牛皮消化学成分研究

2013-12-23何江波管开云朱华结

天然产物研究与开发 2013年6期

邓余，何江波，管开云，朱华结

1中国科学院昆明植物研究所植物化学与西部植物资源持续利用国家重点实验室，昆明650204;2中国科学院新疆生态与地理研究所，乌鲁木齐830011;3 中国科学院大学，北京100049

牛皮消(Cynanchum auriculatum)别名飞来鹤，又称耳叶牛皮消，系萝藦科鹅绒藤属植物［1］。味甘、苦，性微温，含有C21 甾体等活性成分，是一味常用中药。用于治疗腰膝酸痛，头晕耳鸣，心悸失眠，食欲不振等病症［2］。印敏等人从该种植物中分离得到隔山消苷，开德苷元等化合物［3］。张建烽等人从中首次分离得到了白首乌二苯酮，白首乌苷等化学成分［4］。为了深入开展其研究，我们课题组对采自新疆的牛皮消进行化学成分研究，从其甲醇提取物的乙酸乙酯萃取部位分离得到12 个化合物，其中包括一个新化合物，其余11 个均为首次从该种中分离得到的已知化合物。

1 实验部分

1.1 仪器及试剂

Bio-Rad FTS-135 型红外光谱仪(KBr 压片);UV210A 型紫外可见光分度计;Polarimeter Type AA-55 型数字式旋光仪;Waters Xevo TQ-S 及Waters Autospec Premier p776 质谱仪;Bruker AM-400、DRX-500 及Avance 600 MHz 核磁共振仪(TMS 作为内标，δ 为ppm，J 为Hz)柱层析用硅胶(200～300目)、薄层层析用硅胶GF254均为青岛海洋化工厂生产;Sephadex LH-20(25～100 μm)为Pharmacia 公司产品;RP-18(40～60 μm)为日本Daiso 产品;石油醚、氯仿、丙酮、乙酸乙酯、甲醇等有机溶剂均为工业纯经重蒸后使用。牛皮消干燥地上部位，2009 年10月采自新疆，经昆明植物研究所管开云研究员鉴定为耳叶牛皮消，标本现存于本实验室。

1.2 提取与分离

牛皮消干燥地上部位10 kg，粉碎，工业甲醇回流提取3 次，每次2 h，低温浓缩得到浸膏，加水悬浮后依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇进行萃取，合并乙酸乙酯萃取液浓缩得到乙酸乙酯部位70 g。乙酸乙酯部位上硅胶柱层析(200～300 目，500 g)以氯仿-甲醇梯度洗脱，经过反复硅胶柱层析，氯仿-甲醇(20:1)梯度洗脱，氯仿-丙酮(10∶1)梯度洗脱、凝胶Sephadex LH-20(甲醇)柱层析和反相RP-18(甲醇-水:30%、50%、70%、90%)柱层析分别得到化合物1(3 mg)，咖啡酸甲酯(20 mg)和邻苯二甲酸甲酯(40 mg)，邻苯二甲酸正丁异丁酯(90 mg)和丹皮酚(50 mg)，香草醛(35 mg)和对羟基苯甲醛(23 mg)，1-(4'-hydroxyphenyl)-propan-1，2-dione (12 mg)，(R)-2-hydroxy-1(4-hydroxy-3-methoxypheny)propan-1-one(57 mg)，3-hydroxy-1-(4-hydroxy-3，5-dimethoxyphenyl)-1-propanone(19 mg)，二-(2-乙基己基)邻苯二甲酸酯(21 mg)和东莨菪内酯(33 mg)。化合物1～12 结构如图1。

图1 化合物1～12 的化学结构式Fig.1 Chemical structures of compounds 1-12

2 结构鉴定

图2 化合物1 的主要HMBC 和COSY 相关Fig.2 HMBC and COSY correlations for compound 1

表1 化合物1 核磁数据Table 11H NMR，13 C NMR，HMBC and COSY data of compound 1

咖啡酸甲酯(2)1H NMR(600 MHz，CD3OD)δ:3.65(3H，s，-OCH3)，6.16(1H，d，J = 15.9 Hz，H-8)，6.67(1H，d，J = 8.1 Hz，H-5)，6.82(1H，dd，J = 8.1，1.8 Hz，H-6)，6.93(1H，d，J = 1.8 Hz，H-2)，7.45(1H，d，J = 15.9 Hz，H-7);13C NMR(150 MHz，CD3OD)δ:52.2(-OCH3)，114.9(C-2)，115.2(C-5)，116.6(C-8)，123.1(C-6)，127.8(C-1)，146.8(C-3)，147.1(C-7)，149.7(C-4)，169.8(C-9)。以上数据与文献［6］数值相符。

