老年系统性红斑狼疮患者血清干扰素调节因子的检测及意义

韩学卫

(宁夏人民医院肾内科，宁夏 银川 750021)

系统性红斑狼疮(SLE)的主要特征为大量自身抗体出现于血清中，激活补体和沉淀免疫复合物，造成多个器官和系统受损，特别是累及肾脏，属于自身免疫性的一种疾病〔1〕。干扰素调节因子(IRF)家族为对干扰素表达进行调节的转录的一类因子。据相关研究显示，SLE发病期间，IRFs起作用，如IRF5、IRF7、IRF3、IRF1〔2〕。IRF4作为转录因子比较独特，免疫反应过程中表现出了各种各样的调节功能〔3〕，本研究旨在探讨SLE患者血清IRF4水平及发病机制。

1 资料与方法

1.1研究对象 2011年1月至2013年1月我院老年SLE患者82例，年龄(68.1±7.7)岁、男6例、女76例、体质指数(BMI)(22.0±3.2)kg/m2、空腹血糖(6.6±2.5)mmol/L、病程(3.6±2.1)年、SLE疾病活动性指数(DAI)≥6 56例、<6 26例、狼疮性肾炎(LN) 43例。依据美国风湿病学院1997年修订的SLE分类(ACR)标准。正常对照组68人为健康志愿者，性别、年龄与病例各自匹配。纳入标准：①无自身免疫性疾病史(包括直系亲属)；②近1个月内未服用免疫抑制剂或激素等的药物；③未有任何特征符合诊断SLE的标准，均知情同意。

1.2研究方法 参照SLEDAI量表自行设计调查问卷，内容主要为：SLE患者的关节痛、发热等的临床特征、实验室C-反应蛋白(CRP)、补体、抗体等的化验结果作为检测SLE患者的指标。抽取空腹时5 ml的静脉血放于非抗凝管内，于实验室中以1 500 r/min的速度离心血清5 min，保存于-80℃的冰箱内，从而避免冻融反复发生。在收集样本时，根据患者的主诉，临床医师参照实验室的相关检测指标，SLEDAI评分≥6者为活动期，<6者为稳定期。调查员经统一培训按要求填写调查问卷。划分非LN组与LN组：依据ACR标准中关于诊断SLE的标准，LN组只要符合下列其中一项：(1)检查活组织证实；(2)细胞管型、脓尿或血尿长期存在；(3)蛋白尿持续不小于0.5 g/d。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)，使用由卡尔文生物科技有限公司生产的试剂盒检测IRF4。采用美国Biotek Instruments有限公司生产的ELX-800酶标仪，三洋公司生产的-80℃的冰箱，上海一恒科技有限公司生产的DHP-9052电热恒温培养箱以及长沙湘仪离心机仪器有限公司生产的DD-5离心机等。比较SLE组与正常组、SLEDAI≥6与SLEDAI<6组、LN组与非LN组IRF4水平差异，分析IRF4水平与SLE患者的炎性相关指标〔包括SLEDAI、CRP、血细胞沉降率(ESR)、白细胞计数(WBC)〕、实验室指标(包括ANA滴度、抗ds-DNA、抗SM抗体、抗SSA抗体、抗SSB抗体)的相关性。

1.3统计学方法 应用SPSS19.0软件进行t检验和线性相关分析。

2 结 果

2.1不同组别IRF4比较 SLEDAI≥6的SLE患者的IRF4水平〔n=56,(6.19±0.98)ng/ml〕显著低于SLEDAI<6的患者〔n=26,(6.79±0.60)ng/ml〕(t=2.793，P<0.01)。SLE组〔(6.56±1.21)ng/ml〕与正常组〔(6.87±1.12)ng/ml〕无差异(t=1.615,P=0.11),LN组〔n=43,(6.69±0.58)ng/ml〕与非LN组〔n=39，(6.40±1.01)ng/ml〕无差异(t=1.613，P=0.11)。

2.2IRF4与SLE患者炎性相关指标相关性分析 IRF4水平与SLEDAI、CRP、ESR、WBC均无明显相关性(r=-0.172、P=0.12;r=-0.253、P=0.09；r=-0.032、P=0.80；r=-0.092、P=0.25)。

2.3IRF4与SLE患者实验室指标相关性 抗ds-DNA增加的SLE患者IRF4水平〔n=30,(6.19±0.98)ng/ml〕显著低于抗ds-DNA未增加患者〔n=52,(6.79±0.60)ng/ml〕(t=3.443，P<0.01)；抗SSA阳性患者的IRF4水平〔n=53,(6.68±0.91)ng/ml〕显著高于阴性患者〔n=29,(6.20±1.12)ng/ml〕(t=2.012，P=0.039)。ANA滴度+〔n=80,(6.56±1.21)ng/ml〕与ANA滴度-〔n=2,(6.87±1.12)ng/ml〕无显著差异(t=0.358,P=0.72)。抗SSA抗体+〔n=53,(6.68±0.91)ng/ml〕与抗体-〔n=29,(6.20±1.12)ng/ml〕有显著差异(t=2.012，P=0.039)。抗SSB抗体+〔n=30,(6.58±0.90)ng/ml〕与抗体-〔n=52,(6.55±1.11)ng/ml〕无差异(t=0.126,P=0.90)。抗SM抗体+〔n=43,(6.69±0.58)ng/ml〕与抗体-〔n=39,(6.40±1.01)ng/ml〕无差异(t=0.320,P=0.75)。

