苗药六月雪化学成分及药理作用研究进展

鲁利民 陆锦锐 韩忠耀

(1中国中医科学院西苑医院药剂科，北京 100091；2贵州省黔南民族医学高等专科学校药学系，都匀 558000)

六月雪，首载于 《本草拾遗》，又名白马骨，满天星 （《阳春县志》），苗族药记载名为苗语名Reib ghueub mes-“锐 过 买 ” 或 “唣 本 ” (湘 西)，Det vilaheib-“豆野给” 或 “加厄陔” (贵州黔东南)。 六月雪来源于茜草科植物小灌木白马骨Serissa foetida Comm.的全草或根，主要含有挥发油类，甾体类、萜类以及糖类等化学成分；其性凉、味苦、微辛，归肺、脾、肝、胃经[1]。具有疏风利湿、清热解毒的功效，临床上主要用于时行感冒，咳嗽咽痛，牙龈肿痛，目赤肿痛，湿热黄疸，暑湿泻痢，淋浊带下，风湿关节痛，历节风痛，跌打损伤以及痈疽肿毒，瘰疬恶疮等症。亦还可用于治疗毒蛇咬伤。六月雪主要分布在我国西南、两广一带。而贵州一带的苗族民间医生习用六月雪治疗风湿痹痛以及一些疑难杂症。因其药理作用广泛，治疗效果显著，采集方便，而被黔南一带的苗族民间地区广泛应用。

1 化学成分

1.1 挥发油类成分 倪士峰等[2]针对六月雪在不同季节所含的化学成分进行了比较深入的研究：采用水蒸气蒸馏提取法，乙醚萃取挥发油，用GC/MS法对样品进行分析发现，深秋季节与夏季六月雪中分别鉴定出43、72个挥发油组分。其中含量在3%以上的组分有甲基亚麻酸酯，石竹烯，2-甲氧-4-乙烯基苯酚，3-己烯-1-醇，乙苯，库贝醇，1b，5，5，6a-tetramethyl-octahydro-1-oxa-cyclopropa[a]inden-6-one， δ-9(10)-四氢广木香内酯-1-酮，大根香叶酮D以及5-丙酰基-2-氯-苯乙酸甲酯等10种挥发油成分。六月雪不同季节挥发油类化学成分的差异，揭示了该植物在生理活跃期时能够产生较多的二次代谢产物，反映了该植物在药用价值上的微妙差异，建议把采收季节作为该植物的质控点。

1.2 萜类化合物与甾体类成分 王少芳等[3]将六月雪全草粉碎得到的粗粉，用工业酒精回流提取后浓缩，然后用有机溶剂进行梯度萃取，采用柱层析技术、薄层层析技术等，最终从六月雪中得到了三个单体化合物，分别是齐墩果酸、齐墩果酸的乙酰化物和β-谷甾醇。韦万兴等[4]从六月雪中分离得到豆甾醇。冯顺卿等[5]对瑶药白马骨开展化学研究，得到了乌索酸，即熊果酸，为五环三萜类化合物。危莉等[6]将六月雪的全草粗粉用甲醇提取，提取物作为供试品溶液，以车叶草苷为对照品，用薄层层析技术，以氯仿：乙酸乙酯：异丙醇 （1∶2∶2）展开，发现与对照品相应位置上显示有相同的斑点，证明生药六月雪中含车叶草苷。张强等[8]从白马骨叶中得到胡萝卜苷，即谷甾醇-3-0-葡萄糖苷。

随着六月雪物质基础研究的深入，针对六月雪中的具代表性、指标性化学成分的含量研究逐渐得到开展。程齐来等[7]采用RP-HPLC方法，对生药六月雪中齐墩果酸的含量进行了检测，为该药质量标准的制订与药物的开发应用奠定了基础。

1.3 木脂素成分 韦万兴等[4]从六月雪中分离得到5-乙酰基-6-羟基-2-异丙烯苯并呋喃与5-乙酰基-6-羟基-2-丙酮苯并呋喃，二者为首次从该植物中分离得到，属于新木脂素类化合物。张强等[8]从白马骨叶中得到（+）-松脂素、 （+）-麦迪奥脂素，二者均为从该属植物中首次分离得到的木脂素类化合物。

1.4 醌类成分 冯顺卿等[5]对瑶药白马骨开展化学研究中，通过95%乙醇浸泡，有机溶剂萃取，经过柱层析技术，光谱鉴别技术等手段，得到了1，4-二羟基-6甲基蒽醌与1，3，5，7-四甲氧基蒽醌，这两者均为醌类化合物。

1.5 金属元素 朱修援等[9]采用火焰原子吸收光谱法对六月雪中茎部的Ca、Zn、Mg、Fe、Cu的含量进行了研究，回收率较好，为生药六月雪中金属元素的检测提供了技术支撑。

1.6其他成分 六月雪也含有其他化学成分，如邻苯二甲酸二乙酯[4]、多糖[10]等。

2 药理作用

2.1 抗菌、解热作用 刘敏等[11]采用平板测定法研究发现，六月雪的水提液对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草杆菌以及痢疾杆菌和绿脓杆菌有抑制作用，且对大肠杆菌和枯草杆菌的抑制作用较为显著，效果好于异戊酸钠。王爱红等[12]采用阿司匹林为阳性对照组研究发现，六月雪的水提液可以使由干酵母所导致发热的大鼠以及由大肠杆菌内毒素引起发热的家兔体温下降，且与阳性对照组无显著差异，说明六月雪的水提液具有很明显的解热作用。Lien-Chai CHENG等[13]通过抗病毒活性离体实验证明六月雪提取物具有一定的抗病毒生物活性，值得深入研究。

