蟾酥对蟾蜍心电活动的影响

李 华，王仁俊，欧阳菲，高雨飞

(吉林师范大学，生命科学学院,吉林 四平 136000)

蟾酥对蟾蜍心电活动的影响

李 华，王仁俊，欧阳菲，高雨飞

(吉林师范大学，生命科学学院,吉林 四平 136000)

利用生物机能实验系统对用不同浓度的蟾酥溶液处理后的蟾蜍的心率和心电图各项指标进行测定和分析，结果表明：在一定范围内，随着蟾酥浓度的增大，蟾蜍的心率加快；心电图中R波的电压峰值降低、Q-T间期的时值缩短；而P-R间期、QRS期的时值延长．并且这些变化在给药后1～1.5 h达到最大，在2 h时，各指标均有所恢复．由此可见，蟾酥对蟾蜍的心电活动有一定的影响．

蟾酥；蟾蜍；心率；心电图

0 引言

蟾酥是一种动物毒素，主要由蟾蜍耳后腺分泌．主要成分是多肽，其中包含神经肽、麻醉剂、激素、抗微生物、抗真菌等成分．蟾酥具有强心、抗肿瘤、局部麻醉、镇痛、抗炎等多种功效[1]．蟾酥为《中华人民共和国药典》二零零零年版一部标注毒性的15味常用有毒中药之一[2]，在心肌毒性方面，对豚鼠进行离体心脏灌流实验，结果蟾酥可诱导心脏出现房室传导阻滞、室速、室颤多种心律失常现象，当给药量累积达(60±11．5) μg时致其停跳[3]；蟾酥还对心肌细胞的收缩力以及心肌细胞的ATP酶有影响，蟾酥通过控制心肌细胞内外Na+和Ca2+的浓度使心肌细胞的收缩力加大[4]；在神经系统方面，蟾酥可降低神经纤维的兴奋性，减慢神经系统的传导速度[5]．本文以中华大蟾蜍为研究对象，对蟾酥影响下蟾蜍的心电活动变化进行测定，以期进一步探讨蟾酥对心脏的急性毒性作用，为客观评价蟾酥的药理作用提供资料积累．

1 材料和方法

1.1 实验材料

中华大蟾蜍(Bufogargarizans)属蟾蜍科、蟾蜍属,由沈阳医学院实验动物中心提供.选取体重基本一致、活性良好的蟾蜍成体置于玻璃缸内静养,48 h后用于试验．

1.2 仪器和药品

BL-420生物机能实验系统(成都泰盟科技有限公司),联想台式计算机，标准任氏液，常规解剖器械，竹制刮刀等．

1.3 处理方法

(1)提取蟾酥.首先将辣椒或者大蒜等辛辣物塞进蟾蜍的口中，过10 min开始刮浆，刮浆时用左手握住蟾蜍的4条腿，只露出头部，右手用镊子对准蟾蜍隆起的耳后腺的包块，夹取白色的浆液，刮下的浆放在培养皿中晒干备用．

(2)药品的配置.以任氏液为溶剂，分别配制成0.1%的溶液，搅拌溶解，1 h后用4层纱布过滤作为供试原液．

(3)实验材料处理.使用蟾酥溶液的浓度是120,60,30及15 mg/kg，按照浓度的从低到高分成四组，每组5只蟾蜍，采用腹腔注射的办法，将相应浓度的蟾酥溶液2 ml注射到蟾蜍的体内，对照组注射等量的标准任氏液，经处理的蟾蜍放置在水桶内，分别在0.5 h,1 h,1.5 h，2 h后，对每组中的5只蟾蜍进行双毁髓，用生物机能实验系统，时间常数为0.1 s、平滑滤波、50 z抑制，记录标准的二导联心电图．

1.4 数据统计

实验数据采用Mean±SD表示，通过一元回归分析蟾酥溶液的浓度与蟾蜍的心率和心电活动的各项指标之间的关系[6]，所有数据均采用SPSS13.0进行处理．

2 结果

2.1 蟾酥处理后蟾蜍的心率变化

以给药前的平均心率记为1,分别计算给药后0.5,1.0,1.5和2.0 h的平均心率与给药前心率的比值,得到给药组相对心率变化(如图1所示).

a. 15; b. 30; c.60; d. 120图1 不同时间蟾酥对蟾蜍心率的影响

由心率的变化可以看出，在给药后蟾蜍的心率即开始发生变化，各组蟾蜍给药后的心率都有不同程度的加快,且给药剂量越大,其心率加快程度越明显.在1.0～1.5 h间达到最大,1.5 h后有明显恢复趋势， 在2 h时,各组蟾蜍心率均有所恢复,且随着给药剂量的增加,恢复程度也明显变差．这表明蟾酥可使心脏出现心动过速．

