大肠癌患者血清癌胚抗原、CEA mRNA和CK19mRNA检测的临床意义探讨

李轶辉

（中国人民解放军第163医院普外科，长沙 410003）

癌胚抗原（CEA）和甲胎蛋白（AFP）等多种指标在肿瘤患者的预后评价中发挥重要作用［1］，多种肿瘤患者血清中存在CEA增高的现象。近年来，随着分子生物学的发展，有学者［2－4］发现大肠癌患者外周血中有高水平CEA mRNA的表达，较CEA检测具有更高的敏感性。CK19为上皮细胞角蛋白，由于CK19mRNA在细胞外环境中的不稳定性，患者血中CK19mRNA的检测有助于肿瘤患者的诊断。本研究旨在探讨大肠癌患者血清中CEA、CEA mRNA和CK19 mRNA检测的临床意义。

1 资料与方法

1.1 临床资料

2008年9月～2011年8月期间本院收治的大肠癌患者48例，其中男30例，女18例，年龄29～78岁，平均（56.9±7.1）岁 。组织学类型：管状腺癌19例、乳头状癌16例、黏液腺癌13例。Dukes分期：A期14例，B期17例，C期12例，D期5例。肿瘤部位：结肠癌26例，直肠癌22例。

1.2 方法

清晨空腹抽取肘静脉血3mL，3 000r／min离心5min，分离血清，放射免疫分析法检测血清中CEA水平；反转录酶－聚合酶链锁反应（RT－PCR）法检测血清中CEA mRNA和CK19mRNA 水平。CEA＞5ng／mL为阳性；CEA mRNA阳性扩增条带为199bp；CK19mRNA阳性扩增条带为200bp。分析血清CEA、CEA mRNA、CK19mRNA水平与大肠癌患者病理因素关系，比较CEA、CEA mRNA、CK19mRNA单独及联合检测的阳性率。

1.3 统计学方法

采用SPSS 10.0统计软件，两组均数比较用t检验，计量资料用均数±标准差（±s）表示，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 血清CEA、CEA mRNA、CK19mRNA水平与大肠癌患者病理因素关系

大肠癌患者血清中CEA、CEA mRNA、CK19mRNA水平检测显示，上述各指标Duckes C＋D期表达率明显高于Duckes A＋B期患者（P＜0.05）（见表1）。

表1 血清CEA、CEA mRNA、CK19mRNA水平与大肠癌患者病理因素关系（n）

2.2 血清CEA、CEA mRNA、CK19mRNA联合检测

CEA＋CEA mRNA＋CK19mRNA联合检测阳性率为87.5%，明显高于CEA、CEA mRNA、CK19mRNA任何1项检测的阳性率（P＜0.01），也明显高于CEA＋CEA mRNA、CEA＋CK19mRNA、CEA mRNA＋CK19mRNA任何2项联合检测的阳性率（P＜0.05）（见表2）。

3 讨论

肿瘤原发灶生长到一定程度时，肿瘤细胞脱落，通过血液循环侵袭其它组织器官，其中大部分的肿瘤细胞被机体免疫系统清除，少数肿瘤细胞恶性程度较高，最终形成转移灶，即发生肿瘤转移［5－7］。血液循环中的肿瘤细胞数量较少，PCR技术具有较高的敏感性和特异性，在肿瘤细胞血清学检测方面发挥了重要的作用［8，9］。

表2 血清CEA、CEA mRNA、CK19mRNA联合检测结果

CEA为特异性较高的肿瘤相关抗原，正常人体内表达极少；CK19为上皮细胞角蛋白，是检测大肠癌的有效标记物；由于以上两者表达的不稳定性，因此其在血清中的表达水平可有助于对肿瘤的诊断。而对肿瘤早期转移的准确诊断，有助于为是否术后进行化疗、判断疗效等提供一定的指导意义。RT－PCR法检测外周血中 CEA mRNA、CK19 mRNA具有较高的敏感性，国外学者［10－13］很早以前就利用此法检测血中CEA mRNA、CK19mRNA水平，也报道了各组织中CEA mRNA、CK19mRNA表达的敏感性和特异性。

