中草药复方添加剂对繁殖后期种公鸡血液生化指标的影响

山东省日照市动物疫病预防控制中心 秦绪光 顾媛媛

西北农林科技大学动物科技学院 刘福柱 牛竹叶＊

中草药免疫活性物质能增强机体免疫机能，提高动物抗应激、抗疾病能力，改善动物生产性能，且具有无残留、不易产生耐药性等优点（朴香淑和李德发，2002）。中草药的化学成分极为复杂，含有丰富的维生素、矿物质元素和蛋白质，还含有苷类、挥发油、生物碱等。有些中草药还含有甾醇类物质，对内分泌与生殖机能作用较强，能刺激畜禽的繁殖，提高畜禽的繁殖性能。本试验根据中兽医学理论选用温肾壮阳、补气益血、滋阴生津的中草药及减缓应激的中草药组成复方饲喂种公鸡，以期降低鸡的应激，减少淘汰，提高种公鸡利用率，降低种鸡场的饲养成本。同时也为中草药饲料添加剂在种公鸡日粮中的应用提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 中草药来源及复方组成 试验用中草药均购自杨凌中医院，干燥后粉碎，过孔径为1 mm的筛子，然后按照复方配比混匀装袋，置于干燥处保存备用。中草药复方组成：淫羊藿250 g，补骨脂、山茱萸、炒山药各200 g，茯苓、牡丹皮、泽泻、甘草各 120 g，肉桂、黄芪各 50 g（邓楠，2001；谢仲权和牛树琦，2001、1996）。

1.2 试验动物 供试动物为50周龄体重约2.25 kg的尼克T种公鸡，共80只，由西北农林科技大学动物科技学院畜牧站种鸡场提供。

1.3 试验设计 供试鸡随机分成Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组，每组16只，Ⅰ、Ⅱ组为对照组，分别饲喂基础日粮和基础日粮添加鸡蛋；Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ为试验组，在基础日粮中分别添加1%、2%、3%中草药复方添加剂。预饲期15 d，试验期60 d。基础日粮组成及营养水平见表1。

表1 基础日粮组成及营养水平

1.4 饲养管理 试验鸡采用二阶梯单笼饲养，整个试验期内自由采食和饮水，其他饲养管理条件严格按照种鸡场的要求进行。

1.5 血样采集 在预饲期末和试验期的第30天和第60天及试验结束后第15天时，每组随机选择3只试鸡，禁食12 h，供饮水，翅静脉采血，每只鸡采血3 mL，4000 r/min离心10 min，制备血清样品，分装于Eppendorf管中，于-20℃冰箱中保存备用。

1.6 血清生化指标 血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG3）、高密度脂蛋白（HDL）、低密度脂蛋白（LDL）、血清总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、球蛋白（GLOB）、白球蛋白比（A/G）、血尿素氮（BUN）、尿酸（UA）、的浓度以及谷丙转氨酶（GPT）、谷草转氨酶（GOT）的活性等血液生理生化指标，均送陕西省肿瘤医院，采用日立7600血液生化自动分析仪测定。

1.7 数据处理 采用SPSS软件进行单因子方差分析，平均数间的多重比较采用LSD法，数据均以“平均数±标准差”的形式表示。

2 结果

2.1 中草药复方添加剂对种公鸡血清蛋白的影响由表2可见，在种公鸡日粮中添加中草药复方添加剂能提高血清TP含量，各试验组较对照Ⅰ组分别提高了16.68%、21.81%、16.51%，较对照Ⅱ组分别提高了2.09%、7.37%、1.94%，其中Ⅳ组与对照Ⅰ组相比，差异极显著（P＜0.01），与对照Ⅱ组差异显著 （P＜0.05），Ⅲ组和Ⅴ组与对照Ⅰ组相比，差异显著（P＜0.05），但与对照Ⅱ组差异不显著（P＞0.05）；血清球蛋白含量，各试验组较对照Ⅰ组分别提高了22.86%、31.13%、20.99%，差异极显著（P＜0.01），与对照Ⅱ组相比，各试验组血清球蛋白含量均有所提高，但差异不显著 （P＞0.05）；血清清蛋白含量，试验组与对照组差异不显著（P＞0.05）；A/G比值各试验组均显著低于对照Ⅰ组（P＜0.05），与对照Ⅱ组相比，差异不显著（P ＞ 0.05）。

