胃得康胶囊质量标准研究

★ 赖佐发 廖宝源 钟国庆 (江西省赣州市食品药品检验所 赣州341000)

胃得康胶囊是以行气止痛，用于气滞所致的胃病为主治病症的复方胶囊制剂，由延胡索(醋制)、佛手、鸡骨香、白及、枯矾、石菖蒲等中药组方。为有效控制该制剂的内在质量，笔者应用薄层色谱(TLC)法建立了佛手、延胡索(醋制)、石菖蒲的鉴别方法，采用高效液相色谱(HPLC)法对延胡索中主要有效成分廷胡索乙素进行了含量测定，现报道如下。

1 仪器与试药

Agilent 1260 型高效液相色谱仪(美国安捷伦公司);电子天平BS110(北京赛多利斯天平公司);USC－302 型超声波清洗器(上海波龙电子设备有限公司)。佛手对照药材(批号为120933 －200303)、延胡索对照药材(批号为120928 －201007 )、石菖蒲对照药材(批号为121098 －200904 )均购自中国药品生物制品检定所，供薄层色谱对照鉴别用;延胡索乙素对照品(批号为110726 －201112，含量为99.6% )购自中国食品药品检定研究院，供含量测定用;胃得康胶囊(批号分别为090801，090802，090803，江西保利制药有限公司);硅胶G(国药集团化学试剂有限公司);甲醇为色谱纯，水为蒸馏水，其他试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 薄层色谱鉴别

佛手［1］167:取本品内容物4.0g，加乙醇l0mL，超声处理30 分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加无水乙醇10mL 使溶解，置中性氧化铝柱上，以无水乙醇40mL洗脱，收集洗脱液，减压回收溶剂至干，残渣加无水乙醇2mL 使溶解，作为供试品溶液。另取佛手对照药材0 5g，加乙醇5 mL，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005 年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各2μL，分别点于同一硅段G 溥层板上，以环己烷一乙醇乙酯(3∶1)为展开剂，展开.取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。而阴性对照品溶液则无此斑点(图1 A)。

延胡索［1］130:取延胡索对照药材lg，加甲醇20mL，加热回流l 小时，滤过，滤液蒸干，残渣用10%醋酸20mL 使溶解，加浓氮试液调节pH 值至10 －1l，用乙醚振摇提取3 次，每次20mL.合并乙醚提取液，蒸干，残渣加甲醇lmL 使溶解，作为对照药材溶液。另取延胡索乙素对照品适量，加甲醇制成每1mL 含0.5mg 的溶液作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2010 年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各2 μL，含量测疋项下供试品溶液2μL 分别点于同一硅段G 溥层板上，以正己烷一甲醇一乙醇乙酯一浓氨试液(8∶2∶2∶0.1)为展开剂，展开.取出，晾干，置碘蒸气。熏3 分钟后取出，挥尽板上吸附的碘后，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。而阴性对照品溶液则无此斑点(图1B)。

石菖蒲［1］85:取本品内容物4g，加水50mL，加热回流30 分钟，滤过，滤液用石油醚(30 －60℃)振摇提取2 次，每次l5mL，合并石油醚液，蒸干，残渣加甲醇2mL 使溶解，作为供试品溶液。另取石菖蒲对照药材lg，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2010 年版一部附录VI B)试验，吸取供试品溶液10 μL，对照药材溶液5 μL，分别点于同一硅胶G 薄层板上，以石油醚(60 －90℃)－乙酸乙酯(3∶1)为展开剂，展开. 取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相同的位置上，显相同颜色的荧光斑点。而阴性对照品溶液则无此斑点(图1C)。

图1 薄层色谱图

2.2 延胡索乙素含量测定

2.2.1 色谱条件 色谱柱:DiamonsilC18 柱(200 mm×4.6 mm，5μm);以甲醇－0.1%磷酸(三乙胺调pH = 6. 0)(62 ∶38)为流动相:检测波长为282nm;柱温:40℃;流速:1. 0 mL /分;进样量:10μL。理论板数按延胡索乙素峰计算应不低于3 000。

2.2.2 溶液制备 精密称取延胡索乙素对照品适量，加甲醇制成每1mL 含48ug 的溶液，即得。取本品装量差异项下的内各物，混匀，取约3g，精密称定，精密加入甲醇－ 浓氨试液(20 ∶1)混合溶液50mL，称定重量，加热回流1 小时，放冷，加甲醇－浓氨试液(20∶1)混合溶液补足减失的重量，滤过，精密量取续滤液25mL. 蒸干，残渣用10% 醋酸20mL 使溶解于分液漏斗中，用浓氨试液凋节pH 值至10 －11，加乙醚振摇提取4 次，每次20mL，合并乙醚提取液，蒸干，残渣加甲醇使溶解转移至5mL量瓶中.加甲醇至刻度，摇匀，即得。取缺延胡索的阴性样品约3 g，精密称定，按供试液制备方法制成阴性对照品溶液。

