黄芪多糖对Hhcy大鼠心肌缺血再灌注过氧化的影响

孙 倩，刘晓舒，杨 鑫，马越娇，韩 健，宋光熠 (辽宁卫生职业技术学院，辽宁 沈阳 110101)

高同型半胱氨酸血症(Hhcy)是引发动脉粥样硬化及心脑血管疾病的病因之一。为寻找有效的防治药物，同时探讨相关药物的防治机制，应用腹腔注射2%L－半胱氨酸5 ml/kg复制Hhcy大鼠模型，在此基础上观察黄芪多糖对Hhcy大鼠心肌缺血再灌注的防治作用。现将部分结果报告如下。

1 资料与方法

1.1 材料:①动物及饲料:8周龄(体重190～210 g)SD(Sprague Dawley)大鼠(辽宁长生生物技术有限公司)。实验动物许可证为辽宁省科学技术厅签发，许可证号:SCXK(辽)2010－0001。饲料为繁育鼠全价固体颗粒饲料(辽宁长生生物技术有限公司)。②药品及试剂:L－半胱氨酸(美国Sigma公司)。CK、LDH、Tn－ Ⅰ、Hcy、CAT、SOD、MDA 测定试剂盒(南京建成生物工程研究所)。黄芪多糖(成都龙泉高科天然药业有限公司)。③主要仪器:RM6240多道生理信号采集系统(成都仪器厂);UV－265FW紫外分光光度计(日本光电工业株式会社);ALC－V动物呼吸机(上海奥尔科特生物技术有限公司);318C酶标仪(上海三科仪器有限公司)。

1.2 方法:取SD大鼠40只，随机分为4组，每组各10只，雌雄各半。空白对照组:每天腹腔注射生理盐水5 ml/kg;正常对照组:每天腹腔注射生理盐水5 ml/kg;HHcy模型组:每天腹腔注射2%L－半胱氨酸5 ml/kg;黄芪多糖干预组:每天腹腔注射2%L－半胱氨酸5 ml/kg，灌胃给予10%黄芪多糖10 ml/kg。所有大鼠均饲以常规动物饲料和水。连续给药10周，10周后于末次给药30min后腹腔注射戊巴比妥钠(30 mg/kg)，麻醉后气管插管安装呼吸机，开胸结扎冠状动脉左室降支90min后松开结扎线再灌注90min。空白对照组开胸冠状动脉左室降支穿线不结扎，于180min后取血，其他组于再灌注90min后取血。各组标Ⅱ导联全程记录心电图，血浆按照测定试剂盒操作说明书测定Hcy、CK、LDH、Tn－Ⅰ、CAT、SOD、MDA、Hcy。

2 结果

2.1 心肌缺血再灌注心电图的变化:各组大鼠结扎冠状动脉左室降支90min后及松开结扎线再灌注90min后均表现为R波下降，ST段抬高并与T波融合为单项曲线，符合急性心肌梗死心电图特点。

2.2 血浆同型半胱氨酸的变化:SD大鼠腹腔注射2%L－半胱氨酸5 ml/kg 10周后，Hhcy模型组和黄芪多糖干预组大鼠血浆Hcy含量明显高于空白对照组或正常对照组(P＜0.01)。见表1。

2.3 心肌缺血再灌注CK、LDH、Tn－Ⅰ的变化:Hhcy模型组大鼠血浆CK、LDH、Tn－Ⅰ含量明显高于正常对照组(P＜0.01)。黄芪多糖干预组大鼠血浆CK、LDH、Tn－Ⅰ明显低于Hhcy模型组(P＜0.01)。见表1。

2.4 心肌缺血再灌注CAT、SOD、MDA的变化:Hhcy模型组大鼠血浆MDA含量明显高于正常对照组(P＜0.01);CAT、SOD活性明显低于正常对照组(P＜0.01)。黄芪多糖干预组大鼠血浆MDA含量明显低于Hhcy模型组(P＜0.01)，CAT、SOD活性明显高于Hhcy模型组。见表2。

表1 心肌缺血再灌注血浆hcy、CK、LDH、Tn－Ⅰ变化(n=10，)

表1 心肌缺血再灌注血浆hcy、CK、LDH、Tn－Ⅰ变化(n=10，)

组别Hcy(μmol/L)CK(U/ml)LDH(U/ml)Tn－Ⅰ(Pg/ml)5.26±0.611.27±0.495.59±0.44 102.8±28.2正常对照组 4.93±0.514.14±0.368.24±0.22 191.1±12.4 Hhcy模型组 19.88±5.035.78±0.6510.61±1.91220.4±18.4黄芪多糖组空白对照组8.56±5.051.67±0.526.71±0.89 179.2±13.0

表2 心肌缺血再灌注血浆CAT、SOD、MDA变化(n=10，)

表2 心肌缺血再灌注血浆CAT、SOD、MDA变化(n=10，)

组别 MDA(nmol/ml) CAT(U/ml) SOD(U/ml)4.99±1.01 22.36±1.74 132.79±14.79正常对照组 8.05±1.59 10.37±1.31 101.24±15.06 Hhcy模型组 12.60±2.12 5.70±1.71 65.49±8.68黄芪多糖组空白对照组8.88±1.26 17.51±2.90 94.54±14.61

3 讨论

黄芪(Leguminosae)为豆科草本植物蒙古黄芪、膜荚黄芪的根，具有补气固表、利水退肿、托毒排脓、生肌等功效。现代研究证实黄芪含皂甙、蔗糖、多糖、多种氨基酸、叶酸及硒、锌、铜等多种微量元素。大量的实验表明黄芪有强心及心肌保护作用，其对心肌缺血缺氧、感染病毒以及药物中毒的心肌均有明显的保护作用[1]，对血压具有双相调节作用[2，3]，能缓解动脉粥样硬化[4，5]。

本实验结果表明，Hhcy可加重心肌缺血再灌注损伤，黄芪多糖可缓解这一损伤，体现在心肌损伤或坏死所释放的CK、LDH、Tn－Ⅰ的减少。其机制与提高CAT、SOD活性的抗过氧化作用密切相关。

[1]刘 洋，华树东，贺永贵，等.黄芪对心房收缩力及心房钠尿肽分泌的影响[J].中国中药杂志，2008，33(19):2226.

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[4]张小卫，余 静，常 鹏，等.黄芪注射液对高血压病患者炎症介质的影响[J].兰州大学学报(医学版)，2007，33(4):47.

[5]刘冠男，陈国权，赵 明，等.黄芪总黄酮对病毒性心肌炎小鼠心脏血流动力学及心肌细胞钙电流的作用[J].中国心血管杂志，2008，13(6):431.