蛋鸡H5N1Re-4-5亚型初次免疫的探讨

张萍 （江苏省徐州市铜山区畜牧兽医站 221007）



蛋鸡H5N1Re-4-5亚型初次免疫的探讨

张萍 （江苏省徐州市铜山区畜牧兽医站 221007）

对某海兰种鸡场免疫禽流感疫苗60日龄和180日龄后的种蛋所生产的供应给周边的10个蛋鸡养殖户的雏鸡，采用4个不同日龄免疫禽流感H5N1Re-4-5疫苗及不免疫5种方式。随即选择同批的9个不同日龄的雏鸡各20只，进行采血，利用血凝抑制试验进行H5Re-4-5禽流感抗体水平监测分析。结果显示：种鸡免疫60d后出孵的5家雏鸡1日龄母源抗体高，雏鸡首免在7~14日龄时免疫效果好；种鸡免疫180d后出孵的5家雏鸡1日龄母源抗体低，雏鸡首免在7日龄前免疫效果好。

H5Re-4-5 母源抗体 初免日龄

禽流感(Avian Influenza，AI)是由A型流感病毒(AIV)引起的一种禽类急性传染性疾病。禽类感染后表现为呼吸道症状、食欲减少、急性高度致死性的全身性疾病等多种症候。禽流感不仅能引起鸡、鸭、鹅等禽类发病、死亡，而且能引起哺乳动物和人发病、死亡，严重地威胁人类的健康和生命，因此世界动物卫生组织及我国将其列为A类烈性传染病[1,2,3]。禽流感没有特效的药物治疗，因此疫苗免疫是控制本病最有效的方法[4,5,6]。

高致病性禽流感给我国的养禽业造成了巨大的压力。目前，免疫接种是控制该病最有效的手段。本区虽广泛地使用统购的高致病性禽流感计划疫苗进行免疫，但所用免疫程序比较混乱，特别是首免日龄不太合理。本文着重探讨母源抗体消长规律及不同首免日龄的抗体变化情况，以期找到科学合理的适应本地鸡场的高致病性禽流感初免日龄。

1 材料与方法

1.1 试验仪器及用品 微量血凝抑制试验所需的所有仪器、器材由区畜牧兽医站实验室提供。禽流感H5N1Re-4抗原由中国农业科学院哈尔滨兽医研究所生产，批号：201101。鸡禽流感H5N1Re-4阳性血清，由中国农业科学院哈尔滨兽医研究所生产，批号201101。

1.2 试验雏鸡与分组 选取徐州市区某海兰种鸡场种鸡免疫后60d和180d两批种蛋所孵化的雏鸡各5家。采用1、7、14、21日龄免疫禽流感H5N1Re-4-5疫苗及不免疫5种方式，分成10组。随即选择同批的1、5、10、15、20、25、30、35、40日龄的雏鸡各20只，心脏采血每只鸡采取1ml血液，进行HI监测。免疫及分组情况见表1、表2。

1.3 疫苗选择 选取徐州市统购计划苗，青岛易邦生产的禽流感H5N1Re-4-5亚型油乳剂灭活疫苗。

1.4 监测方法 采用国家农业部行业标准NY/T-2004高致病性禽流感监测技术规范规定的监测方法进行血清抗体监测[7,8]。

表1 种鸡免疫60d后免疫内容与方法

注：H5N1Re-4-5禽流感疫苗由青岛易邦提供计划苗，免疫剂量0.3ml

表2 种鸡免疫180d后免疫内容与方法

注：H5N1Re-4-5禽流感疫苗由青岛易邦提供计划苗，免疫剂量0.3ml

2 试验结果

表3 种鸡免疫60d后5个组HI检测抗体的结果 (Log2)

注：本表数字是平均数

2.1 第1~5组试验鸡抗体监测结果 从表3可以看出，种鸡免疫禽流感H5N1Re-4-5亚型油乳剂灭活疫苗60d后的种蛋孵出的5家雏鸡，母源抗体整齐，较高，抗体水平达到7.75(Log2)到7.9(Log2)。1日龄免疫组雏鸡到30日龄时仍接近65%的保护率，平均抗体4(Log2)；7日龄和14日龄免疫组抗体较好，在40d监测时间内，平均抗体最低4.45(Log2)，有较高的保护率；21日龄免疫组在20到25天，平均抗体水平低于4(Log2)，无保护力，到30日龄后才又达到4(Log2)以上；不免疫对照组到20日龄平均抗体只有3.1(Log2)无保护力。