2.2 蟾酥处理后蟾蜍心电指标的变化

与正常对照组相比，给药组R波波幅降低，P-R间期延长，QRS时程显著增宽，Q-T间期缩短．与心率的变化一样，R波、P-R间期、QRS时程和Q-T间期的变化也是在1.0～1.5 h间达到最大，1.5 h后有明显的恢复趋势，在2 h时，各组蟾蜍心电指标均有所恢复，且随着给药剂量的增加,恢复程度也明显变差(如图2所示)．心电指标的变化表明蟾酥可使心脏出现房室传导阻滞，室性心律失常现象．

a.15;b.30;c.60;d.120. 图2 不同时间蟾酥对蟾蜍心电活动的影响

2.3 蟾酥浓度与心率及心电各指标之间的关系

记录不同的浓度蟾酥溶液处理1.5 h后蟾蜍的心率和心电各项指标的数据．可得到实验数据．通过单因子方差分析表明，蟾蜍的心率和心电的各项指标组间差异达到显著水平(FH=104.563，FR=131.570，FP-R=137.211，FQRS=48.363，FQ-T=65.435，P<0.01)分别对不同浓度的蟾酥溶液处理后蟾蜍的心率和心电各项指标的差异进行比较，统计结果见表1．

SPSS13.0软件中的一元线性回归来分析蟾酥的浓度与蟾蜍的心率和心电图的各项指标之间的关系．由回归分析可知，在一定范围内，蟾蜍的心率与心电图中的P-R间期和QRS时程的时值与蟾酥的浓度呈正相关；而R波的电压值和Q-T间期的时值与蟾酥的浓度呈负相关，拟合一元回归方程：

YH=0.121x+46.315(r=0.930**),YR=-0.008x+1.037(r=0.938**),YP-R=0.002x+0.400(r=0.962**),YQRS=0.001x+0.255(r=0.865*),YQ-T=-0.002x+0.395(r=0.833**)．

表1 不同浓度的蟾酥溶液处理后蟾蜍的心率和心电

表1中的数据都表示平均值±标准差，*表示与对照组的相比较差异显著(P<0.05)，**表示与对照组相比较差异极显著(P<0.01)

3 讨论

一定浓度的蟾酥可使蟾蜍在短时间内出现心动过速，房室传导阻滞，室性心律失常等现象，这与蒋洁君等人离体心脏灌流研究的结果相一致，说明蟾酥对心脏具有一定的急性毒性[2]．分析其原因一方面蟾酥的有效成分可降低Na+—K+—ATP酶的活性，心肌细胞膜Na+—K+—ATP酶得主要作用是心肌细胞兴奋后Na+、K+的恢复,帮助K+离子由细胞膜外进入细胞膜内,Na+离子从细胞内运输到细胞膜外,而Na+—K+—ATP酶活性下降会使细胞膜外的K+离子浓度轻度升高[7-9],从而使心肌更容易兴奋,造成心肌提前去极化，引起舒张压升高，表现为心率加快；另一方面蟾酥的有效成分可间接兴奋迷走神经并抑制交感神经，使房室传导减慢，表现为房室传导阻滞[5]．

用一元线性回归分析蟾酥浓度与蟾蜍的心电各波及各间期的影响，得出结论，随着蟾酥的浓度的增加蟾蜍心电中的R 波的电压峰值降低，P—R 间期、QRS间期的时值延长，可能是因为蟾酥影响了Na—K泵、Ca离子通道的活动，从而影响了心室肌去极化和复极化的过程而导致R波电压值降低，P—R间期和QRS间期时间延长．而Q—T间期缩短与心率有关，心率加快，Q—T间期就缩短，心率减慢，Q—T间期就延长．蟾酥影响蟾蜍心电的机理还需要进一步研究．

由结果分析可知：蟾酥不仅影响蟾蜍的心率，还在一定程度上影响蟾蜍的心电的各项指标，可以说蟾酥对人及其它动物的心电也有一定影响．因此可以用蟾酥来研制一些治疗心脏疾病的药物，对于预防和治疗心脏疾病药物研究及应用前景有一定的意义．

[1]王 锋，张 薇，董红兵.蟾酥的药理研究及其应用概况[J].国医论坛.2003,18(5):50～52.

[2]王浴生．中药药理与应用[M]．北京：人民卫生出版社，1983.

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[4]周丛容，蒋建飞等.研究蟾酥中毒可致快速心律失常[J].贵州师范大学学报(自然科学版),2003，5(1):56～62.

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[6]解景田，赵 静.生物学实验(第二版[M].北京：高等教育出版社,2005,85～87.

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[9]蒋洁君，周 婧，马宏跃等.蟾酥对豚鼠心脏电生理的影响[J].中国药理学与毒理学杂志，2011，25(3)：307～309.

InfluencesoftheToadVenomonBufoGargarizansHeartActivities

LIHua，WANGRen-jun，OUYANGFei，GAOYu-fei

(School of Life Science,Jilin Normal University,Siping 136000,China)

By applying biological functional test systems,this paper aims to study the influences of the different concentrations of Toad Venom on the heart rate and electrocardiog ram(ECG) of Bufo gargarizans.Results show that,as Toad Venom concentrations increase,the heart rate of the bufo gargarizans speeds up；the peak voltage of R wave and the time of the Q-T interval in the ECG decreases；while the time of the P-R interval and QRS duration increases.These values after administration of 1～1.5 h reach the maximum,and each value decreased at 2 h.Thus,it can be concluded the toad venom has an effect on the elcetrocardia action of bufo gargarizans.

toad venom;bufo gargarizans;heart rate;electrocardiogram

林险峰)

2014-06-23

吉林省科技厅科技发展项目(20130522002JH)

李 华(1980-)，女，辽宁省阜新市人，现为吉林师范大学生命科学学院讲师，硕士.研究方向：动物生理．

R285

A

1674-3873-(2014)03-0142-03