本研究用RT－PCR法检测了大肠癌患者血清中CEA mRNA、CK19mRNA水平，并用放射免疫法测定了CEA的水平。结果显示，CEA mRNA、CK19mRNA的阳性率为62.5%，与其他学者［14，15］的研究相近。肿瘤病理学与外周血中CEA、CEA mRNA、CK19mRNA关系的研究发现，其与肿瘤大体分型无明显相关，但与Dukes分期有明显相关性，可见以上三者可反映病情的严重程度及预后情况。外周血CEA、CEA mRNA、CK19mRNA的检出阳性率分别为45.8%、62.5%、62.5%，联合检测分析时，3项联合检测的阳性率明显高于双项及单项检测的阳性率，可见多指标联合检测能提高阳性率，对预后判断具有重要价值。

综上所述，基因水平的检测比蛋白水平检测更为敏感，大肠癌外周血中CEA mRNA、CK19mRNA的检测有助于疾病的预后判断，联合检测大肠癌患者血清中CEA、CEA mRNA、CK19mRNA的阳性率高于单一指标，增大预后判断价值。

［1］魏敏，鲁怀伟，程义壮.肿瘤标志物 CEA、CA19－9和CA242联合检测在诊断老年胃癌患者中的临床意义［J］.中外医学研究，2012，10（17）：82－83.

［2］秦海春，刘俊，杜廷义，等.大肠癌手术前后外周血CEA蛋白、CEA mRNA的变化及临床意义［J］.中国老年学杂志，2012，32（3）：499－500.

［3］秦海春，刘俊，杜廷义，等.CEA蛋白、CEA mRNA在大肠癌诊断 中 的 应 用 价 值 ［J］.现 代 预 防 医 学，2012，39（9）：2255－2256.

［4］费建东，聂双发，胡晓峰，等.胃癌患者外周血微转移指标的检测及意义［J］.中国老年学杂志，2011，31（22）：4319－4321.

［5］Iwasaki T，Yamakawa M，Asaoka A，et al.Anti－angiogenesis activities of novel peptide complexes：mitochondria－disruptive 9mer peptides conjugated with the integrin alpha V beta 3－homing cyclic RGD motif［J］.Biosci Biotechnol Biochem，2012，76（11）：2044－2048.

［6］Yamatodani T，Holmqvist B，Kjellén E，et al.Using intravital microscopy to observe bevacizumab－mediated antiangiogenesis in human head and neck squamous cell carcinoma xenografts［J］.Acta Otolaryngol，2012，132（12）：1324－1333.

［7］Wang JB，Wang MD，Li EX，et al.Advances and prospects of anginex as a promising anti－angiogenesis and anti－tumor agent［J］.Peptides，2012，38（2）：457－462.

［8］Seo Y，Aparici CM，Cooperberg MR，et al.In vivo tumor grading of prostate cancer using quantitative 111In－capromab pendetide SPECT／CT［J］.J Nucl Med，2010，51（1）：31－36.

［9］Hautmann S，Beitz S，Naumann M，et al.Extended sentinel lymph node dissection in radical prostatectomy for prostate cancer：a study in the Kiel risk population［J］.Urologe A，2008，47（3）：299－303.

［10］Liefers GJ，Cleton－Jansen AM，van de Velde CJ，et al.Micrometastases and survival in stage II colorectal cancer［J］.N Engl J Med，1998，339（4）：223－228.

［11］Wong IH，Yeo W，Chan AT，et al.Quantitative relationship of the circulating tumor burden assessed by reverse transcription－polymerase chainreaction for cytokeratin 19 mRNA in peripheral blood of colorectal cancer patients with Dukes＇stage，serumcarcinoembryonic antigen level and tumor progression［J］.Cancer Lett，2001，162（1）：65－73.

［12］Hermunen K，Haglund C，Osterlund P.CEA fluctuation during a single fluorouracil－based chemotherapy cycle for metastatic colorectal cancer［J］.Anticancer Res，2013，33（1）：253－260.

［13］Oloomi M，Bouzari S，Mohagheghi MA，et al.Molecular Markers in Peripheral Blood of Iranian Women with Breast Cancer［J］.Cancer Microenviron，2013，6（1）：109－116.

［14］Guo Y，Wang J，Huang P.Clinical Significance of CK20，CK19，CEA mRNAs in Peripheral Blood from Lung Cancer Patients［J］.Zhongguo Fei Ai Za Zhi，2009，12（9）：1013－1017.

［15］Zheng HY，Chen Q，Ye YB，et al.mRNA expression of CK19 and CEA in peripheral blood of patients with breast cancer detected by real－time quantitative PCR［J］.Zhonghua Yi Xue Za Zhi，2008，88（32）：2267－2270.