新疆部分规模化猪场猪病毒性腹泻流行病学调查与防控

王 元，杜久斌，范红燕，贺 笋，刘宏杰*,苏晓月，沈亚安，张会萍

（1.新疆天康食品养殖事业部技术中心，新疆 昌吉 831100；2.巴音郭楞职业技术学院，新疆 库尔勒 841000；3.玛纳斯县兰州湾兽医站，新疆 玛纳斯 832201）

猪病毒性腹泻是由病毒引起的急性消化道传染病，该病主要由猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）、猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪轮状病毒(RV)等单一或混合感染[1-2]。目前，有报道称库伯病毒(Kubovirus)也可感染导致类似临床症状[3-4]。2011 年11 月—2012 年12 月，新疆部分规模化猪场10 日龄以内仔猪发生以急性腹泻为主要病症的传染病,传播迅速,发病率高，造成了较严重的经济损失。为查明发生该病的流行情况，并制定快速、有效的防控措施控制疫情，我们对新疆部分规模化猪场进行了该病的流行病学和病原学调查。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 调查猪场

新疆南疆 4 个发病猪场，北疆 6 个发病猪场。

1.1.2 病料采集与处理

共采集259 份肠及内容物和粪便样品。取1 mL 小肠研磨上清液或腹泻粪便上清液样品置1.5 mL 离心管中，8 000 r/min 离 心2 min , 吸 取 上 清 放置-20 ℃保存。

1.1.3 引物

根据GeneBank 上公布的TGEV、PEDV、RV、 Kubovirus 序 列， 应 用Primer5.0 软件设计了4 对特异性引物，其目的基因分别为548 bp 、1 592 bp、314 bp、967 bp，均由上海生工生物工程有限公司合成。

1.1.4 试剂

Totoal RNA 提取盒购自大连宝生物Mini Viral RNA/DNA Extraction Kit，Taq 酶、dNTP Mixture、AMV逆转录酶、RNase Inhibitor 及DNA 标准DL 2000 购自宝生物(大连)工程有限公司。

1.2 方法

1.2.1 流行病学调查

对调查猪场的猪病毒性腹泻流行情况进行了现场调查,临床病例检查及病理剖检。

1.2.2 实验室检测

10 家调查猪场送检的259 份临床病料分别进行了TGEV、 PEDV、RV、 Kubovirus 的RT-PCR 检测。

1.2.3 动物试验

取6 头未吃初乳仔猪，试验组4 头口服4 mL 病料上清液，对照组2 头口服生理盐水。观察仔猪的临床症状，连续观察3 d。

2 结果

2.1 猪病毒性腹泻流行病学调查

本病主要发生于规模化猪场，无明显季节性，发病猪多为10 日龄以内，表现呕吐、水样腹泻、病程持续1～3 d，发病猪最终严重脱水死亡（见图1）。剖检症状为胃内积聚大量白色乳糜，小肠肠壁变薄、充血，其他脏器未发现明显病理变化（见图2）。

图1 仔猪呕吐、腹泻物

图2 肠绒毛脱落，肠壁变薄，肠出血

2.2 实验室检测结果

RT-PCR检测259份临床病料，检出PEDV 阳性163 份，Kubovirus 阳性97 份，PEDV 、Kubovirus 混 合 感染96 份。

2.3 动物试验

攻毒后24 h 出现腹泻、呕吐等典型临床症状，持续48～72 h 后4 头试验仔猪全部脱水死亡，2 头对照仔猪均未出现上述症状。

3 讨论

通过对南北疆10 家规模化猪场流行病学调查、临床症状观察以及临床病理剖检，初步诊断发病猪是病毒性腹泻。后经实验室对病料的检测，送检的259份临床病料中有163 份PEDV 阳性，17份Kubovirus 阳性；TGEV 、RV 均为阴性。PEDV 阳性场有6 个，Kubo 病毒阳性场2 个。结果表明，此次引起新疆部分规模化猪场10 日龄以内仔猪腹泻脱水死亡的主要致病因是PEDV 和Kubovirus,未检出TGE、RV。

在免疫程序的调查中，发现受调查猪场均免疫了传染性胃肠炎和流行性腹泻二联灭活苗，但对此次病毒性腹泻感染几乎不能有效预防。分析原因，主要有：1）通过实验室检测已经证实主要由PEDV 和Kubovirus 混合感染引起发病，而商品化疫苗不能保护Kubovirus的感染；2）已有国内文献报道[5]称我国PEDV 发生了变异，与商品疫苗中传统PEDV 毒株存在抗原差异，不能保护目前流行毒株，因此造成该病的暴发。

通过对发病全过程的跟踪调查，此次腹泻疫情呈阶段性流行，一波流行结束2～3 个月后又会暴发，呈持续流行。原因有：1）规模化猪场不断产仔，病毒持续感染，造成了腹泻的持续流行。2）发过病的基础母猪经过一个生产周期或一段时间（主要取决于场内腹泻病毒载量），自然感染产生的抗体会慢慢降低，当不能抵抗腹泻病毒的感染时，新一轮的腹泻又开始流行。

综上所述，提出以下防控措施：1）对发病场的产房进行封闭隔离管理；未发病猪场要严格执行生物安全制度，并控制人员和运输车辆的随意进出[6]。2）加强饲养管理，控制圈舍温度和保持圈舍卫生和干燥，不给病毒创造利于生存和繁殖的条件；3）有条件的规模猪场可免疫灭活自家苗，使哺乳母猪的腹泻病毒抗体能够保护至仔猪断奶；4）对发病仔猪进行补液盐口服，并预防继发大肠杆菌感染引起细菌性腹泻；5）避免给母猪饲喂发霉饲料，防止霉菌毒素中毒；6）彻底清洗、消毒空圈舍，并留一定的时间使圈舍彻底干燥；7）母猪上产床前进行适当的清洗，尤其蹄部粪便要清洗干净。

[1] 林初文,庄金秋,谢印乾.我国主要猪病毒性腹泻疾病的特点及其防治对策[J].中国畜牧兽医,2007,34(5):121-123.

[2] 和平，田建云，周宏生，等.猪病毒性腹泻病的防治措施[J].云南畜牧兽医,2007(4):9-10.

[3] 沈素芳,汤赛冬,孙泉云.猪Kobu 病毒感染概况[J].动物医学进展, 2012,33(1)：115-116.

[4] 杨德全，葛菲菲，鞠厚斌. 嵴病毒(Kobuvirus)研究进展[J].中国预防兽医学报，2012(12): 1006-1009.

[5] 刘孝珍,陈建飞,时洪艳,等.2011 年猪流行性腹泻病毒的遗传变异分析[J]. 中国预防兽医学报 2012，34(3)：180-183.

[6] 卫秀余.关于“猪流行性腹泻”的一些认识误区[J].猪业科学 2012，(4)：132.