喷雾干燥法制备阿奇霉素掩味肠溶缓释微球*

牟颖林

(青岛骨伤医院，青岛 266021)

阿奇霉素(Azithromycin)为新一代大环内酯类抗生素，是临床上治疗支原体肺炎的首选药物。因其抗菌谱广、耐受性好、副作用小、疗程短等优点备受市场青睐。但阿奇霉素具有较强的苦味，常需加入大量矫味剂来掩盖其苦味［1］。微囊、微球化是近年来研究较多的制剂新工艺，不仅可以掩盖药物的不良气味，而且可以提高其稳定性，防止药物在胃内失活或者减少药物对胃的刺激性。

本文采用响应面分析法对阿奇霉素掩味微球的制备工艺参数进行优化，喷雾干燥法制备微球进行掩味处理［2］，操作简单、性质稳定，适合于工业化大生产，并为不良味道药物的掩味技术提供一个新思路。

1 仪器与试药

T6 型新世纪紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司)，DIS -5 型高速离心喷雾干燥机(无锡富超喷雾干燥机械厂)，Rise -2002 激光粒度分析仪(济南润之科技有限公司)，RCZ-8A 型智能溶出仪(天津大学精密仪器厂)，TG328A 型分析天平(上海精科天平厂)。

聚丙烯树脂［Eudragit L100 Degussa (China)Co Ltd］，单硬脂酸甘油酯(天津市迪博化工有限公司)，聚乙二醇(PEG -6000 山东聊城阿华制药有限公司)，95%乙醇(烟台三和化学试剂有限公司)，其余试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 微球的制备方法 称取适量阿奇霉素、Eudragit L100 溶于300 ml 的95%的乙醇中制得囊材浓度为5%的溶液。将PEG -6000 溶于少量水中，充分溶解后加入到上述乙醇溶液中，再加入单硬脂酸甘油脂，充分溶解后进行喷雾干燥，制得阿奇霉素微球［3］。

2.2 评价指标的制定

2.2.1 检测波长的选择 称取阿奇霉素标准品于少量无水乙醇中溶解，加入0.10 mol/L 的稀盐酸稀释成0.05 mg/ml 的阿奇霉素溶液。精密量取5.00 ml，加入75%的浓硫酸溶液5.00 ml，振摇混匀，放置30 min，冷却至室温。以溶出介质为空白，于190 ～900 nm 范围内进行波谱扫描，阿奇霉素在483 nm 处有最大吸收波长，且其他辅料在此处无干扰。故试验选择483 nm 为检测波长。

2.2.2 标准曲线的制备 精密称量30 mg 阿奇霉素标准品置50 ml 量瓶中，加少量无水乙醇溶解，0. 10 mol/L 稀盐酸稀释至刻度，摇匀。分别精密量取2、4、6、8 和10 ml 置50 ml 量瓶中，用0.10 mol/L 稀盐酸稀释至刻度。精密量取待测溶液各5 ml 置10 ml 量瓶中，加75%硫酸溶液定容，摇匀，放置30 min，冷却至室温。以0.10 mol/L 稀盐酸与75%硫酸溶液的混合液(1∶ 1)作空白溶液，测定吸光度，回归方程为Y =0.0129 X+0.1223(r =0.9995)，阿奇霉素在12 ～60 μg/ml范围具有良好的线性关系。同法得到阿奇霉素在pH 6.8 的磷酸缓冲液标准曲线为Y =0.0002 X -0.0612(r=0.9998)，在28 ～132 μg/ml 浓度范围内与吸光度线性关系良好。

2.2.3 回收率试验 称取适量空白微球，制成空白样品溶液。精密称取0.05 mg 阿奇霉素，以pH 6.8 磷酸盐缓冲液制备低、中、高三种不同浓度的溶液，测定吸光度，计算质量。低、中、高浓度的回收率分别为101.02%、99.88%和100.23%，符合要求，其RSD 值为0.15%。

2.2.4 精密度试验分别配制15、30 和45 μg/ml低、中、高3 个浓度的溶液，测定日内及5 d 的日间精密度。低、中、高浓度溶液的日内RSD 分别为0.36%、0.28%和0.35%，日间RSD 分别为0.11%、0.25%和0.19%。

2.2.5 包封率的测定 精密称取0.05 g 阿奇霉素微球样品置于100 ml 量瓶中，加少量乙醇并以pH 1 的稀盐酸液定容，摇匀，溶解未包封的阿奇霉素，移取5 ml至25 ml 带塞比色管中，加入硫酸(75→100)5.00 ml，摇匀，放置30 min 后，摇匀，以pH 1 的稀盐酸液做对照进行紫外测定，由标准曲线计算未被包封阿奇霉素的量。另精密称取等量微球样品以pH 6.8 的缓冲液溶解，同法测定吸光度，计算微球样品中阿奇霉素总量。