邻苯二甲酸甲酯(3)黄色油状物1H NMR(600 MHz，CDCl3)δ:7.73(2H，d，J = 8.4 Hz)，7.53(2H，d，J = 8.4 Hz)，3.91(6H，s);13C NMR(150 MHz，CDCl3)δ:168.1，131.9，131.2，128.9，52.7。以上数据与文献［7］数值相符。

邻苯二甲酸正丁异丁酯(4)无色油状物1H NMR(600 MHz，CDCl3)δ:7.71(2H，m，H-3，6)，7.51(2H，m，H-4，5)，4.30(2H，t，J = 7.0 Hz，H-1')，4.08(2H，d，J = 7.0 Hz，H-1')，2.03(1H，m，H-2')，1.71(2H，m，H-2')，1.44(2H，m，H-3')，0.97(6H，m，H-3'，4')，0.93(3H，t，J = 7.5 Hz，H-4')。以上数据与文献［8］数值相符。

丹皮酚(5)白色针晶1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ:2.56(3H，s，CH3-8)，3.84(3H，s，OCH3-4)，6.43-6.46(2H，m，H-3，5)，7.63(1H，d，J = 8.7 Hz，H-6)，12.75(1H，s，OH-2);13C NMR(100 MHz，CDCl3)δ:113.9(C-1)，165.3(C-2)，100.8(C-3)，166.1(C-4)，107.6(C-5)，132.3(C-6)，202.5(C-7)，26.2(CH3-8)，55.5(OCH3-4)。以上数据与文献［9］数值相符。

香草醛(6)无色针晶1H NMR(600 MHz，CD3OD)δ:7.42(1H，brs，H-2)，6.90(1H，d，J =8.4 Hz，H-5)，7.42(1H，brs，H-6)，9.71(1H，s，-CHO)，3.90 (3H，s，-CH3);13C NMR(150 MHz，CD3OD)δ:130.2(C-1)，111.1(C-2)，149.9(C-3)，155.6 (C-4)，116.4 (C-5)，128.2 (C-6)192.8(-CHO)，56.3(-OCH3)。以上数据与文献［10］数值相符。

对羟基苯甲醛(7)黄色固体1H NMR(600 MHz，CD3OD)δ:9.72(1H，s，-CHO)，7.75(2H，d，J= 8.4 Hz，H-2，6)，6.88(2H，d，J = 8.4 Hz，H-3，5)。以上数据与文献［11］数值相符。

1-(4'-hydroxyphenyl)-propan-1，2-dione(8)黄色固体1H NMR(600 MHz，CD3OD)δ:7.87(2H，d，J= 8.4 H-2'，6')，6.83(2H，d，J = 8.4 Hz，H-3'，5')，2.50(3H，s，H-3);13C NMR(150 MHz，CD3OD)δ:26.4(C-3)，116.7(C-3'，5')，129.8(C-1')，132.4(C-2'，6')，165.2(C-4')，192.8(C-1)，199.7(C-2)。本文首次补充其核磁数据，根据以上数据得其结构与文献结构［12］相符。

(R)-2-hydroxy-1 (4-hydroxy-3-methoxypheny)propan-1-one(9)白色固体1H NMR(600 MHz，CD3OD)δ:7.56(1H，s，H-6')，7.57(1H，d，J = 8.4 Hz，H-2')，6.88(1H，d，J = 8.4 Hz，H-3')，5.17(1H，q，J = 6.6 Hz，H-2)，1.40(3H，d，J = 6.6 Hz，H-3);13C NMR(150 MHz，CD3OD)δ:22.3(C-3)，112.4 (C-6')，1116.0 (C-3')，125.2 (C-2')，149.4(C-5')，153.8(C-4')，202.0(C-1)，70.0(C-2)。以上数据与文献［13］数值相符。

3-hydroxy-1-(4-hydroxy-3，5-dimethoxyphenyl)-1-propanone(10)无色油状物1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ:7.26(2H，s，H-3，5)，4.03(2H，t，J = 5.5 Hz，H-9)，3.96(6H，s，C-2，6 OCH3)，3.18(2H，t，J= 5.5 Hz，H-8);13C NMR(100 MHz，CDCl3)δ:198.9(C-7)，146.8(C-2，6)，140.3(C-4)，128.0(C-1)，105.5(C-3，5)，58.1(C-9)，56.4(C-2，6 OCH3)，39.8(C-8)。以上数据与文献［14］数值相符。

