DC-CIK 过继细胞免疫联合消癌平注射液治疗老年晚期非小细胞肺癌疗效观察

肖 艳，肖振君

（1.山西省肿瘤医院，山西 太原 030013；2.山西省中医院，山西 太原 030012）

肺癌是目前世界上发病率和死亡率增长最快，对人群健康和生命威胁最大的恶性肿瘤之一。有研究报道，近年来肺癌的发病率和死亡率均明显增高，而且男性肺癌发病率和死亡率均占所有恶性肿瘤的第1 位。肺癌的病因至今尚不完全明确，有的研究证明，长期大量吸烟与肺癌的发生有非常密切的关系，长期大量吸烟者患肺癌的概率是不吸烟者的10～20倍，而且吸烟开始的年龄越小，患肺癌的概率越高。在我国，随着社会老龄化，在肺癌的发病群体中，每年约有30%70 岁以上的老人诊断为肺癌［1］，而老年患者体质弱，内科基础疾病多，多合并重要脏器功能衰退，且免疫功能低下，不能耐受手术、放化疗这些传统治疗方案，因此需要给予中药抗肿瘤治疗及最佳支持治疗。消癌平注射液为乌骨藤提取物，是临床常用的中药抗肿瘤药物，经临床研究证实疗效确切。近年来DC-CIK 细胞疗法经过很多临床研究被证实为新一代抗肿瘤过继细胞免疫治疗的首选方案。经临床筛选，我们在部分老年晚期非小细胞肺癌患者中选择DC-CIK 过继细胞免疫联合消癌平注射液抗肿瘤治疗，以期起到更好的疗效，现总结报道如下。

1 临床资料

82 例病例均为我院近年来经病理组织学或细胞学检查确诊为晚期非小细胞肺癌（NSCLC）患者，随机分为两组。对照组40 例，其中男21 例，女19例；年龄66 岁～80 岁，中位年龄71.3 岁；病理类型：腺癌26 例，鳞癌11 例，腺鳞癌3 例；临床分期：ⅢB期25 例，Ⅳ期15 例；脑转移5 例，骨转移4 例，恶性胸腔积液3 例，肺转移3 例；KPS 评分：60 分12 例，70 分23 例，80 分以上5 例。治疗组42 例，其中男24 例，女18 例；年龄65 岁～84 岁，中位年龄73.5岁；病理类型：腺癌30 例，鳞癌10 例，腺鳞癌2 例；临床分期：ⅢB 期29 例，Ⅳ期13 例；脑转移2 例，骨转移4 例，恶性胸腔积液5 例；KPS 评分：60 分15例，70 分23 例，80 分以上4 例。两组病例在性别、年龄、临床分期等方面经统计学分析差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。所有病例均为初次治疗，血常规及肝肾功能检查正常，无严重心脏病，预计生存期>3 个月。

2 治疗方法

两组病例均给予消癌平注射液（南京圣和药业公司，国药准字Z20025868，20mL/支）60 mL 加入5%葡萄糖液500 mL 中静脉滴注，1 次/d，共治疗14 d。治疗组在上述治疗同时联合DC-CIK 过继细胞免疫治疗。①DC-CIK 细胞制备及质控：血液成分用COBE Spectra 血液成分分离机（美国Gambro BCT公司）采集单个核细胞，数量约1×108～3×108，加30 mLGT-T551 培养液［宝日医生物技术（北京）有限公司］，CO2培养箱孵育2 h，将悬浮细胞移出（用作CIK 诱导），向培养瓶中加入含1 000 U/mL 的注射用重组人粒细胞巨噬细胞刺激因子（GM-CSF，厦门特宝生物工程股份有限公司）和1 000 U/mL 的白细胞介素-4（IL-4，Peprotech 公司）诱导DC，每3 d 换液1 次并补充相关细胞因子，第6 天加入相关细胞因子的同时加入注射用重组人干扰素-γ（IFN-γ，上海凯茂生物医药有限公司），诱导DC 成熟；悬浮细胞置于GT-T601 培养袋中，加入含有1 000 U/mL IFN-γ的GT-T551 培养基培养，24 h 后加入50 ng/mLCD3单克隆抗体（古巴分子免疫学中心生产）和1 000 U/mL 的重组人白介素-2 注射液（rhIL-2，北京四环生物制药有限公司），每隔3 d 换液1 次，补充rhIL-2；第7 天收获成熟DC 并与CIK 细胞共培养7 d～8 d，收获细胞回输。细胞质量控制：收获后细胞数量应达到1×1010以上；台盼蓝染色检测细胞活力应在80%以上；采用流式细胞学方法对采集物和培养物细胞免疫表型检测；进行细菌、真菌、支原体和内毒素检测，无菌试验。②DC-CIK 细胞回输：将制备好的CIK 细胞溶于含5×105U IL-2、0.5%人血白蛋白的0.9%NaCl 溶液中回输入患者体内，每次回输CIK 细胞数应在为1.0×1010以上，30 d 为1 个周期，2 周期后评价疗效，每位患者治疗不少于2 周期。两组病例分别于治疗前及治疗2 w 后分别检测NK、NKT 细胞以及T 细胞亚群及按照WHO 抗癌药物急性及亚急性毒性反应标准评价毒性反应，分为0～Ⅳ度。研究数据符合正态分布均以均数±标准差（±s）表示，以独立样本t 检验进行分析；同组治疗前后数据以配对t检验进行分析，率的比较采用χ2检验；P＜0.05 为差异有统计学意义。