2.2 对免疫功能的作用 朱秋萍等[14]研究发现，六月雪水提取物可以显著提高小鼠的食欲，从而有效增加小鼠体重，促进其生长发育。此外还发现六月雪的水提取物可以明显增加小鼠胸腺重量，提高胸腺指数，且此作用呈现剂量依赖性。韦金育等[15]对六月雪的根部用甲醇提取后浓缩得到六月雪浸膏。而后采用体外抗肿瘤药物筛选法 (MTT)法测定发现六月雪提取原液及其稀释液有很强的抗肿瘤活性，对肿瘤细胞的杀伤率最高可达85.30%。以上结果说明六月雪水提取物具有增强机体免疫力，抗肿瘤等作用。但其作用机理有待进一步研究。

2.3 抗乙肝病毒作用与保肝作用 针对复方六月雪及六月雪提取物抗乙肝病毒与保肝作用，开展了比较系统与深入的研究。张士军等[16]阐述了其对HepG2.2.15细胞HBsAg和HBeAg的抑制作用；张士军等[16]通过MTT法，研究了其对HepG2.2.15细胞HBV DNA的抑制作用；张士军等[18]采用血清药理学法进行实验，通过ELISA法测定，研究了其对HepG2.2.15细胞HBsAg和HBeAg的抑制作用；杨霞芳等[19]通过体外实验研究，阐述了其对H BsAg和H BeAg的抑制作用；杨霞芳等[20]采用实时荧光定量PCR法考察了复方六月雪的抗HBV作用；针对复方六月雪对鸭乙型肝炎病毒的抑制作用[21-22]，通过药理实验及生物活性实验等方法，研究者也进行了相对深入的考察与研究。同时，研究表明，复方六月雪对急性化学性肝损伤[23]、六月雪提取物对小鼠实验性肝损伤[24]均具有显著的保护作用，说明复方六月雪或六月雪提取物具有较好的保肝作用。

2.4 抗关节炎作用 宋振玉等[25]通过大鼠蛋白性及甲醛性关节炎动物模型，在对多种民方、经方等中医临床上常用的或民间常用的单方进行抗关节炎活性筛选研究考察中发现，六月雪对大鼠甲醛性关节炎具有一定的抑制作用，揭示了六月雪能够抗关节炎，具有抗关节炎的生物活性。

2.5 耐缺氧作用 宓静英等[26]通过常压耐缺氧实验动物模型与异丙肾上腺素增加心肌耗氧量实验动物模型，考察了六月雪提取物耐缺氧的作用，结果证明六月雪提取物具有比较显著的耐缺氧作用。

2.6 对肾脏作用 孙响波等[27]在对六月雪治疗肾脏疾病探源中指出，六月雪通过降低蛋白尿、血尿素氮及肌酐水平，对于肾脏疾病的治疗具有独特的优势。

2.7 祛黄褐斑作用 在对白附子、金银花、白及、六月雪4味中药乙醇提取物祛黄褐斑作用的考察研究中，发现六月雪乙醇提取物具有一定强度的祛黄褐斑作用，且六月雪乙醇提取物只在特定的质量浓度时才有祛黄褐斑作用[28]。

2.8 对胃黏膜损伤的保护作用 通过无水乙醇法、阿司匹林法、水浸应激法及利血平法实验小鼠胃黏膜损伤动物模型，测定给药后胃黏膜损伤面积，结果证明六月雪对胃黏膜损伤具有保护作用[29]。在对无水乙醇胃饲诱发急性胃黏膜损伤的动物模型考察研究中发现，六月雪提取物对实验性胃黏膜损伤具有显著的修复作用[30]。

2.9 抑制酪氨酸酶作用 用多巴色素法测定对酪氨酸酶的抑制作用，傅国强等[31]发现六月雪能够抑制酪氨酸酶作用，治疗针对因酪氨酸酶活性异常所致的色素增加性皮肤病具有较好的应用前景。

2.10 毒性 夏勇等[32]对六月雪进行系统的毒理学研究：六月雪大、小鼠急性经口毒性LD50，雌雄两性均大于5g/kg B.W.，最高可达10g/kg B.W.，按急性毒性分级属实际无毒类。又对其进行三项诱变实验，结果显示阴性；进而对其进行Ames试验以及小鼠骨髓细胞微核试验和小鼠精子畸形试验，结果均显示为阴性，且阳性组均显示阳性结果。试验结果说明六月雪无毒，无致突变作用，对人体无害。

3 结语

六月雪是极具地方特色的苗药，在民间具有广泛的应用。六月雪资源丰富，具有较高的药用价值，对民族医学、民族药学具有突出的贡献。苗药六月雪丰富的化学成分是其具多种生物活性的物质基础。本文通过对苗药六月雪化学成分及药理作用的收集整理，旨在为后期的研究开发奠定基础，挖掘其潜在功能，从而达到对苗药六月雪的开发应用及对苗药发扬光大的目的。

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