表2 中草药复方添加剂对种公鸡血清蛋白的影响

2.2 中草药复方添加剂对种公鸡其他血清生化指标的影响 由表3可知，试验组种公鸡血清BUN含量与对照组相比，呈下降趋势，但组间差异不显著（P＞0.05）；各试验组种公鸡血清HDL含量与对照组相比，呈上升趋势，但组间差异不显著（P＞0.05）；各试验组GPT活性较对照Ⅰ组分别降低了27.21%、36.62%、24.68%，差异均极显著（P＜0.01），与对照Ⅱ组相比，Ⅳ组GPT含量极显著降低（P ＜ 0.01），Ⅲ和Ⅴ组显著降低（P ＜ 0.05），各试验组间相比，Ⅳ组GPT活性显著低于Ⅲ和Ⅴ组（P ＜ 0.05），Ⅲ组和Ⅴ组差异不显著（P ＞ 0.05）；各试验组GOT活性均显著低于对照组（P＜0.05），但各试验组间相无显著差异（P ＞ 0.05）；各试验组UA含量较对照Ⅰ组分别降低了17.06%、23.05%、18.62%，较对照Ⅱ组分别降低了18.54%、24.42%、20.08%，差异均达极显著水平 （P＜0.01）；各试验组TG3含量显著低于对照组 （P＜0.05），但试验组间差异不显著（P ＞ 0.05）；各试验组TC含量均不同程度下降，其中Ⅳ组血清TC含量分别显著低于Ⅰ和Ⅱ组17.19%和22.06%（P＜0.05），Ⅲ和Ⅴ组TC含量与对照组差异不显著（P＞ 0.05），各试验组间无显著差异（P ＞ 0.05）；Ⅳ组公鸡血清LDL显著高于Ⅰ组和Ⅱ组 （P＜0.05），各试验组间无显著差异（P＞0.05）。

3 讨论

表3 中草药复方添加剂对种公鸡血清其他生化指标的影响

3.1 中草药添加剂对种公鸡血清蛋白含量的影响本试验的结果表明，试验Ⅲ和Ⅴ组血清总蛋白含量显著高于对照Ⅰ组，Ⅳ组极显著高于Ⅰ组；各试验组球蛋白含量极显著高于对照Ⅰ组，并且试验组A/G与对照组相比有降低的趋势，说明饲喂含中草药添加剂日粮可使血清蛋白含量与球蛋白含量保持较高的水平，提高了种公鸡的免疫能力，降低了繁殖后期种公鸡体内的应激。同时，血清白蛋白作为脂肪酸转运的载体，其水平的高低是脂类分解情况的指标，这与试验组种公鸡血清中的甘油三酯和总胆固醇与对照组相比，都呈现出下降的趋势相吻合。刘思当等 （2003）、王晓霞等（2000）、刘春燕等（2000）研究均表明，在应激情况下，血清中总蛋白、白蛋白、球蛋白的含量均下降，刚开始呈逐渐下降的趋势，差异并不显著；随着应激的持续，血清蛋白下降明显，差异显著。其机制有可能是种公鸡的生产利用使鸡体长期处于应激状态下，而中草药中的某些活性成分有降低应激，增强了机体对蛋白质的利用程度，蛋白质代谢活动加强，血清中总蛋白、白蛋白、球蛋白含量增加。

