芪桂消癥颗粒抗炎镇痛作用的实验研究*

谢 萍 冯 俭 许 宁 张煜华 张梦云 孙 川 秦银花 杨张婧 米培榕 唐佳佳

（1.成都中医药大学附属医院，四川 成都 610072；2.成都中医药大学，四川 成都 610075）

芪桂消癥颗粒具有益气化瘀，活血消癥的功效，主治子宫肌瘤自凝刀术后神疲乏力、腰腹痛、发热、阴道排液、或尿频尿急等症。本研究拟通过芪桂消癥颗粒对多种炎症和致痛动物模型的影响，探讨该方的药理作用，为临床疗效提供实验依据。

1 材 料

1.1 药物 芪桂消癥颗粒，中药原液由成都中医药大学试剂科提供，实验前用蒸馏水配制。戊巴比妥钠，上海西塘试剂公司（进口分装），每瓶25 g，批号20080608。桂枝茯苓胶囊，江苏康缘药业股份有限公司，批号：20080101。消炎痛，山西临汾云鹏药业有限公司生产，批号：14020771。

1.2 动物 昆明种小鼠，雄性，体质量18～22 g；SD 大鼠，雄性，体质量150～180 g。由成都中医药大学实验动物中心提供，一级动物，合格证：SCXK（川）2009-11。

1.3 试剂与仪器 二甲苯，分析纯，每瓶500 mL，上海化学试剂总厂，批号0040126。T-1000 型电子天平，d=0.1 g，美国双杰兄弟（集团）有限公司。Sartorius 电子分析平，d=0.1～0.01 mg，西德。

1.4 统计学处理 应用SPSS15.0 统计软件。计量资料以表示，组间差异用完全随机设计资料的多个样本均数比较的单因素方差分析进行、非参数检验，以上数据资料分析均由统计软件包完成。P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 方法与结果

本实验方法参考文献［1-2］进行。

2.1 对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响 取体质量18～22 g 雄性昆明小鼠60 只，随机分6 组，每组10 只，各组均灌胃给药，给药剂量按表1 所示，给药容积按0.2 mL/10 g 计算，模型组给予等体积0.9%氯化钠注射液，每日1次，连续3 d。末次给药后30 min 在小鼠右耳廓两面用微量进样器均匀涂抹100%二甲苯0.02 mL/只致炎，左耳不涂为空白对照，致炎30 min 后，颈椎脱臼处死小鼠，沿耳廓基线取下两耳，用直径8 mm 打孔器分别在两耳同一部位取下圆耳片，置电子天平上分别称重，以左右耳片重量差值表示肿胀度。计算鼠耳肿胀度和耳肿胀抑制率。耳肿胀度=右耳片（致炎侧）质量-左耳片（对照侧）质量。耳肿胀抑制率=（模型组耳肿胀度―药物组耳肿胀度）／模型组耳肿胀度×100%。结果见表1。

表1 芪桂消癥颗粒对二甲苯诱导小鼠耳肿胀的影响（±s）

表1 芪桂消癥颗粒对二甲苯诱导小鼠耳肿胀的影响（±s）

与同期模型组比较，*P＜0.05，**P＜0.01。下同。

2.2 对蛋清致大鼠足肿胀的影响 取体质量150～180 g 雄性SD 大鼠60 只，随机分6 组，每组10 只，每鼠右后足跖关节处正面上端用笔作一清晰横线标记，用排水法足容积测定装置测量各组大鼠右足跖关节下相同位置致炎前的体积。之后各组均灌胃给药，给药剂量按表2 所示，给药容积按1 mL/100 g 计算，模型组给予等体积0.9%氯化钠注射液，每日1次，连续3 d。末次药后30 min，无菌条件下每鼠右后足跖固定位置皮下注入0.1 mL（100%）蛋清，并分别于致炎后0.5～3 h同法测定容积，按下列公式计算足肿胀率。足肿胀增加百分率（%）=（致炎后右后足容积―致炎前右后足容积）／致炎前右后足容积×100%。结果见表2。

