广西种猪布鲁菌病流行监测

李 军 ，李常挺，许力干，陈泽祥，胡 帅 ，李常春，彭 昊 ，潘 艳 ，杨 威

（1.广西兽医研究所，广西 南宁 530001；2.广西畜禽疫苗新技术重点实验室，广西 南宁 530001；3.广西隆安县动物疫病预防控制中心，广西 隆 安 532700；4.广西靖西县动物疫病预防控制中心，广西 靖西 533800）

猪布鲁菌病是一种由布鲁菌感染引起的人兽共患传染病，带菌猪是本病的传染源，病菌主要侵害生殖系统和淋巴系统，可随精液传播给母猪，导致母猪怀孕流产，并可随流产胎儿、胎衣、胎水、尿、阴道分泌物大量排出，污染产房、猪圈和其他物品，给人类健康和畜牧业发展带来严重危害[1]。

广西曾经是我国猪布鲁菌病主要疫区，1952年广西从香港引进布鲁菌阳性猪后，该病即在广西流行和传播。1981年广西首次对布鲁菌病疫情进行普查，1985年基本查清了疫区分布、人畜感染和发病情况、流行菌株的种型等流行病学特征，在此基础上开展了20多年布鲁菌病的防制工作，至2007年广西家畜布鲁菌病防治效果达到了国家农业部颁布的稳定控制标准并通过验收，所有家畜不再进行疫苗免疫[2-4]。

由于广西部分布鲁菌病老疫区存在着家畜的盲目引种和无序流动，防疫条件差，疫源可能未彻底清除等导致猪布鲁菌病疫情反弹的风险，我们于2009-2012年在广西14个市开展种猪布鲁菌病的流行监测，以便及时掌握疫情动态，防止猪布鲁菌病的重新发生和传播，保护人畜健康。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 待检血清 根据历年广西猪布鲁菌病流行情况，选定南宁、柳州、桂林、梧州等14个市曾经发生过猪布鲁菌病的县（区），对曾经检出布鲁菌病阳性猪的村（场）开展猪布鲁菌病血清学监测，每年在固定监测点和非固定监测点至少采集种猪血清200头份和100头份，4年共采集公猪血清4 548份和母猪血清17 579份。

1.1.2 待检病料 在 固定监测点采集胎衣1 612份，阴道分泌物458份，流产胎儿34份，布鲁菌病抗体阳性猪的睾丸1份，肺2份，脾2份，肾2份进行布鲁菌的分离。

1.1.3 主要试剂和仪器 布 鲁菌虎红凝集抗原和凝集试管抗原，购自中国兽医药品监察所；胰蛋白示，购自英国Oxoid公司；马血清，购自美国Thermo公司；细菌基因组DNA提取试剂盒，购自天根生化科技（北京）有限公司；2×PCR Taq MasterMix、DNA Marker 2，购自广东东盛生物科技有限公司；PCR仪，购自日本TaKaRa公司；凝胶成像系统，购自美国Alpha Inotech公司；CO2培养箱，购自美国Thermo公司。

1.2 方法

1.2.1 待检血清的检测 按 照《动物布鲁氏菌病诊断技术GB/T18646-2002》进行。应用虎红平板凝集试验初筛待检血清；再用试管凝集试验对阳性和可疑的血清进行确认。

1.2.2 布鲁菌的分离 在 无菌条件下，将采集的胎衣、阴道分泌物、流产胎儿、睾丸、肺、脾、肾接种在含5%马血清的胰蛋白示琼脂培养基，置5%CO2培养箱中37℃培养7 d。按陈泽祥等的方法对分离细菌进行布鲁菌的PCR鉴定[6]。

2 结果

2.1 血清检测结果 根据监测方案要求，结合广西猪布鲁菌病历史疫区的分布情况，2009-2012年对广西14个市69个县（区）的4 548份公猪血清和17 579份母猪血清进行布鲁菌病抗体检测。

在2009年监测中，南宁市隆安县某农村养殖户饲养的1头公猪和1头母猪的血清经虎红平板凝集试验和试管凝集试验证实为布鲁菌病抗体阳性。公猪年龄为3岁，已经配种使用2年，主要在本村使用；母猪为该养殖户自养。对该养殖户同村及周边村饲养的公猪和母猪进行布鲁菌病抗体检测，但是未检出阳性猪。