2.2.3 方法学考察 干扰试验:照上述色谱条件，分别取供试品溶液、对照品溶液和阴性对照品溶液各10μL，分别注入色谱仪。供试品溶液色谱图中，在与对照品溶液色谱图相应位置上显示相同保留时间的色谱峰，而阴性对照品溶液在此保留时间处无干扰(见图2)。

线性关系考察:分别精密吸取延胡索乙素对照品溶液(0.096 0 g /L )1、2、5、8、10mL，置10mL 量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，配成质量浓度分别为0.009 6、0.019 2、0.048 0、0.076 8、0.096 0 g/L系列对照品溶液。分别精密吸取上述对照品溶液各10 μL，注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定，以峰面积积分值(Y)为纵坐标、延胡索乙素质量浓度(X)为横坐标进行线性回归，得回归方程Y=1156.6X－1.133 3，r=0.999 9。结果:延胡索乙素进样量在0.096 －0.960μg 范围内与峰面积积分值呈良好线性关系。

精密度试验:精密吸取延胡索乙素对照品溶液(0.048 g /L)10 μL，按上述色谱条件重复进样6次，测定延胡索乙素峰面积积分值。结果的RSD 为0.71% (n=6 )，表明精密度良好。

重现性试验:取同一批(批号为090801 )样品，依法制备供试品溶液并测定。结果平均含量为100.4ug / 粒，RSD 为0.87%(n =6 )，表明重复性良好。

稳定性试验:取同一供试品(批号为090801)溶液，分别于0，2，4，6，8，12 小时时分别进样10μL，测定延胡索乙素的峰面积。结果的RSD 为0. 48%，表明供试品溶液在12 小时内稳定。

加样回收试验:取延胡索乙素对照品约12.0mg，精密称定，置100 mL 容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取续滤液10mL 置25 mL容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得质量浓度为0.048 g /L 的对照品溶液，备用。取已知含量的样品(批号为090801 )1.5 g，精密称定，分别加入上述延胡索乙素对照品溶液1 mL，各2 份，按供试品溶液的制备方法制备加样回收供试品溶液，分别进样10μL，测定。结果见表1。

表1 延胡索乙素加样回收试验结果(n=6 )

2.2.4 样品含量测定 取胃得康胶囊3.0 g，精密称定，按供试品溶液制备方法制备溶液并进样10 μL，测定峰面积，计算延胡索乙素的含量。结果批号为090801，090802，090803 的样品中延胡索乙素的含量分别为100.4，100.6，100.8 μg /粒。

图2 高效液相色谱图

3 讨论

延胡索乙素(dl － tet rahy dro palmat ine，dl －THP)是从中药延胡索中提取的生物碱，其左旋体l－T HP 又称颅痛定，具有镇痛作用［2］。近年来发现还有降压、抗心率失常、抗血栓、钙拮抗、抑制胃酸分泌等药理作用［2］。2010 年版《中国药典(一部)》中延胡索以甲苯－丙酮(9∶2)为展开剂，为了避免使用甲苯，采用了正己烷一甲醇一乙醇乙酯一浓氨试液(8 ∶2 ∶2 ∶0. 1)为展开剂，取得很好的分离效果。［1］佛手醇提取液具有明显镇咳，平喘，祛痰作用和提高抗应激能力。［4］采用了2010 年版《中国药典(一部)》佛手的薄层鉴别方法［1］，但供试品经过中性氧化铝柱，可消除延胡索的干扰，并分别与阴性对照溶液进行对照，结果没有干扰、专属性强。延胡索乙素为延胡索中的主要有效成分，并且在方中的含量较高，因此选择延胡索乙素作为胃得康胶囊含量测定的指标成分。采用了2010 年版《中国药典》(一部)延胡索含量测定项下的流动相，分离效果好，无干扰，结果准确。本试验建立的定性、定量方法，可用于胃得康胶囊的质量控制。

［1］国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)［M］. 北京. 中国医药科技出版社，2010.

［2］徐婷，金昔陆，曹惠明.延胡索乙素药理作用的研究进展［J］. 中国临床药学杂志，2001，(1):58 －59

［3］吴祥瑞，黄玉芳.石菖蒲的化学成分及对中枢神经作用机理实验研究进展［J］.浙江中医药大学学报，2007，(6):232 －233.

［4］金晓玲，徐丽珊.佛手醇提取液的药理作用研究［J］.《中国中药杂志》，2002，27(8):604 －606.

［5］景玉宏，冯慎远，汤晓琴，等.石菖蒲对学习记忆的影响及突触机制［J］.中国中医基础医学杂志，2002，8(6):38.

［6］杨晓燕，陈发奎.菖蒲的化学成分研究概况［J］.沈阳药科大学学报，1999，16(1):71.

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