表2 芪桂消癥颗粒对蛋清致大鼠足爪肿胀的影响（±s）

表2 芪桂消癥颗粒对蛋清致大鼠足爪肿胀的影响（±s）

2.3 对塑料环诱导大鼠肉芽组织增生的影响 取体质量150～180 g，雄性SD 大鼠60 只，随机分6 组，每组10 只，腹腔注射2%戊巴比妥钠30 mg/kg 浅麻醉，无菌操作将已称重的塑料环（75%酒精浸泡24 h 消毒干燥）植入大鼠左右前肢腋部皮下。次日灌胃给药，给药剂量按表3 所示，给药容积按1 mL/100 g 计算，模型组给予同等体积0.9%氯化钠注射液，连续7 d。第8日颈椎脱臼致死，仔细剥离包有肉芽组织的塑料环，置于电子天平上称重，减去原塑料环质量，即为肉芽肿净重，肉芽肿净重用mg/100 g 体质量表示，进行组间比较，并计算肉芽肿抑制率。肉芽肿抑制率=（模型组肉芽肿净重―药物组肉芽肿净重）／模型组肉芽肿净重×100%。结果见表3。

2.4 对热板致痛的影响 选择体质量18～22 g 雌性昆明小鼠一批，按照文献方法首先测定给药前的基础痛觉反应潜伏期，将小鼠放在（55±0.5）℃热板上，记录自放入热板至舔后足的时间，共测2次，每次间隔5 min，取其均值作为该鼠的基础痛觉反应潜伏期（若小鼠置热板上60 s 仍未出现舔后足反应，迅速取出，痛觉反应的潜伏期按60 s 计算）。筛选痛觉反应潜伏期在5～30 s的60 只，随机分为6 组，每组10 只。各组均灌胃给药，给药剂量按表4 所示，给药容积按0.2 mL/10 g计算，模型对照组给予同等体积0.9%氯化钠注射液连续3 d。末次给药后0.5、1、1.5、2 h 测定各组小鼠痛觉反应潜伏期，并计算各组小鼠痛阈提高率。结果见表4。

表3 芪桂消癥颗粒对塑料环诱导大鼠肉芽组织增生的影响（±s）

表3 芪桂消癥颗粒对塑料环诱导大鼠肉芽组织增生的影响（±s）

表4 芪桂消癥颗粒对蛋清致大鼠足爪肿胀的影响（±s）

表4 芪桂消癥颗粒对蛋清致大鼠足爪肿胀的影响（±s）

痛阈提高率=（给药后痛觉反应潜伏期―基础痛觉反应潜伏期）／基础痛觉反应潜伏期×100%

2.5 扭体法 选择18～22 g 昆明种小鼠60 只，随机分为6 组，每组10 只，各组均灌胃给药，给药剂量按表5所示，给药容积按0.2 mL/10g 计算，模型对照组给予同等体积0.9%氯化钠注射液连续3 d。末次给药后30 min腹腔注射新鲜配制的0.7%醋酸溶液0.1 mL/10 g，观察并记录小鼠的扭体潜伏期和20 min 内扭体反应（腹部内凹，后肢伸展，臀部抬高）的次数，并计算各组的扭体抑制率。结果见表5。扭体抑制率=（模型组扭体次数―药物组扭体次数）／模型组扭体次数×100%

表5 芪桂消癥颗粒对醋酸致小鼠扭体反应的影响（±s）

表5 芪桂消癥颗粒对醋酸致小鼠扭体反应的影响（±s）

3 讨论

手术为侵入性治疗，耗伤正气，损伤胞宫血络，致瘀血内停而为病，因此气虚血瘀为子宫肌瘤自凝刀术后诸多并发症主要病机。基于这一病机，根据补消结合的原则，采用益气扶正，祛瘀散结的方法，精选良方芪桂消癥颗粒。方中黄芪益气扶正；血竭、水蛭活血化瘀；“血非温不行”，桂枝温经通脉，利脉道助血行。诸药合用攻补兼施，切合病机。

从动物实验结果可见，芪桂消癥颗粒对二甲苯所致的小鼠耳肿胀、对蛋清所致的大鼠足肿胀均有明显的抑制作用，说明对炎症早期水肿渗出有明显的抑制作用；而抑制塑料环所致的大鼠肉芽增生，说明对炎症晚期的纤维结缔组织增生也有抑制作用。对热板刺激和醋酸引起的疼痛有良好的抑制作用。这些研究为芪桂消癥颗粒治疗子宫肌瘤自凝刀术后诸多并发症提供了相关的药效学依据，但其作用机制还有待进一步研究。

［1］徐叔云，卞如濂，陈修.药理实验方法学［M］.3 版.北京：人民卫生出版社，2001：911.

［2］陈奇，邓文龙，张世玮，等.中药药理研究方法学［M］.北京：人民卫生出版社，1993：363.