3.2 中草药添加剂对种公鸡谷丙转氨酶、谷草转氨酶活性的影响 正常情况下，细胞内酶由于细胞膜的屏障作用不易逸出，仅由于细胞不断更新而少量释放入血。只有当细胞膜受到损伤，细胞膜的通透性升高，细胞内酶释放入血的速度大大提高，血清酶活性才明显升高。王晓霞等（2000）报道，应激时，蛋鸡血清GPT水平高于正常值，而添加微营养素（Zn、Se、Cu、维生素 C）后，血清酶水平显著下降。刘思当等（2003）研究表明，应激使肉仔鸡血清GPT显著升高。刘春燕等（2000）报道，高温应激使蛋鸡血清GOT的活性持续极显著升高，GPT先升高后后下降。本试验中，各试验组种公鸡血清中GPT活性显著低于对照Ⅰ组 （P＜0.01或P＜0.05）；试验组GOT活性显著低于对照组（P＜0.05），结果产生的原因提高可能是因为中草药添加剂有利于促进机体蛋白质的合成，提高了机体氨基酸的利用程度，从而使机体组织细胞的蛋白质合成代谢加强。说明该中草药添加剂不会给机体代谢带来不良影响，反而加强了肝细胞进行物质代谢的功能，起到了保护肝脏的作用。

正常时，GPT主要存在于组织细胞内，以肝细胞含量最多，心肌细胞中含量次之，只有极少数释放入血，所以血液中此酶活力很低。当肝脏、心肌病变、细胞坏死或通透性增加时，此酶即释放于血清中，血清中GPT活性升高，说明某些原因，如应激等造成了肝脏的损伤，所以测定血液中此酶的含量可作为诊断、鉴别诊断及预后观察的依据（上海市医学化验所，1979）。GOT是催化谷氨酸与草酞乙酸在心肌内转变成α－酮戊二酸和天冬氨酸的关键酶。GPT和GOT同时也能反映机体蛋白质合成和分解代谢的状况（Henry，1988），若机体处于应激状态，基础代谢降低，采食量减少，使机体可利用的营养成分减少，细胞内代谢所需的能量主要靠分解代谢来提供，在动员机体储备氧化供能过程中，各种参与分解代谢的酶（GPT、GOT）的活性得到增强，但日粮中添加中草药复方添加剂降低GPT和GOT活性，这与其生产性能的提高是一致的。

3.3 中草药添加剂对种公鸡血清尿酸、尿素氮浓度的影响 血清尿素氮和尿酸水平是反映机体的营养状况及蛋白质代谢水平的指标。血清中尿素氮含量越低，说明机体蛋白质代谢越好。通常机体血浆代谢库中尿素氮浓度比较稳定，机体内限制性氨基酸不足或氨基酸不平衡会使血液尿素氮浓度提高（Chikhou等，1993）。尿酸作为禽类氨基酸代谢的最终产物，主要由肾脏排出，当肾功能不全时，尿酸排出受阻，血中尿酸含量升高，因此血清中尿酸含量常作为检测禽类肾功能的重要依据（贺普霄，1997）。 Scott（1982）研究认为，尿酸是核酸中嘌呤分解代谢的最终产物，血中尿酸直接反映体内蛋白质分解代谢水平。尿素氮尽管不是禽类蛋白质代谢的主要产物，但也通常作为一个衡量指标，其代谢机制与尿酸相同。尿素氮占血清非蛋白氮（NPN）的50%，一般认为，尿酸氮含量与蛋白质的利用率之间有显著的负相关，但当肝中蛋白质代谢和肾排泄功能正常时，其在血清中的含量维持在一定范围内（赵国先等，1995）。Malmlof（1988）报道，血浆尿素氮可以较准确的反映动物体内蛋白质的代谢情况和日粮氨基酸的平衡情况，可作为蛋白沉积的一个指标，血浆中尿素氮的水平可反映动物蛋白质代谢状况，蛋白质代谢良好时，血浆尿素氮浓度降低。

