万寿菊提取物对苏禽青壳蛋鸡产蛋性能、蛋品质和蛋黄胆固醇含量的影响

卢 建 王克华* 曲 亮 窦套存 童海兵 李尚民

(1.中国农业科学院家禽科学研究所，扬州 225125;2.扬州翔龙禽业发展有限公司，江都 225261)

蛋黄颜色及着色剂的安全性受到消费者的广泛关注，化学合成色素可致癌、致畸，影响消费者健康，而天然色素主要从水果、蔬菜或植物中提取，安全无毒，深受消费者青睐。在家禽饲粮中添加天然色素，可以沉积到家禽产品中，这类产品不仅色泽美观，而且具有药用或保健功能，因此，这种天然色素被称为“营养型”着色剂。近年来，“营养型”着色剂在家禽饲粮中的应用成为蛋品质营养调控的重要研究方向。万寿菊提取物是有效的天然着色剂，具有抗氧化、增强机体免疫力和抑制癌症等功能。有研究发现，饲粮中添加万寿菊提取物能够改善产蛋性能、提高饲料利用率、哈氏单位和蛋黄颜色及降低血液和鸡蛋中胆固醇含量［1－3］;也有研究发现，万寿菊提取物降低产蛋率或对产蛋率、采食量和蛋品质无显著影响［4－5］;此外，调控不同品种或周龄蛋鸡蛋黄颜色变化所需的色素添加量差异较大［1－2］。因此，本研究以28周龄苏禽青壳蛋鸡为试验动物，在饲粮中添加不同水平万寿菊提取物，分别测定产蛋性能、蛋品质以及蛋黄胆固醇含量，旨在确定万寿菊提取物在苏禽青壳蛋鸡饲粮中的适宜添加水平。

1 材料与方法

1.1 试验材料

万寿菊提取物是由从万寿菊中提取的叶黄素树脂经过皂化处理，添加载体混合而成，有效成分叶黄素含量为2.5%。

1.2 试验动物及设计

试验选用28周龄体况良好、产蛋率接近的苏禽青壳蛋鸡160只，随机分成4个组，每个组4个重复，每个重复10只鸡。对照组饲粮不含万寿菊提取物，试验组饲粮分别含有0.05%、0.10%和0.20%的万寿菊提取物(有效成分叶黄素的含量分别为 12.5、25.0 和 50.0 mg/kg)。参照 NRC(1994)蛋鸡营养需要配制饲粮，饲粮组成及营养水平见表1。试验鸡笼养，每笼2只，自由采食和饮水，常规饲养管理。试验分预试期和试验期，其中预试期1周，试验期6周(29～34周龄)。

表1 饲粮组成及营养水平(风干基础)Table 1 Composition and nutrient levels of diets(air-dry basis) %

1.3 测定指标及方法

1.3.1 产蛋性能

每天09:00准时收蛋，以重复为单位准确记录产蛋数和蛋重。每周末定时结料、称重，并统计各重复的实际耗料量。根据饲养试验记录，整理统计各组产蛋率、平均蛋重(各重复所有鸡蛋的平均重量)、平均日产蛋重(平均每只鸡每日的产蛋重)、平均日采食量(平均每只鸡每日的采食量)和料蛋比。

1.3.2 蛋品质

试验期第14、28和42天，每个重复取6枚蛋，每个组共24枚，测量纵径、横径、蛋壳厚度(为鸡蛋大头、小头和中间的平均值)和蛋壳强度后，测定并计算蛋白高度、哈氏单位、蛋黄颜色、蛋壳重、蛋黄重、蛋形指数及蛋比重。测定仪器包括电子数显卡尺(广陆数字测控股份有限公司)、蛋壳厚度测定仪(以色列ORKA公司)、蛋壳强度测定仪(以色列ORKA公司)和多功能蛋品质测定仪(以色列ORKA公司)。哈氏单位计算公式为:

哈氏单位 =100 × lg(H －1.7W0.37+7.6)。

式中:H为蛋白高度(mm);W为蛋重(g)。

1.3.3 蛋黄胆固醇含量

试验期第42天，蛋品质测定后，每个重复留2个蛋黄样品(随机取3个蛋黄，搅拌、混匀后为1个样品)，测定蛋黄胆固醇含量。样品处理方法:准确吸取蛋黄稀释液1.0 mL于10 mL离心管中，加入1.0 mL 95%乙醇，用漩涡振荡器混匀后，加入2.5 mL乙醚，再次混匀后加入2.5 mL石油醚，振荡混匀，用离心机3 000 r/min离心5 min，将上层萃取液取出，在低于45℃条件下用氮气吹干，加2.0 mL无水乙醇溶解，用0.22μm有机微孔滤膜过滤后，色谱柱测定。

1.4 统计分析

试验数据组间差异采用SPSS 15.0软件中的one-way ANOVA进行方差分析，采用LSD法进行多重比较，结果以平均值±标准差表示。

2 结果与分析

2.1 不同水平万寿菊提取物对蛋鸡产蛋性能的影响

由表2可知，各试验组产蛋率、平均蛋重、平均日产蛋重、平均日采食量和料蛋比与对照组相比差异均不显著(P＞0.05)。

表2 不同水平万寿菊提取物对蛋鸡产蛋性能的影响Table 2 Effects of different marigold extract levels on laying performance of laying hens

2.2 不同水平万寿菊提取物对蛋鸡蛋品质的影响

由表 3可知，试验期第 14天，0.10%和0.20%万寿菊提取物组的哈氏单位显著高于对照组(P＜0.05)，0.20%万寿菊提取物组的哈氏单位显著高于0.05%万寿菊提取物组(P＜0.05)，各试验组蛋黄颜色显著高于对照组(P＜0.05)。试验期第28天，0.10%和0.20%万寿菊提取物组的哈氏单位显著高于对照组(P＜0.05)，0.20%万寿菊提取物组的蛋黄颜色显著高于其他各组(P＜0.05)。试验期第42天，0.20%万寿菊提取物组的哈氏单位显著高于对照组(P＜0.05)，0.20%万寿菊提取物组的蛋黄颜色显著高于其他各组(P＜0.05)。试验期第14、28和42天的其他蛋品质指标与对照组相比差异均不显著(P＞0.05)。

2.3 不同水平万寿菊提取物对蛋鸡蛋黄胆固醇含量的影响

由表4可知，各试验组蛋黄胆固醇含量与对照组相比较差异均不显著(P＞0.05)。

3 讨论

3.1 不同水平万寿菊提取物对蛋鸡产蛋性能的影响

万寿菊提取物的有效成分是叶黄素，叶黄素具有着色、抗氧化和增强机体免疫力等功能。元娜［1］饲喂海兰灰商品蛋鸡分别含有 0、60、120 和240 mg/kg万寿菊提取物的玉米－豆粕型饲粮，发现60、120和240 mg/kg万寿菊提取物组产蛋率较对照组分别提高了1.42%、0.55%和2.12%，料蛋比下降了 2.16%、2.60% 和 3.30%，但均未达到显著水平。曲湘勇等［6］在鹌鹑饲粮中分别添加花粉和红辣椒粉(两者富含叶黄素)，发现试验组产蛋率提高了3.78%，料蛋比下降了3.90%，但未达到显著水平。而梁远东等［4］研究角黄素和阿卜酯对母鸡产蛋性能和蛋黄颜色的影响时发现，阿卜酯对产蛋性能无显著影响，角黄素明显降低产蛋率，认为产蛋率随总色素含量的升高而逐渐减少。黄小春［2］饲喂绿壳商品蛋鸡分别含有0、75、150、225、300 和 375 mg/kg 有效叶黄素的玉米－豆粕型饲粮，发现试验期内各试验组蛋鸡的产蛋率、蛋重、采食量、饲料转化率等与对照组相比差异均不显著。本研究发现，0.05%、0.10%和0.20%万寿菊提取物组产蛋率、平均蛋重、平均日产蛋重、平均日采食量和料蛋比与对照组相比差异均不显著，且未发现降低或升高趋势。有研究者认为，采食量和料蛋比的下降主要是由于万寿菊提取物有特殊的气味，影响蛋鸡采食量［1］。本研究者认为，由于蛋鸡嗅觉不发达，万寿菊提取物的特殊气味不是采食量降低的主要原因，而蛋鸡的品种、日龄、基础饲粮中叶黄素含量、万寿菊提取物的加工工艺、纯度及添加水平是影响蛋鸡产蛋性能的主要因素。本研究表明，各试验组添加的万寿菊提取物中叶黄素含量分别为12.5、25.0和50.0 mg/kg，在试验期内未影响苏禽青壳蛋鸡的产蛋性能。

