啤酒花对朱砂莲所致马兜铃酸肾病的拮抗作用

庞俊伟

（山西中医学院，山西 太原 030024）

朱砂莲辛、寒，味苦，为马兜铃科马兜铃属植物朱砂莲的根茎，具有清热解毒、消肿止痛之功效［1］。朱砂莲中含有毒性成分是马兜铃酸，可以引起肾功能损伤。马兜铃酸引起的肾脏损伤主要是由于引起肾小管-间质的损伤导致溶菌酶（LYS）、血肌肝（Scr）、β2-微球蛋白（β2-MG）含量明显增高。啤酒花性平，味苦，为荨麻目大麻科葎草属植物啤酒花的花序，具有能健胃消食、利尿安神之功效。《食物中药与便方》中记载饮用啤酒花球果泡制成的茶汁能辅助治疗肾脏疾病［2］。本研究通过中医理论指导下的方药配伍减毒方法，测定尿中极微量的蛋白和酶的变化，观察朱砂莲与啤酒花不同配比对马兜铃酸肾毒性的拮抗作用，以探讨其药理作用机制。

1 材料与方法

1.1 实验材料

1.1.1 实验动物 近交系SD 大鼠，雌雄各半，170 g～230 g，由中国中医科学院实验动物研究所提供，合格证号：SCXK（京）2011-0002。饲养环境通风良好，饲养温度25 ℃～28 ℃，湿度为70%，自由饮水、进食。

1.1.2 药物与试剂 朱砂莲购自新疆阿合奇县人民医院药剂科，由山西药科职业技术学院通过薄层鉴别和性状鉴别确认系马兜铃科植物朱砂莲，啤酒花购自新疆阿合奇县人民医院药剂科，经鉴定为正品。血清肌酐测定试剂盒（上海生物制品研究所提供，批号：20120423），β2-微球蛋白（宁波瑞源生物科技有限公司提供，批号：20120711），碱性磷酸酶（郑州兰森生物技术有限公司提供，批号：20120206），溶菌酶（上海西唐生物科技有限公司提供，批号：20120522）。

1.1.3 实验仪器 MS4002SDR 精密天平（梅特勒-托利多仪器公司生产），TDL-5-A 离心机（深圳市三利化学仪器生产），7170A 型全自动生化分析仪（日本Hitachi 公司）。

1.2 实验方法

1.2.1 朱砂莲药液制备 朱砂莲加冷水浸泡30 min，初用强火加热煮沸，沸后用小火保持30 min，过滤，药渣复煎，合并滤液，60 ℃～100 ℃水浴浓缩至1 g/mL，120 ℃湿热灭菌后装瓶冷藏备用，使用前适当加热。

1.2.2 朱砂莲配伍啤酒花药液制备 制备方法同朱砂莲药液的制备，二者按照如下比例配伍后煎熬浓缩至1 g/mL，120 ℃湿热灭菌后装瓶冷藏备用，使用前适当加热。干啤酒花与朱砂莲：高剂量为10∶1，中剂量为5∶1，低剂量为2∶1；鲜啤酒花与朱砂莲：高剂量为100∶1；中剂量为50∶1；低剂量为20∶1。

1.2.3 分组及给药 SD 大鼠适应性饲养（实验室）1 w 后，按照体重、雌雄各半随机分为朱砂莲高剂量组（A 组）、朱砂莲中剂量组（B 组）、朱砂莲低剂量组（C组）、干啤酒花配朱砂莲高剂量组（D 组）、干啤酒花配朱砂莲中剂量组（E 组）、干啤酒花配朱砂莲低剂量组（F 组）、鲜啤酒花配朱砂莲高剂量组（G 组）、鲜啤酒花配朱砂莲中剂量组（H 组）、鲜啤酒花配朱砂莲低剂量组（I 组）、空白组（J 组）10 组，每组12 只。各组均精饲料喂养、自由饮水。根据现在药物的一般用量，以古人用量的1/3 作为现在成人的常用剂量，并根据成人1 d 用量按大鼠的体重体表面积换算所得剂量，A、B、C 组分别按10 g/（kg·d）、5 g/（kg·d）、1 g/（kg·d）给药，其余各组均按照10 g/（kg·d）给药，每天灌胃1 次，每次5 mL，连续60 d。空白组以等量生理盐水灌胃。

