HPLC法测定不同产地酸枣仁中酸枣仁皂苷A的含量

★ 熊跃 曾文雪 何双凤

(1.江西省南昌市中西医结合医院 南昌 330003；2. 江西中医学院 南昌 330006；3.石家庄以岭药业股份有限公司 石家庄 050035)

HPLC法测定不同产地酸枣仁中酸枣仁皂苷A的含量

★ 熊跃1曾文雪2*何双凤3

(1.江西省南昌市中西医结合医院 南昌 330003；2. 江西中医学院 南昌 330006；3.石家庄以岭药业股份有限公司 石家庄 050035)

目的：采用HPLC法测定不同产地酸枣仁中酸枣仁皂苷A的含量，并客观比较不同产地药材的质量。方法：用高效液相色谱法，使用Kromasil C18色谱柱(4.6mm×150mm,5μm)；流动相:乙腈-水(30∶70)，检测波长204nm，流速0.8mL/min，柱温25℃。结果：6个产地酸枣仁中酸枣仁皂苷A含量为0.5372%-0.0731%，不同产地酸枣仁中酸枣仁皂苷A含量有差异。结论：6个不同产地酸枣仁中酸枣仁皂苷A含量均符合药典标准，其中陕西延安产区的酸枣仁药材质量较其他产地相比较好。

酸枣仁;酸枣仁皂苷A；高效液相色谱法

1 实验材料

1.1 仪器

Waters 600高效液相色谱仪(美国waters公司)，Waters 600四元梯度泵，996二极管阵列检测器，Em-power工作站；TG-328型光电分析天平(上海天平仪器厂)；ZFQ-85A型旋转蒸发仪(上海医械专机厂)；KQ-250高频数控超声波清洗仪(昆山市超声仪器有限公司)；HHS112型电热恒温水浴锅(江苏省医疗器械厂)。

1.2 药材与试剂

酸枣仁皂苷A对照品，中国药品生物制品检定所，批号110734-200509；山东济南、陕西延安等6个产地的酸枣仁药材，经鉴定均符合药材标准；乙腈为色谱纯，水为高纯水，其余试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件与检测方法

使用Kromasil C18色谱柱(4.6mm×150mm，5μm)；流动相:乙腈-水(30∶70)，检测波长204nm，流速0.8mL/min，进样量：10μL，柱温25℃。理论塔板数按酸枣仁皂苷A计算,不低于5 600，酸枣仁皂苷A色谱峰的分离度均大于1.5。[1]

2.2 标准品溶液的制备

精密称取酸枣仁皂苷A标准品0.5mg，加乙醇溶解定容至10mL摇匀，作为对照品溶液。

2.3 供试品溶液制备

精密称取6份不同产地酸枣仁样品各5g，加入100mL甲醇，沙氏提取器回流提取12h，后用旋转蒸发仪将提取液中甲醇挥干，残渣加30mL水溶解，定量转移至100mL分液漏斗中，依次用石油醚、水饱和正丁醇、正丁醇饱和的氨水溶液萃取，每次3次，每次10mL，用旋转蒸发仪将提取液中的醇挥干，甲醇溶解残渣，溶液定量转移至5mL容量瓶，定容，摇匀，作为供试品溶液。[2]

2.4 线性关系考察

精密吸取对照品溶液酸枣仁皂苷A 20μL，注入色谱仪，按上述色谱条件测定，测得酸枣仁皂苷A峰面积。绘制标准曲线，得回归方程：Y=1839466X-42935，r=0.9996。酸枣仁皂苷A在0.05-0.98μg范围内线性关系良好。

2.5 精密度试验

精密吸取对照品溶液10μL，按上述色谱条件重复进样6次，测定峰面积，计算酸枣仁皂苷A的RSD为0.95%，结果表明本法精密度良好。

2.6 稳定性试验

取同一批样品(陕西延安)约5g，按供试品溶液制备项下方法制备溶液,分别于制备后的0、2、4、8、10、16、24h按色谱条件下进样，每次进样10μL，测定酸枣仁皂苷A的RSD为1.22%，结果表明供试品溶液在24h内基本稳定。[3]

2.7 重复性试验

精密称取同一批酸枣仁样品(陕西延安)5g，共6份，制备供试品溶液，并以同样色谱条件加以测定,结果酸枣仁皂苷A的含量RSD为1.5%，表明本方法重复性较好，方法可行。

2.8 加样回收率试验

精密称取同一批酸枣仁样品(陕西延安)5g，共6份,分别加入酸枣仁皂苷A对照品，按供试品溶液制备方法制备供试品溶液，按色谱条件下进样分析，计算加样回收率。结果见表1。

表1 酸枣仁皂苷A回收率

2.9 样品测定

取6个不同产地的酸枣仁样品进样测定，6个产地酸枣仁中酸枣仁皂苷A含量为0.5372%-0.0731%。结果见表2。

表2 酸枣仁样品测定结果

3 小结

对6个产地酸枣仁药材测定中发现，酸枣仁皂苷A含量在0.0537%-0.0731%范围内，陕西延安产的酸枣仁其皂苷A成分含量较高，其存在差异的原因有待进一步探究。

[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典.(一部)[S].北京:中国医药科技出版社，2010:241-242．

[2]李玉娟,车镇涛,毕开顺，等.反相高效液相法测定酸枣仁中酸枣仁皂苷A的含量[J].中国中药杂志，2001,26(5):309-310.

[3]张延妮,岳宣峰,王喆之.反相高效液相色谱同时测定五味子中五味子醇甲、五味子酯甲和五味子乙素的含量[J].分析科学学报.2007，23(1)：41-44.

征稿启事

《江西中医药》所设的重点栏目有《明医心鉴》、《滕王阁医话》等。《明医心鉴》以介绍名老中医经验和中医临证心得为主，重点刊载中医关于疑难病的诊疗经验，要求观点、方法新，经验独到。《滕王阁医话》主要反映中医教学、科研、临床的一得之见，要求以小见大，有感而文，语言生动流畅，可读性强，富于知识性、趣味性。

DeterminationofJujubasideAinDifferentOriginSemenbyHPLC

XIONGYue1,ZENGWen-xue2*,HEShuang-feng3

1.IntegrativeMedicineHospitalofNanchang,JiangxiNanchang330003;2.JiangxiUniversityofTCM,Nanchang330006；3.ShijiazhuangYilingPharmaceutialCo.Ltd,Shijiazhuang050035

Objective: To develop a new method for the determination of Jujubaside A in different origin Semen . Methods:A HPLC method was set up , using Kromasil C18column , Acetonitrile-water (30∶70) as the mobile phase with a flow rate 0.8 mL/min ,column temperature 25℃. Results：The range of content of Jujubaside A in 6 origin Semen was 0. 5372% -0. 0731% . The content was difference . Conclusion：Jujuboside A levels of Six different origin Semen were in line with pharmacopoeia standards .The Semen quality in Yan'an was better than others.

Semen; Jujubaside A; HPLC

*通讯作者：曾文雪(1983-)，男，讲师，博士，执业药师，江西信丰人，长期从事中药制剂新技术研究，E-mail：zengwenxue@126.com。

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