GC－MS分析桂枝茯苓胶囊及组方药材挥发油成分

2013-11-02王书云毛绘娟萧伟李国玉黄健王金辉

石河子大学学报（自然科学版） 2013年3期

王书云，毛绘娟，萧伟，李国玉，黄健，王金辉，

（1沈阳药科大学中药学院，沈阳110016；2江苏康缘药业股份有限公司，连云港222001；3石河子大学药学院，石河子832002）

桂枝茯苓胶囊源于东汉张仲景《金匮要略》古方桂枝茯苓丸的改进剂型，由桂枝、茯苓、丹皮、白芍和桃仁组成。该方以桂枝、茯苓为君药，桂枝温通血脉而运气血，茯苓利水消痰而益心脾，与桂枝相合，化瘀利水除瘕；桃仁破血化瘀，与桂枝相合，增化瘀结畅和气血；丹皮散血行瘀，与茯苓相合，散血利水，消痞除痰；芍药养血凉血，入络破血行瘀，与桂枝、桃仁、丹皮相合，化瘀消以生新，兼防攻伐太过伤新血；与茯苓相合，利水而不伤阴。诸药合用，达活血化瘀、消肿散结之功［1］。临床主要用于治疗子宫肌瘤［2］、子宫内膜异位［3］、慢性盆腔炎［4］、卵巢囊肿［5］、乳腺增生［6］、痛经［7］、输卵管妊娠［8］、药物流产后阴道出血［9］、不孕［10－11］等症，是治疗妇科疾病的首选良方。目前，对桂枝茯苓胶囊组方单味药材桂枝、茯苓、丹皮、白芍和桃仁的挥发油成分研究都有文献报道［12－16］。而桂枝茯苓胶囊制备工艺是取部分茯苓粉碎成细粉，丹皮提取挥发油，药渣与桂枝、白芍、桃仁及剩余茯苓乙醇提取两次，合并提取液浓缩，药渣再水煎两次，煎煮液浓缩后与醇浓缩液合并，再与茯苓细粉混匀，干燥，制粒，干燥，加入丹皮挥发油。为了比较桂枝茯苓胶囊和组方药材中挥发油成分的种类及含量变化，探讨桂枝茯苓胶囊提取后挥发油成分的变化关系，本文采用气相色谱－质谱联用法，分别对组方的5种药材单独提取的挥发油、按处方配伍的混合药材提取的挥发油和中成药制剂桂枝茯苓胶囊提取的挥发油成分进行分析。

1 材料与方法

1.1 仪器与材料

GCMS－QP5050A（JAPAN SHIMADZU）气相质谱联用仪，98－1－B型电子调温电热套（天津市泰斯特仪器有限公司），挥发油提取器。环己烷（天津市富宇精细化工有限公司），无水硫酸钠（天津市博迪化工有限公司），均为分析纯。桂枝、茯苓、丹皮、白芍、桃仁药材均由江苏康缘药业有限公司提供，桂枝茯苓胶囊，市售（批号：111022，江苏康缘药业有限公司）。

1.2 色谱条件

HP－5MS弹性石英毛细管柱（0.25mm×30m，0.25μm），进样口温度，程序升温：从70℃开始，保持3min，以10℃／min升温速度升至100℃，保持10min，再以以10℃／min升温速度升至280℃，保持5min，载气为 He气（99.99%），载气流速为1 mL／min，进样口温度为280℃，分流比为1∶30，进样量为1μL／0.2μL。

1.3 质谱条件

电子轰击离子源（EI），电子能量：70eV，接口温度：230℃，扫描范围：33～500，溶剂延迟：3min，NIST107标准质谱库。

1.4 挥发油提取

1.4.1桂枝茯苓胶囊挥发油提取取200粒桂枝茯苓胶囊去掉胶囊外壳置2000mL圆底烧瓶，加三级水1500mL，浸泡30min，参照2005年版《中国药典》［17］一部附录ⅩD挥发油测定乙法（用环己烷代替二甲苯），提取的挥发油用无水硫酸钠干燥，得挥发油0.7mL（含环己烷）。

1.4.2桂枝茯苓胶囊组方配伍混合药材挥发油提取按2005年版《中国药典》［17］成方制剂和单味制剂第559页《桂枝茯苓胶囊》处方比例（1∶1∶1∶1∶1）称取单味药材桂枝、茯苓、白芍、丹皮、桃仁各80g置2000mL圆底烧瓶，加三级水1500mL，浸泡30 min，参照2005年版《中国药典》［17］一部附录ⅩD挥发油测定乙法（用环己烷代替二甲苯），提得的挥发油用无水硫酸钠干燥，得挥发油1.6mL（含环己烷）。

1.4.3桂枝茯苓胶囊组方单味药材挥发油提取分别称取桂枝茯苓胶囊组方单味药材桂枝、茯苓、白芍、丹皮、桃仁各400g置2000mL圆底烧瓶，加三级水1500mL，浸泡30min，参照2005年版《中国药典》［17］一部附录ⅩD挥发油测定乙法（用环己烷代替二甲苯），提得的挥发油用无水硫酸钠干燥，分别得挥发油3.6、0.75、2.3、0.9、1.8mL（含环己烷）。

1.5 挥发油GC－MS测定

精密取上述挥发油1、0.2μL（注：由于挥发油中各成分含量差别悬殊，故分别选两种不同的进样量来测定含量不同的化学成分）注入GC－MS，分别在上述相同色谱条件下进行气相色谱－质谱联用分析。

2 结果

桂枝茯苓胶囊及组方单味药材和组方配伍混合药材挥发油成分分析结果见表1，挥发油总离子流图见图1。

表1 桂枝茯苓胶囊及组方单味药材和组方配伍混合药材挥发油主要化学成分Tab.1 The major components of volatile oil in Guizhi Fuling Capsule and its related combinations

续表1

图1 挥发油GC－MS图谱Fig.1 The GC－MS pictures of volatile oil in Guizhi Fuling Capsule and its related combinations

3 讨论

组方配伍的混合药材挥发油主要成分来自于桂枝、桃仁、丹皮和白芍，化学成分种类基本为单味药材的加和，单味药材挥发油成分的含量在混合药材中发生了变化，混合药材挥发油主要成分根据混合药味配伍而表现得更为均衡，体现出药味配伍不同于单味药。按相同方法处理的桂枝茯苓胶囊的挥发油成分主要来自于桂枝和丹皮，化学成分种类明显比单味药材及混合药材的少，说明在桂枝茯苓胶囊工艺制备的过程中，选择性地提取了挥发性成分。一些单味药材中的挥发油成分由于含量低未在混合药材挥发油中表现出来，如：Heptanal（0.65%）、Camphene（0.34%）、Nonanal（0.83%）、Nopinon（2.35）、（－）－cis－Myrtanol（2.62%）。混合挥发油主要成分为Benzaldehyde（19.85%）、Cinnamaldehyde（34.73%）、Paeonol（38.97%）分别来自于单味药材桂枝、桃仁、白芍和丹皮挥发油的主要成分。胶囊挥发油主要成分Benzaldehyde（17.75%）和Paeonol（68.25%）分别来自于单味药材桂枝和丹皮。通过单味药材、配伍混合药材和胶囊提取的挥发油成分及含量分析，为药味配伍和制剂工艺制备及其质量控制提供了理论依据。

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