3 结果

3.1 疗效标准

3.1.1 近期疗效评定 按照WHO 1981 年制定的实体瘤统一评价标准，疗效分为完全缓解（CR），部分缓解（PR），稳定（SD），进展（PD），有效率（RR）为CR+PR 之和占治疗观察例数的百分比。

3.1.2 生活质量评定标准 依据KPS 评分［2］，治疗前后计分增加≥10 分为提高，降低≥10 分为下降，变化在10 分以内为稳定。

3.1.3 体重变化 参照抗肿瘤药物常见毒性分级标准［3］，除外体腔积液、浮肿等因素引起的体重变化。好转：体重增加>2 kg，并维持4 w 以上；稳定：体重增加或减少<2 kg；恶化：体重减少>2 kg，持续4 w以上。

3.2 疗效观察

3.2.1 两组病例治疗后近期疗效比较 结果见表1。

表1 两组病例治疗后近期疗效比较 （例）

由表1 可以看出，对照组治疗后近期疗效有效率为35.0%，治疗组治疗后近期疗效有效率为52.4%，两组病例治疗后近期疗效比较差异有统计学意义（P＜0.05）。

3.2.2 两组病例治疗后生活质量比较 结果见表2。

表2 两组病例治疗后生活质量比较 ［例（%）］

3.2.3 体重变化 治疗组体重增加者14 例，稳定者18 例，体重减少者10 例；对照组体重增加者12 例，稳定者17 例，减少者11 例。两组病例治疗后体重变化比较差异无统计学意义（P>0.05）。

3.2.4 两组及两组治疗前后NK 细胞、T 细胞亚群变化 治疗组治疗后NK、NKT 及CD3+、CD8+T 细胞比例明显高于治疗前（P<0.05）；治疗组治疗后较对照组治疗后NK、NKT 及CD3+、CD8+T 细胞比例明显增高。结果见表3。

4 讨论

肺癌是严重威胁人类生命的恶性肿瘤之一，是全世界目前发病率和死亡率最高的癌症。其中非小细胞肺癌约占80%，5 年生存率仅为15%，预后较差。肺癌的临床表现比较复杂，症状和体征的有无、轻重以及出现的早晚，取决于肿瘤发生部位、病理类型、有无转移及有无并发症，以及患者的反应程度和耐受性的差异。肺癌早期症状常较轻微，甚至可无任何不适。中央型肺癌症状出现早且重，周围型肺癌症状出现晚且较轻，甚至无症状，常在体检时被发现。姑息性化疗是晚期非小细胞肺癌的常用治疗手段，但化疗药物对肿瘤细胞的选择性不高，在杀灭肿瘤细胞的同时，抑制了机体免疫功能，而且全身用药毒副作用较大，最常见得有恶心、呕吐、食欲不振、骨髓抑制等毒副反应，这些因素使很多老年及一般状况较差的患者不能耐受而终止化疗。因此，近年来提高患者生活质量、延长患者带瘤生存期已成为中晚期肺癌临床治疗和研究的独立评价指标和治疗目的［4］。在此背景下，寻求一种对于晚期肺癌患者可行的、有效的治疗手段尤为重要。

表3 两组病例外周血T 细胞亚群的变化比较 （%，±s）

表3 两组病例外周血T 细胞亚群的变化比较 （%，±s）

注：与本组治疗前比较，1）P＜0.05；与对照组治疗后比较，2）P＜0.05

过继性细胞免疫治疗（ACI）主要有树突状细胞（DC），细胞因子诱导的杀伤细胞（CIK）及细胞毒T淋巴细胞（CTL）等，是通过注射免疫活性细胞激发或调动机体的免疫系统，增强肿瘤微环境的抗肿瘤免疫力，从而控制和杀伤肿瘤细胞。DC 细胞是目前已知功能最强的专职抗原提呈细胞，成熟DC 细胞可有效的诱导抗原特异性T 细胞增殖和活化，激活NK 及自然杀伤T 细胞（NKT）。CIK 细胞是在多种细胞因子的刺激下，兼具T 淋巴细胞强大的抗瘤活性和自然杀伤（NK）细胞的广谱的杀瘤优点，被认为是新一代肿瘤过继性细胞免疫治疗的首选方案［5-8］。

消癌平为中药乌骨藤的精提取物。现代植化分析认为，其主要成分为多糖、皂苷和生物碱［9］，有抗炎、平喘、利尿等作用。晚期肺癌患者可出现咳嗽、气喘、消瘦、浮肿等症状，威胁到患者的生活质量。消癌平注射液可以一定程度上缓解晚期肺癌的症状。近年来的临床研究也表明，消癌平注射液单独给药或与其他疗法并用，都显示出明显的抗肿瘤效果。据报道用消癌平注射液单药治疗晚期肺癌，临床获益率达77.8%，有效率17.6%，均明显高于对照组［10］。

在临床工作中，我们对晚期非小细胞肺癌患者病情进行综合评估后选择个体化治疗方案，本文总结了82 例用DC-CIK 过继性细胞免疫治疗联合消癌平和单纯用消癌平患者的病例资料，统计结果提示，生物治疗联合消癌平对老年肺癌晚期患者提高治疗有效率、改善生活质量及调节患者细胞免疫方面有较大优势。在临床工作中我们会进一步研究和总结，以放化疗为基础，不断认识并利用过继性细胞免疫治疗作为肿瘤内科重要治疗手段的优越性，吸取中医药的精髓，为肿瘤患者寻求更佳的治疗方案。

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