1.2.4 标本采集与指标测定 实验开始时对各组大鼠称重，并定期称定体重。60 d 后，以上10 组大鼠均在空腹时用代谢笼称重。取尿液，股动脉取血后处死，留取标本作血尿检测。碱性磷酸酶（AKP）、血肌酐（SCr）、溶菌酶（LYS）、β2微球蛋白（β2-MG）的测定依照试剂盒说明进行。

1.3 统计学方法

结果采用SPSS17.0 统计软件分析，数据采用均数±标准差（±s）来表示，组间差异采用方差分析检验，若P<0.05 则认为差异具有统计学意义。

2 结果

与朱砂莲高剂量组比较，其余各组大鼠体重明显升高（P<0.05），AKP 含量明显降低，LSY 和β2-MG 含量均有不同程度的降低（P<0.05），除鲜啤酒花配朱砂莲中剂量组升高外其余各组均有不同程度的降低。与空白组比较，朱砂莲高剂量组、朱砂莲中剂量组Scr、β2-MG 含量显著升高，LYS 含量虽然升高，但差异无统计学意义。然而朱砂莲低剂量组与空白组Scr、β2-MG、LYS 含量比较差异无统计学意义。说明朱砂莲中高剂量组能引起大鼠肾脏损伤。经配伍啤酒花后，干啤酒花配伍朱砂莲各剂量组AKP、Scr、β2-MG、LYS 含量与朱砂莲高剂量组比较均明显下降。鲜啤酒花配伍朱砂莲各剂量组与朱砂莲高剂量组比较AKP 含量明显下降。而鲜啤酒花配伍朱砂莲高、低剂量组Scr 含量较朱砂莲高剂量组有所降低，鲜啤酒花配伍朱砂莲中剂量组Scr 含量较朱砂莲高剂量组有所升高，但差异比较无统计学意义；鲜啤酒花配伍朱砂莲各剂量组与朱砂莲高剂量组LSY 含量比较有所下降，但差异无统计学意义；鲜啤酒花配伍朱砂莲高、中剂量组与朱砂莲高剂量组β2-MG 含量比较明显下降（P<0.05），但鲜啤酒花配伍朱砂莲低剂量组与朱砂莲高剂量组β2-MG 含量比较有所下降，但差异无统计学意义。说明啤酒花在一定程度上可以缓解马兜铃酸肾病导致的津液代谢障碍，达到预防和延缓马兜铃酸肾病的发生以及减轻肾脏功能损害的作用。与鲜啤酒花配伍朱砂莲相应的各剂量组比较，干啤酒花配伍朱砂莲相对应的各剂量组AKP、Scr、β2-MG、LYS 含量均有不同程度的降低。说明干啤酒花在一定程度上能够减轻朱砂莲所致肾脏的毒性，而且效果优于鲜啤酒花。结果见表1。

表1 各组大鼠体重、生化指标比较 （±s）

表1 各组大鼠体重、生化指标比较 （±s）

注：与A 组比较，1）P<0.05；与G 组比较，2）P<0.05；与H 组比较，3）P<0.05；与I 组比较，4）P<0.05

3 讨论

中医学认为，津液在体内的代谢主要依靠肺、脾、肾三脏的功能。《素问经脉别篇》曰：“饮入于胃，游溢精气，上输于脾；脾气散精，上归于肺，通调水道，下输膀胱；水精四布，五经并行。”肺、脾、肾相互协调，共同维持人体水液的生成、输布与排泄，对于津液的清浊升降运动起着主导作用。肺的宣发肃降、脾的健运，肾的蒸腾气化之功能协调，则津液代谢正常，马兜铃酸就能及时排出体外，不在肾脏蓄积，对肾脏的损害，对马兜铃酸所致肾病具有一定的防治作用。

［1］谢宗万.全国中草药汇编（上、下册）［M］.北京：人民卫生出版社，1996：383-384.

［2］叶桔泉.食物中药与便方［M］.南京：江苏科学出版社，1971：118-119.