2.2.6 阿奇霉素微球掩味效果的考查 分别取阿奇霉素微球样品适量，选择10 名健康志愿者，品尝微球在口腔中的口感，记录每名志愿者的对阿奇霉素苦味的测试感受，通过苦、微苦、不苦、甜作为评价。结果发现微球掩味效果与包封效果一致。因此选用包封率作为掩味效果的评价指标。

2.3 处方及工艺条件的优化［4］

2.3.1 星点设计优化微胶囊制备条件 通过单因素试验确定雾化压力(X1)、进风温度(X2)、进液速度(X3)是影响包封率(Y)的主要因素。用Statistica 6.0软件对实验数据进行统计分析，并作出效应面对结果进行预测，试验因素水平及编码见表1。

表1 星点设计因素水平表

2.3.2 星点设计实验结果 见表2。

表2 星点设计实验结果

2.3.3 模型建立与方差分析 分别用二项式拟合和线性拟合对表2 实验数据进行处理。比较结果可知，用二项式拟合所得模型的r 值远大于用线性拟合回归所得模型的r 值，因此，选择二项式拟合模型处理数据。回归方程为Y=10.636 +59.671 X1+0.242 X2+4.960 X3-412. 404 X12-0. 002 X22-0. 163 X32+1.096 X1X2-5.241 X1X3+0.009 X2X3。

根据表2，用Statistica 6.0 统计分析软件进行多元回归分析，对回归方程进行显著性检验、方差分析及各因素最佳点值分析，结果见表3。

表3 回归方程方差分析表

各变量对效应值影响的显著性可由F 检验来判定，概率P 值越小，则相应变量的显著性越高。由表3可知，整体模型的P 值小于0.0001，表明该二次方程模型极显著，相关系数r =0.9551，说明效应值的变化有91.23%来源于所选变量。因此，回归方程可以较好地描述各因素与效应值之间的真实关系，可以用此方程确定最佳条件。

2.3.4 效应面优化与预测 应用Statistica 6.0 软件分别绘制阿奇霉素微球包封率与各因素的三维效应面图，三维图可以直观反映各因素间的交互作用对微球包封率的影响，结果见图1。

综合各图分析可知，各参数对微胶囊包封率的影响顺序为:进液速度＞雾化压力＞进风温度。经分析得，包封率最大估计值为89.8%，雾化压力0.27 MPa，进风温度135 ℃，进液速度15 ml/min。

图1 不同因素对微球包封率的效应面的影响

2.3.5 验证实验 在保证包封率的情况下，根据模型的最佳工艺条件进行3 次平行验证实验。测得微球包封率分别为90.1%、89.8%和90.3%，平均包封率为90.1%，实验数据与预测数据(89.6%)基本吻合，误差在可接受范围以内，所得微球形态良好，基本无黏连。因此，采用星点设计效应面法优化得到的参数准确可靠，方法可信，工艺稳定。

2.4 微球形态 据最优工艺制备的微球，显微镜下观察形态圆整，表面光滑，粒径小而分布较窄，形态良好，基本无黏连。见图2。

图2 阿奇霉素微球显微照片

2.5 体外释放度实验释放度测定按《中国药典》2005 年版二部附录ⅩD 第二法肠溶制剂方法进行［5］。结果见图3。结果表明，所得微球释放度1 h 内小于30%，24 h 内基本释放完全，制剂具有缓释作用。

图3 体外累计释放曲线

3 结论

本研究采用星点设计响应面分析法优化阿奇霉素掩味微球处方条件，得到最优工艺参数:包封率最大估计值为89.8%，雾化压力0.27 MPa，进风温度135℃，进液速度15 ml/min。在最优工艺条件下微球的载药量和包封率均能达到较理想结果，口感无苦味。同时本研究中所涉及到的喷雾干燥法制备掩味微球方法简单、重复性好，有利于工业化大生产，对苦味有良好的掩味效果，为其他苦味药物的掩味新技术提供一定的思路和参考。

1 吕慧侠，周建平，戴影秋，等.海藻酸钙掩味微囊的制备［J］. 中国药科大学学报，2007，38(2):125

2 吴茂东，王永禄，周维娜，等. 响应面分析法优化阿奇霉素掩味微囊处方工艺［J］.南京工业大学学报，2010，32(5):87

3 于泮力，王洪光，王超.喷雾干燥法制备罗红霉素掩味肠溶缓释微球［J］.中国抗生素杂志，2011，36(8):613

4 吴伟，崔光华，陆彬.实验设计中多指标的优化:星点设计和总评“归一值”的应用［J］.中国药学杂志，2000，35(8):530

5 中国药典［S］.二部.2005:附录74 -75