海滨锦葵块根粉对肉仔鸡生长和免疫性能的影响*

李蛟龙，徐昊翔，尹茂文，高 峰，周光宏

(南京农业大学 动物科技学院 动物源食品生产与安全保障省重点实验室，江苏 南京 210095)

海滨锦葵为锦葵科海滨锦葵属多年生耐盐经济植物，集油料、饲料、医药和观赏价值于一身，天然分布在美国东部沿海(特拉华州到德克萨斯州)的含盐沼泽地带，于1995年被引入我国。海滨锦葵具有多重抗性，例如耐盐、抗旱、耐涝、抗虫等。同时海滨锦葵的地下块根特别发达，美国东部印第安土著有用其治疗上呼吸道炎症的习惯。有研究通过超声波法、有机萃取法和层析法等方法，从海滨锦葵块根中提取出皂甙[1-2]、多糖[1,3]和黄酮[2]等活性物质，而这些活性物质均具有一定的提高免疫的效应[4-5]。但海滨锦葵块根对畜禽生产性能和免疫功能是否有影响，国内外尚未见相关报道。

随着动物营养学研究的不断深入，酶制剂受到越来越多研究者的重视。由于饲料原料中含有一些非淀粉多糖(如木聚糖、β-葡聚糖、纤维素等)和植酸等抗营养成分[6]，影响了家禽对营养物质的吸收利用。饲料中添加外源性的酶制剂可以降解和消除饲料中的抗营养成分，从而达到提高饲料养分利用率的目的[7]。在家禽日粮中添加复合酶制剂可以改善家禽的生产性能[8-9]，并提高机体免疫力[10-11]，是一种有效的机体免疫增强剂。

本试验以酶制剂作为对照，通过研究海滨锦葵块根粉对肉仔鸡生长和免疫性能的影响，探讨其饲用价值，为其合理开发利用提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

肉仔鸡由南京某孵化场提供；海滨锦葵块根粉由南京大学盐生植物研究室提供；饲料用复合酶制剂由江苏奕农生物工程有限公司提供，主要组成和活性如下：α-淀粉酶，20 000 U/g；木聚糖酶，10 000 U/g；纤维素酶，20 000 U/g；β-葡聚糖酶，20 000 U/g；甘露聚糖酶,20 000 U/g；植酸酶,5 000 U/g。

1.2 试验设计

选择体重相近的1日龄健康AA肉仔鸡96羽，随机分为4个处理组，试验Ⅰ组为对照组，饲喂基础日粮，试验Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组分别在基础日粮中添加0.02%复合酶制剂、0.5%海滨锦葵块根粉和1%海滨锦葵块根粉。每组设3个重复即可，每个重复6只鸡，试验期21 d。

1.3 试验日粮及饲养管理

试验日粮参照美国NRC(1994)AA肉仔鸡的营养需要，配制玉米-豆粕型基础日粮，日粮组成及营养水平见表1。饲养试验地点为南京农业大学动物科技学院动物房。肉仔鸡自由采食和饮水，24 h光照，常规消毒免疫。

表1 基础日粮组成及营养水平Table 1 Composition and nutrients of basal diet

注：*每千克预混料提供：维生素B12.21 mg；维生素B27.8 mg；维生素B120.015 mg；维生素B111.2 mg；维生素H 0.04 mg；维生素B64 mg；维生素B340 mg；维生素D36 mg；胆碱 400 mg；维生素K 1.3 mg；维生素A 24 mg；泛酸钙 10 mg；铜 7.6 mg；铁 82 mg；锌 65 mg；锰 110 mg；硒 0.3 mg；碘 1.1 mg。

Note： Premix provided per kg of diet: thiamin 2.21 mg, riboflavin 7.8 mg, vitamin B12(cobalamin) 0.015 mg, folic acid 1.2 mg, biotin 0.04 mg, pyridoxine HCl 4 mg, nicotinamide 40 mg, cholecalciferol 6 mg, choline chloride 400 mg, menadione 1.3 mg, Vitamin A 24 mg, calcium pantothenate 10 mg, Cu (from copper sulfate) 7.6 mg, Fe (from ferrous sulfate) 82 mg, Zn (from zinc oxide) 65 mg, Mn (from manganese sulfate) 110 mg, Se (from sodium selenite) 0.3 mg, I (from calcium iodate) 1.1 mg.