2.2 第6~10组试验鸡抗体监测结果 从表4可以看出，种鸡免疫禽流感H5N1Re-4-5亚型油乳剂灭活疫苗180天后的种蛋孵出的5家雏鸡，母源抗体整齐，但较低，抗体水平只有4.6(Log2)到4.7(Log2)。1日龄免疫组雏鸡到15日龄时有80%的保护率，平均抗体4.2(Log2)，到20日龄只有55%保护率，平均抗体3.5(Log2)；7日龄免疫组免疫抗体较好，在35d监测时间内，平均抗体最低4.3(Log2)，有较高的保护率，到40日龄平均抗体降到4.1(Log2)，14日龄免疫组到15d时，平均抗体水平低于4(Log2)，无保护力，到25日龄后才又达到4(Log2)以上；21日龄免疫组在15d平均抗体水平低于4(Log2)，无保护力，到35d后才上升到4(Log2)以上；不免疫对照组到15日龄平均抗体只有3.4(Log2)无保护力。

表4 种鸡免疫180d后5个组HI检测抗体的结果 (Log2)

注：本表数字是平均数

2.3 第1~5组试验鸡抗体监测变化规律(如图1) 从图1中可以看出第2、第3组曲线始终在4以上，第1组在30日龄降到4，第4、第5组在17日龄时降到4，第4组在30日龄时又升到4以上。

图1 种鸡免疫60d后的种蛋出雏的5组试验鸡抗体变化

2.4 第6~10组试验鸡抗体监测变化规律(如图2) 从图中可以看出只有第7组曲线始终在4以上，第6组在16日龄降到4，第8组、第9组、第10组在12日龄时降到4，第8组在21日龄时升到4以上，第9组在32日龄时才升到4以上。

图2 种鸡免疫180d后的种蛋出雏的5组试验鸡抗体变化

3 讨论

（1）本次试验选择的雏鸡是一家种鸡场孵化的不同养殖户饲养的，养殖条件与管理水平接近，但饲喂的饲料不同。（2）从高致病性禽流感母源抗体消长规律看，母源抗体在5日龄达到高峰，以后开始下降，母源抗体高的，在17日龄不具保护力，母源抗体低的，在12日龄就失去保护力。（3）种鸡免疫高致病性禽流感疫苗60d后的种蛋孵出雏鸡母源抗体水平高，免疫180d后的种蛋孵出的雏鸡母源抗体水平较低。（4）高致病性禽流感母源抗体高的，达到6Log2以上的，首免在7~14日龄之间效果好；高致病性禽流感母源抗体低的，在6Log2以下的，首免可以在7日龄左右，母源抗体越低，首免日龄越早。1日龄免疫，免疫抗体增长的不是太高，维持时间不长，可能与日龄太小，免疫功能不健全，疫苗吸收不理想有关。（4）本次试验结果基本符合首免日龄的计算公式，D=4×(X-4)(注：D为首免日龄，X为抗体滴度)[9]。

[1] 刘耀兴, 陈昌海主编. 禽流感血清学诊断与监测试验[M]. 江苏省重大动物疫病诊断与监测技术及实验室管理培训班讲义. 2004.

[2] 陈继明主编. 禽流感. 重大动物疾病监测指南[M]. 北京: 中国农业科技出版社. 2009.

[3] 丁永龙等主编. 禽流感. 新编禽病诊疗手册[M].北京: 中国农业科技出版社. 2003.

[4] 付凤生等. 罗曼蛋鸡H5N1亚型禽流感母源抗体监测试验观察[J]. 当代畜牧, 2004, 8:7.

[5] 廖明等. 家禽免疫学基础知识[J]. 中国兽医杂志, 1996, 10:50.

[6] 傅先强, 刘占君等主编. 禽流感监测技术. 养禽场禽病检验手册[M]. 北京: 中国农业大学出版社. 2005.

[7] 周锦萍, 刘佩红第. 重组禽流感病毒灭活疫苗(H5N1亚型，Re-1株)免疫鸡抗体消长规律及免疫程序的初步研究[J]. 中国兽药杂志, 2007, 03:5-7.

[8] 吴庭才等. 禽流感母源抗体消长规律和免疫保护抗体临界值的测定[J]. 洛阳农业高等专科学校学报, 2002, 4: 10-12.

[9] 臧协峰, 金明兰等. 雏鸡禽流感母源抗体的消长规律监测[J]. 吉林畜牧兽医, 2008,12:18-19.

（2012–11–22）

S858.31

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1007-1733(2013)01-0014-02