3 讨 论

IRFs参与了SLE发病过程。如IRF1可以激活缺血后细胞促炎性因子在免疫细胞上的显现及上皮细胞在肾小管内的表达，MRL-(Fas)lpr鼠有LN时，促炎性因子在肾小球膜上的水平也有所上升。树突细胞(DCs)内，IRF7和IRF3免疫识别内源性核酸和病毒时，能将干扰素Ⅰ型产物介导出来(包括TLR7信号途径)〔4〕。如IRF4需要Th17 T细胞诱导，调节性T细胞对Th2应答能力的抑制，免疫球转换蛋白类型以及浆细胞和B/T细胞的成熟。对体液免疫，IRF4同样起调节作用，参与巨噬细胞M2的极化过程〔5〕。通过结合，IRF4还能到MyD88上充当信号TLR抑制体，MyD88实际上可以将其与IRF5交互作用减弱(包括其他下游区元件信号的交互作用)〔6〕。对体液免疫，IRF4可以起一定的抑制作用，亦能帮助适应性免疫的发生。IRF4与CD68、SPI1、IL-17/21等在SLE患者中发挥细胞因子互相关系的作用已经得到证实，说明可能IRF4与SLE的发生有着一定的关联性〔7〕。

SLEDAI评分和IRF4间无相关性〔8〕。SLE患者体内血管等位置有免疫复合物大量存在，帮助活体向有活性的物质转化，同时有连锁反应发生。在此期间，补体大量被消耗，其本身能摧毁自身组织，使SLE患者处于一种疾病状态〔9〕。SLE患者主要的一个严重并发症为LN(40%～60%)〔10〕。本研究还未明确我国汉族人群的IRF4基因是否与SLE相关，考虑原因可能是人口结构、偏倚等因素造成。未来的研究中可以对IRF4与SLE发病有关的其他可能相关位点进行研究，在条件允许的情况下可以进一步将样本含量扩大〔11〕。

4 参考文献

1Stone RC，Feng D，Deng J，etal.Interferon regulatory factor 5 activation in monocytes of systemic lupus erythematosus patients is triggered by circulating autoantigens independent of type Ⅰ interferons〔J〕.Arthritis Rheum，2012；64(3)：788-98.

2Fu Q，Zhao J，Qian X，etal.Association of a functional IRF7 variant with systemic lupus erythematosus〔J〕.Arthritis Rheum，2011；63(3)：749-54.

3Smith S，Gabhann JN，Higgs R，etal.Enhanced interferon regulatory factor 3 binding to the interleukin-23p19 promoter correlates with enhanced interleukin-23 expression in systemic lupus erythematosus〔J〕.Arthritis Rheum，2012；64(5)：1601-9.

4Lin LH，Ling P，Liu MF.The potential role of interferon-regulatory factor 7 among Taiwanese patients with systemic lupus erythematosus〔J〕.J Rheumatol，2011；38(9)：1914-9.

5彭学标，白 璐，黎 倩.系统性红斑狼疮患者干扰素调节因子-5基因的表达〔J〕.皮肤性病诊疗学杂志，2010；17(6)：401-2,406.

6Kawasaki M，Fujishiro M，Yamaguchi A，etal.Possible role of the JAK/STAT pathways in the regulation of T cell-interferon related genes in systemic lupus erythematosus〔J〕.Lupus，2011；20(12)：1231-9.

7覃莲香，吕继成.干扰素调节因子5基因rs2004640多态性与系统性红斑狼疮遗传易感性的荟萃分析〔J〕.中国免疫学杂志，2011；27(3)：239-42,250.

8Sweeney SE.Hematopoietic stem cell transplant for systemic lupus erythematosus：Interferon regulatory factor 7 activation correlates with the IFN signature and recurrent disease〔J〕.Lupus，2011；20(9)：975-80.

9刘姗姗，王 玮，彭 辉，等.干扰素调节因子4血清水平与系统性红斑狼疮的相关性研究〔J〕.中华疾病控制杂志，2013；17(6)：465-8.

10Tada Y,Kondo S,Aoki S,etal.Intenferon regulatory factor 5 is critical for the development of lupus in MRL/1pr mice〔J〕.Arthritis Rheum,2011;63(3):738-48.

11Yew YW，Pan JY.Complete remission of recalcitrant genital warts with a combination approach of surgical debulking and oral isotretinoin in a patient with systemic lupus erythematosus〔J〕.Dermatol Ther，2014；27(2)：79-82.