表3 不同水平万寿菊提取物对蛋鸡蛋品质的影响Table 3 Effects of different marigold extract levels on egg quality of laying hens

表4 不同水平万寿菊提取物对蛋黄胆固醇含量的影响Table 4 Effects of different marigold extract levels on yolk cholesterol content of laying hens

3.2 不同水平万寿菊提取物对蛋鸡蛋品质的影响

在本研究条件下，除哈氏单位和蛋黄颜色外，试验期第14、28和42天的其他蛋品质指标与对照组相比差异均不显著。哈氏单位大小与蛋白高度正相关，与蛋重负相关，本研究中添加万寿菊提取物组的哈氏单位与对照组相比均有提高，说明万寿菊提取物能提高蛋白高度。蛋白的分泌主要在输卵管膨大部，分泌腺依次分泌内稀蛋白、浓蛋白和外稀蛋白包裹在卵黄外。因此，饲粮中的万寿菊提取物很可能能够到达分泌部，说明万寿菊提取物对分泌部细胞膜结构及分泌功能是有益的，这可能与叶黄素的抗氧化作用有关。元娜［1］研究发现，120和240 mg/kg万寿菊提取物组哈氏单位比对照组分别提高了1.41%和1.72%。而付静［5］在小麦型饲粮中添加辣椒红色素或沙棘黄色素发现对蛋品质无显著影响。这可能与蛋鸡的品种、日龄、基础饲粮中叶黄素含量及添加水平有关。

刘清等［7］研究类胡萝卜素的吸收过程时发现，离体蛋鸡小肠细胞通过被动扩散方式吸收类胡萝卜素。据推断叶黄素的吸收是在小肠中进行的，叶黄素与摄入的脂肪结合形成以甘油三酯为中心的脂肪乳粒，当胆盐达到一定浓度时，脂肪乳粒转变为细小的胆盐微粒，进入小肠黏膜表面净水层，以被动扩散方式而被机体吸收。吸收后的叶黄素以脂蛋白为载体，通过淋巴途径进入血液，在血液中主要与低密度脂蛋白结合，通过主动转运沉积到各个靶组织。陈波等［8］研究胆盐和游离脂肪酸对离体小肠细胞吸收类胡萝卜素时也得出相同结论。Fletcher等［9］研究蛋鸡体内叶黄素的沉积过程时发现，色素被吸收后几乎未经任何变化直接沉积到正在形成的卵中。本研究发现，饲粮中添加0.20%万寿菊提取物能显著改善蛋黄颜色。李晓双［10］研究也发现添加叶黄素可改善蛋黄颜色。牛竹叶等［11］在小麦饲粮中添加1.5%的叶黄素可显著改善蛋黄颜色。元娜［1］研究发现，万寿菊提取物极显著提高蛋黄颜色，240 mg/kg万寿菊提取物组蛋黄颜色由9～10增加至12～13。黄小春［2］饲喂蛋鸡叶黄素7 d后，发现蛋黄颜色由5～7上升至9～12，并维持相对稳定。以上2试验均饲喂玉米－豆粕型饲粮，但由于蛋鸡日龄不同，饲喂基础饲粮组蛋鸡的蛋黄颜色差异较大。