1.4 样品采集与处理

于21日龄每个重复随机抽取2只鸡(每组8只)称重后进行翅静脉采血，制备血清，进行血清免疫指标测定。采血后立即宰杀，分离免疫器官(胸腺、脾脏和法氏囊)称重。

1.5 指标测定

分别于试验的第1 d和第21 d对试验鸡只进行称重，试验期间记录每天投料量与剩料量，最后计算采食量、总增重和料重比。

血清指标包括血清中溶菌酶活性、白介素6(IL-6)含量、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量和新城疫疫苗抗体效价。其中溶菌酶活性、IL-6含量、TNF-α含量参照试剂盒(南京建成生物工程研究所)使用说明测定，新城疫疫苗抗体效价参照周琴琴[12]的方法使用血凝抑制(HI)试验测定。

根据免疫器官重和活体重，计算免疫器官指数。公式如下：

免疫器官指数=器官重量(g)/活体重(kg)

1.6 统计分析

试验结果用SPSS16.0统计软件中的单因子方差分析(One-Way ANOVA )进行LSD多重比较。结果用平均值和平均标准误(SEM)表示，以P<0.05为显著性标准。

2 结果与分析

2.1 海滨锦葵块根粉对肉仔鸡生长的影响

与对照组和酶制剂组相比(见表2)，1%的海滨锦葵块根粉组有提高采食量的趋势，但差异不显著(P>0.05)。与对照组和酶制剂组相比，0.5%和1%海滨锦葵块根粉组有提高总增重的趋势，但差异也不显著(P>0.05)。四个处理组之间的料重比无显著差异(P>0.05)。

2.2 海滨锦葵块根粉对肉仔鸡免疫器官的影响

与对照组相比(见表3)，酶制剂组、0.5%和1%海滨锦葵块根粉组的法氏囊指数分别提高了25.49%、15.59%和33.33%，但差异均不显著(P>0.05)。四个处理组之间的胸腺指数和脾脏指数也无显著差异(P>0.05)。

表2 海滨锦葵块根粉和酶制剂对肉仔鸡生长的影响Table 2 Effects of Kosteletzkya virginica root tuber flour and enzyme preparation on growth performance in broilers

表3 海滨锦葵块根粉和酶制剂对肉仔鸡免疫器官指数的影响Table 3 Effects of Kosteletzkya virginica root tuber flour and enzyme preparation on the immune organ index in broilers

2.3 海滨锦葵块根粉对肉仔鸡血清免疫的影响

与对照组相比(见表4)，添加酶制剂组、添加0.5%和1%海滨锦葵块根粉组的溶菌酶活性分别提高了23.90%、3.94%和3.17%，但差异均不显著(P>0.05)。与对照组相比，酶制剂组、0.5%和1%海滨锦葵块根粉组的TNF-α含量分别降低了30.53%(P<0.01)、16.37%(P>0.05)和3.41%(P>0.05)。与1%的海滨锦葵块根粉组相比，酶制剂组也显著降低了TNF-α含量(P<0.05)。与对照组相比，酶制剂组、0.5%和1%海滨锦葵块根粉组的IL-6含量分别降低了8.01%、13.67%和7.08%，但差异均不显著(P>0.05)。添加酶制剂、0.5%和1%的海滨锦葵块根粉对肉仔鸡血清中新城疫疫苗抗体效价没有显著影响(P>0.05)。

表4 海滨锦葵块根粉和酶制剂对肉仔鸡血清免疫指标的影响Table 4 Effects of Kosteletzkya virginica root tuber flour and enzyme preparation on some immunity parameters in plasma in broilers

注： 同行组间肩注不同小写字母表示差异显著(P<0.05)，不同大写字母表示差异极显著(P<0.01)。

Note： Values with different lowercase superscripts within the same row means significant difference (P<0.05); Values with different capital letter superscripts within the same row means extreme difference (P<0.01).