本试验研究结果表明，中草药的添加对公鸡血清尿素氮有降低作用，但未达显著水平 （P＞0.05）。肝脏是体内生成尿素的最主要部位，血液中尿素绝大多数是由肝脏经鸟氨酸循环从氨基酸中所脱下的氨生成的，通过血液循环至肾脏排出体外，肝脏中尿素生成的减少可为其他组织（如肌肉）的蛋白沉积提供充分的氨基酸等原材料，这样有利于蛋白在体内的沉积，这与本试验中血清总蛋白有增高的趋势相吻合。同时，可以推测中草药中有效活性成分可抑制蛋白质分解，减少氨的生成；而尿酸含量则显著降低，一方面，说明蛋白质代谢终产物排泄正常，给种公鸡饲喂中草药复方添加剂不仅不会损害肾脏，反而有保护肾脏，增强肾脏排泄功能的作用；另一方面，尿酸又是禽类蛋白质分解的产物，血液中尿酸水平降低，说明蛋白质的分解代谢降低，增加了蛋白质在体内的利用。

3.4 中草药添加剂对种公鸡血清脂类代谢的影响血清TG3主要有两个来源，一是小肠食物消化吸收而来，并以乳糜微粒的形式经淋巴管进入血液；二是在肝脏利用葡萄糖和脂肪酸形成的TG3，以VLDL的形式从肝脏释放至血液。乳糜微粒和VLDL在外周组织脂蛋白脂肪酶的催化下分解，释放TG3。中草药添加剂中的纤维素等物质可能起到阻抑日粮中的TG3消化吸收作用；人医临床研究中，治疗高甘油三酯血症常用的药物有贝丁酸类、烟酸类、洛伐他汀等，本试验所用中草药中是否含有这些成分，或者相似作用的其他成分，抑制肝脏内合成甘油三酯酶的活性，目前还不清楚，有待进一步研究。

血清LDL主要通过肝脏LDL受体途径清除，因此肝脏中LDL受体决定了血清LDL的水平；LDL受体含量的高低决定于受体基因转录和翻译两个水平。中草药添加剂有降低血清LDL的趋势，其机制可能是中草药有效成分促进LDL受体表达，加速脂蛋白的分解，由于LDL受体的这种降解作用，使血液中LDL减少。说明中草药对基因表达有影响作用，这种作用有可能是对脂蛋白受体具有翻译和翻译后水平的调节作用，从而达到调控血脂水平的目的。

中草药添加剂对HDL有升高的作用，可能由于中草药活性成分提高了卵磷脂胆固醇酰基转移酶（LACT）活性，LACT参与高密度脂蛋白的合成代谢，影响HDL的形成。HDL是由肝脏及小肠黏膜细胞合成，是唯一将胆固醇从外周组织运回肝脏清除至体外而产生抗动脉硬化作用的脂蛋白，现在人们通过一些药物提高HDL水平，如烟酸类、纤维类、雌二醇、他汀类等，本试验所用中草药是否含有这些物质及类似有效成分及其他提高HDL的有效成分，有待于进一步研究。

本试验中，中草药添加组公鸡血清中的甘油三酯含量与对照组相比均显著下降（P＜0.05），Ⅳ组总胆固醇含量显著低于对照组（P＜0.05），Ⅲ和Ⅴ组与对照组相比有所下降，但差异不显著（P＞0.05），试验组与对照组相比则有下降的趋势，并且Ⅳ组显著低于Ⅰ组（P＜0.05），Ⅲ和Ⅴ组与对照组相比差异均不显著（P＞0.05）；而HDL与对照组相比则呈上升的趋势，但差异不显著（P＞0.05）。说明本中草药添加剂可以调节种公鸡脂质代谢，影响机体脂肪的合成代谢，降低脂肪在体内的沉积，可以防止或降低鸡脂肪肝的发生。

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