在2011年监测中，南宁市宾阳县某农村养殖户饲养的6头母猪血清呈虎红平板凝集试验阳性，经试管凝集试验确诊，2份可疑，4份阴性。3周后，对血清可疑的母猪重新进行采血检测，试管凝集试验仍然为可疑反应。对其阴道分泌物进行布鲁菌分离，未分离出布鲁菌；使用PCR方法对阴道分泌物进行检测也呈阴性。该养殖户饲养的其他猪也没有出现布鲁菌病临床症状，根据《动物布鲁氏菌病诊断技术》（GB/T18646-2002）的判定标准，综合判定为阴性。

2010年和2012年监测的血清样品经虎红平板凝集试验检测均为阴性。

2.2 布鲁菌的分离和鉴定 对2009-2012年采集的1 612份胎衣，458份阴道分泌物，34份流产胎儿，布鲁菌病抗体阳性猪睾丸、肺、脾、肾无菌接种进行布鲁菌的分离，对分离细菌进行PCR鉴定，但是未分离到布鲁菌。

虽然未能从布鲁菌病抗体阳性猪的病料中未分离出布鲁菌，但是按照《动物布鲁氏菌病诊断技术》（GB/T18646-2002）的判定标准，将这2头猪判定为布鲁菌病阳性，按《畜禽病害肉尸及其产品无害化处理规程GB 16548-1996》进行无害化处理。

3 讨论

2009-2012年广西种猪布鲁菌病的监测结果显示，近四年广西种猪布鲁菌病试管凝集试验阳性率均在2%以下，依然在稳定控制标准要求以内，说明广西在2007年取得的布鲁菌病防治成果得到了巩固，这主要得益于各级畜牧兽医主管部门将布鲁菌病防治纳入工作重点，做到专人负责，强化防控，对老疫点常年实时监测，监测经费也年年得到落实。

在监测工作中，我们也发现存在一些问题，如大部分农村养殖户缺乏动物疫病防控知识和自我保护意识，在采样时不愿意配合，误以为保定和采血对猪的生长有影响，即使补贴也不愿给予采血。在动物流产时，无安全防护即徒手接触流产胎儿、分泌物等；其次，前几年国内畜产品价格的上涨，导致异地引种引畜和境外家畜走私现象日益增多，引种业主的防疫报检意识淡薄，加上行政许可制度约束力度差，导致家畜引进管理不到位，存在着严重的疫情隐患。2011年和2012年发生的羊种布鲁菌病疫情就是通过无序引种而发生[6]。第三，布鲁菌病的防控是一项专业性强、涉及面广、工作量大的持久性工程，需要大量的人力、物力和财力作保障，但目前各级政府对布鲁菌病防控经费投入较少，一些县区级甚至没有投入。同时，一些村级防疫员在防控工作中存在应付现象，没有按时并如实汇报家畜养殖和疫病信息。

针对在监测工作中存在的问题，今后继续作好布鲁菌病疫情的监测和检疫，增加经费投入和加强对家畜引进的管理，严格引种审批程序，全程跟踪，引进后隔离检疫方能混养。根据当前猪布鲁菌病传染源主要是农村散养猪的情况，加强对农村散养猪只的抗体检测，发现阳性猪只坚决予以扑杀；同时在农村推广人工授精技术，切断其传播途径。定期在布鲁菌病老疫区举办布鲁菌病防控知识讲座，普及布鲁菌病防控知识，提高基层兽医人员和农村养殖户的防治水平。对村级防治员实行责任制，强化工作责任心，以便及时准确地掌握疫情动态。

[1]陈溥言.兽医传染病学[M].5版.北京:中国农业出版社，2006：135-141.

[2]梁江明，曾竣，秦石英，等.广西布鲁氏菌病的历史、现状、问题及防治对策 [J].地方病通报，2006，21（1）：50-53.

[3]陈泽祥，吴礼洁，许力干，等.广西家畜布鲁氏菌病现状及防治对策 [J].广西畜牧兽医，2005，21（3）:106-107.

[4]广西科技信息网.广西家畜布鲁氏菌病综合防治研究及应用2008.http://www.gxsti.net.cn/gxsat/kjcg/cgdj/170786.shtml.

[5]陈泽祥，许力干，禤雄标，等.布鲁氏菌病病原快速检测方法的建立 [J].广西农业科学，40（7）:915-918.

[6]李常挺，李军，覃俊江，等.广西黑山羊羊种布鲁氏菌的分离和鉴定 [J].中国动物检疫，2012，29（8）:46-47.