3 讨 论

酶制剂作为绿色环保畜禽添加剂，国内外对此研究相对较多。在基础饲粮中添加含蛋白酶、淀粉酶和木聚糖酶的复合酶制剂，能改善家禽的生产性能[8-9]。本试验表明，饲料中添加复合酶制剂对肉仔鸡的生产性能无显著影响，这与王修启等[13]试验结果比较类似，研究结果的差异可能与饲粮营养水平有关。另有研究发现[14-15]，日粮中添加黄酮类和多糖类提取物，均可以改善肉鸡的生产性能。黄酮具有植物雌激素的作用，在动物体内影响性腺轴和生长轴，使得睾酮和生长激素等生成释放增加，进而加速蛋白质合成，促进肌肉生长[16]。而植物多糖会影响肉仔鸡的肠道发育和食糜中微生物菌群的平衡，促进机体对饲料营养成分的消化利用率，加快蛋白质的合成，促进肉仔鸡的生长[17]。本试验也发现，添加海滨锦葵块根粉对肉仔鸡采食量和增重都有提高趋势，说明海滨锦葵块根粉中含有的黄酮类和多糖类等活性成分，在一定程度上有潜在的促生长效应。

法氏囊是禽类特有的体液免疫中枢免疫器官，胸腺是细胞免疫中枢器官，两者分别是B和T淋巴细胞分化成熟的场所，脾脏是禽类最大的外周免疫器官，参与全身的非特异性及特异性免疫，中枢及外周免疫系统器官的发育状况直接决定着家禽机体的免疫水平。免疫器官重量的增加是生长发育较快的表现，而指数的提高意味着免疫系统成熟较快[18]。蒋桂韬等[19]研究发现，小麦型日粮中添加木聚糖酶显著提高了黄羽肉鸡免疫器官指数。本试验表明，添加酶制剂有提高肉仔鸡法氏囊指数的趋势。魏炳栋等[4]研究发现，饲料中添加黄芪多糖显著影响肉仔鸡的免疫器官发育，添加大豆黄酮对鸡免疫器官发育也有显著影响[20]。本试验也发现，饲料中添加海滨锦葵块根粉有提高肉仔鸡法氏囊指数的趋势，说明海滨锦葵块根中含有的活性物质有促进肉仔鸡免疫系统发育、提高其免疫性能的潜在能力。

机体在外来异物即抗原入侵后，免疫系统激活，产生促炎症细胞因子和细胞趋化因子，通过一系列生理和病理性反应来对付入侵者。而促炎症因子往往是引起机体体温升高、炎症反应、物质代谢改变的主要因素之一，例如IL-1β、IL-6和TNF-α等[21]。本研究发现，酶制剂和海滨锦葵块根粉都可以降低肉仔鸡血清中IL-6和TNF-α的含量。大豆异黄酮和植物多糖都可以降低细胞因子的含量[22-23]，而IL-6能诱导B细胞分化和产生抗体，诱导T细胞活化增殖和分化，是炎性反应的促发剂。TNF-α是炎症反应过程中出现最早、最重要的炎性介质之一，能激活中性粒细胞和淋巴细胞，调节其他组织代谢活性并促使其他细胞因子的合成和释放[24]。因此，本试验表明海滨锦葵块根粉可以缓解或减少肉仔鸡的炎症反应，提高机体的免疫功能。溶菌酶是一种低分子量不耐热的碱性蛋白,是单核细胞、中性粒细胞和巨噬细胞的分泌产物。它具抗菌、抗病毒、抗肿瘤等多种作用，血清溶菌酶活性是机体非特异性免疫反应的重要指标。许多研究发现，多糖和黄酮类物质均可以提高鸡血清中溶菌酶含量[25-26]。本研究也发现，酶制剂和海滨锦葵块根粉都有提高肉仔鸡血清中溶菌酶活性趋势，表明海滨锦葵块根中含有的多糖和黄酮等活性成分可以起到提高机体非特异性免疫功能的潜在能力。本试验测定了肉仔鸡的新城疫疫苗的抗体效价，以评价肉仔鸡的体液免疫情况，发现酶制剂对肉仔鸡的新城疫疫苗抗体效价无显著影响，但有升高的趋势。而抗体水平直接反映机体的抗感染能力，表明酶制剂可以提高肉仔鸡的抗感染能力，而未见海滨锦葵块根粉对抗体效价的显著影响。

4 小 结

酶制剂和海滨锦葵块根粉对肉仔鸡的生产性能有提高趋势，可以在一定程度上提高机体的免疫功能，说明海滨锦葵块根粉具有一定的饲料开发利用价值。如果能利用现代分离和波谱技术对海滨锦葵块根的化学成分进行进一步的分离纯化和结构鉴定，必将为海滨锦葵块根的进一步开发利用提供更广阔的空间。

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