3.3 不同水平万寿菊提取物对蛋鸡蛋黄胆固醇含量的影响

95%以上的蛋黄胆固醇来自蛋黄前体，主要是极低密度脂蛋白，蛋黄胆固醇的沉积过程是极低密度脂蛋白沉积到卵母细胞的过程，极低密度脂蛋白通过卵黄生成素受体介导的内吞作用完整地转运进入生长中的卵母细胞，在溶酶体的作用下分解为游离胆固醇，从而实现色素沉积，并一直以游离的形式伴随卵母细胞的生长，最终形成蛋黄［12］。本研究在蛋鸡饲粮中添加 0.05%、0.10%和0.20%的万寿菊提取物，发现其对蛋黄胆固醇含量无显著影响。而元娜［1］研究发现，240 mg/kg万寿菊提取物(有效成分叶黄素含量为200 mg/kg)组的蛋黄胆固醇含量比对照组降低了6.02%，达到显著水平，而60和120 mg/kg万寿菊提取物(有效成分叶黄素含量分别为50和100 mg/kg)组蛋黄胆固醇含量与对照组相比，无显著影响。此试验在饲粮中添加的叶黄素量远高于本试验添加量，叶黄素的抗氧化作用与胆固醇的沉积是否有关，适量叶黄素能否影响胆固醇的合成，有待于进一步的研究。

4 结论

① 饲粮中添加0.05%、0.10%和0.20%的万寿菊提取物对蛋鸡产蛋性能和蛋黄胆固醇含量无不良影响。

② 饲粮中添加0.20%万寿菊提取物时能显著提高鸡蛋哈氏单位和蛋黄颜色。

［1］ 元娜.万寿菊提取物和维生素E对鸡蛋品质、抗氧化能力及免疫应答影响的研究［D］.硕士学位论文.保定:河北农业大学，2009:15－27.

［2］ 黄小春.蛋鸡对叶黄素添加剂的利用效率及沉积规律的研究［D］.硕士学位论文.武汉:武汉工业学院，2007:30－40.

［3］ LEESON S，CASTON L.Enrichment of eggs with lutein［J］.Poultry Science，2004，83(10):1709 －1712.

［4］ 梁远东，殷进炎，黄炳福，等.日粮中添加角黄素和阿卜酯对母鸡产蛋性能和蛋黄颜色的影响［J］.中国家禽，2004，8(S1):161 －163.

［5］ 付静.两种天然色素提取物对鸡蛋蛋黄品质调控的研究［D］.硕士学位论文.杨凌:西北农林科技大学，2002.

［6］ 曲湘勇，中岛隆.天然着色剂提高蛋黄色泽度的比较研究［J］.中国畜牧杂志，1999，35(2):29 －30.

［7］ 刘清，周光宏.蛋鸡离体小肠细胞对类胡萝卜素吸收的研究［J］.动物营养学报，1989，10(3):40 －45.

［8］ 陈波，周光宏，刘清.胆盐和游离脂肪酸影响离体小肠细胞类胡萝卜素吸收的研究［J］.动物营养学报，2001，13(3):47 －50.

［9］ FLETEHER D L，HALLORAN H R.An evaluation of a commercially available marigold concentrate and paprika oleoresin on egg yolk pigmentation［J］.Poultry Science，1981，60(8):1205 －1210.

［10］ 李晓双.叶黄素及其在鸡饲料中的应用研究［J］.饲料研究，2000(5):14－17.

［11］ 牛竹叶，刘福柱，王继强，等.蛋鸡小麦型日粮中添加叶黄素对鸡蛋品质的影响［J］.家畜生态学报，2008，29(1):53 －57.

［12］ NIMPF J，SCHNEIDER W J.Receptor-mediated lipoprotein transport in laying hens［J］.The Journal of Nutrition，1991，121(9):1471 －1474.