的内皮细胞也产生大量活性氧，加重氧化应激状态，最终导致内皮损伤和内皮障碍[19]。综上所述，RA患者体内抗氧化能力减弱，且可能存在血管内皮损伤。而RA患者氧化应激反应、血管内皮功能及二者之间的关系，仍需在本研究基础上结合RA患者的病情、病程、并发症及临床治疗方案等因素，扩大样本量、增加检测指标作进一步研究。

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