二-(2-乙基己基)—邻苯二甲酸酯(11)无色油状物1H NMR(500 MHz，CDCl3)δ:7.68(dd，J =5.0，1.0，H-3''，6'')，7.49-7.53(m，H-4''，5'')，4.20(d，J =5.2，OCH2)，1.65-1.69(m，H-2，2')，1.24～1.31(m，8-CH2)，0.79(t，J =5.0，H-6，6')，0.84(t，J = 5.0，H-8，8');13C NMR(100 MHz，CDCl3)δ:167.3(C = O)，132.2(C-1''，2'')，130.5(C-4''，5'')，128.5(C-3''，6'')，67.7(2-OCH2)，38.5(C-2，2')，30.1(C-3，3')，28.6(C-4，4')，23.5(C-7，7')，22.7(C-5，5')，13.8(C-8，8')，10.4(C-6，6')。以上数据与文献［15］数值相符。

东莨菪内酯(12)无色针晶1H NMR(400 MHz，CD3OD)δ:7.82(1H，d，J = 9.5 Hz，H-4)，7.07(1H，s，H-5)，6.72(1H，s，H-8)，6.15(1H，d，J= 9.5 Hz，H-3)，3.84(3H，s，6-OMe)。以上数据与文献［16］数值相符。

1 Chen JJ(陈纪军)，Zhang ZX(张壮鑫)，Zhou J(周俊).The chemical constituents of Cynanchun auriculatum. Acta Bot Yunnan(云南植物研究)，1989，11:358-360.

2 Yu F(喻樊).Chemical composition and pharmacological action of Cynanchum bungei. Strait Pharm J(海峡药学)，2008，20(10):86-89.

3 Yin M(印敏)，Chen Y(陈雨)，Wang M(王鸣)，et al.Chemical constituents in the root of Cynanchum auriculatum.J Chin Med Mater(中药材)，2007，30:1245-1247.

4 Zhang JF(张建烽)，Li YB(李友宾)，Li CL(李铖璐)，et al.Studies on chemical constituents in root tuber of Cynanchum auriculatum. Chin J Chin Mater Med(中国中药杂志)，2006，31:814-816.

5 Raymond D，Hanspeter P. Synthese von(S)-Plectaniaxanthin.Hel Chim Acta，1984，67:1283-1290.

6 Yu K(于凯)，Song Y(宋洋)，Lu Y(路阳)，et al.Phenylpropanoids from roots of acanthopanax sessiliflorus(Rupr. et Maxim.)Seem.Nat Prod Res Dev(天然产物研究与开发)，2012，24:469-472.

7 Wang L(王莉)，Xiao HB(肖红斌)，Liang XM(梁鑫淼).Studies on chemical constituents of Gastrodia elata. Chin Tradit Herb Drugs(中草药)，2003，34:584-585.

8 Hu J(胡静)，Yang B(杨斌)，Sun JF(孙见凡)，et al.Chemical constituents of marine sponge Halichondria sp.from the south China sea.Nat Prod Res Dev(天然产物研究与开发)，2012，24:614-617.

9 Kim JS，Kim YJ，Lee JY，et al.Phytochemical studies on paeoniae radix(2)-phenolic and related compounds. Korean J Pharmacogn，2008，39:28-36.

10 Zuo YM(左月明)，Zhang ZL(张忠立)，Zeng JX(曾金祥)，et al.Study on chemical constituents in roots and rhizomes of Valeriana officinalis. Chin Tradit Herb Drugs(中草药)，2012，43:1293-1295.

11 Wang YN(王亚男)，Lin S(林生)，Chen MH(陈明华)，et al.Chemical constituents from aqueous extract of Gastrodia elata.Chin J Chin Mater Med(中国中药杂志)，2012，37:1775-1781.

12 Metezler M，Haaf H.Dearylation and other cleavage reactions of diethylstilbestrol:novel oxidative pathways mediated by peroxidases.Xenobotica，1985，15:41-49.

13 Ayhan SD，Ozge S，Elif E，et al. Enantioselelective syethesis of a-hydroxy ketones via benzaldehyde lyase-catalyzed C-C bond foemation reaction. Adv Syn Catal，2002，344:96-103.

14 Yoko N，Kenkasaku T，Kouji W，et al. Antioxidative compounds isolated from kokuto，non-centrifugal cane sugar.Biosci Biotech Biochem，1996，60:1714-1716.

15 Sushama RK，Pushpa VP，Vijay BT，et al.Larvicidal activity of bis(2-ethylhexyl)benzene-1，2-dicarboxylate from Sterculia guttata seeds against two mosquito species. Chem Biodiv，2006，3:49-53.

16 Wang LF(王乐飞)，Wang XJ(王晓静)，Tang WZ(唐文照)，et al.Study on chemical constituents from bark of Ailanthus altissima Swingle.Food Drug(食品和药品)，2010，12(5):180-183.