半枝莲化学成分研究＊

李园园，唐旭利，李平林，李国强＊＊

（中国海洋大学1.医药学院，海洋药物教育部重点实验室；2.化学化工学院，山东 青岛266003）

半枝莲（Scutellaria barbata D.Don）为唇形科黄芩属植物，又名牙刷草，狭叶韩信草等，以干燥全草入药。其名最早见于《外科正宗》，味辛、苦，性寒，具有清热解毒、化瘀利尿之功效，是一种常用中药，多用于治疗疔疮中毒、咽喉肿痛、毒蛇咬伤、跌扑伤痛、水肿、黄疸等［1］。现代药理学研究表明，半枝莲具有明显的解热［2］、抗 癌、护 肝［3］和 抑 菌［4］等 活 性。 临 床 可 治 疗 肝炎，肝硬化腹水，肾炎等，近年来其在治疗癌症如直肠癌、肺癌、淋巴癌等方面的积极功效引起人们的极大关注［5－6］。为了寻找半枝莲中的有效成分，对半枝莲Scutellaria barbata D.Don进行了较系统的化学成分研究。从甲醇提取物中，共分离鉴定了10个单体化合物（见图1）：齐墩果酸（1）、熊果酸（2）、反式－4－甲基肉桂酸（3）、金色酰胺醇酯（4）、对羟基苯甲醛（5）、对羟基苯乙酮（6）、5－羟基－7，3′，4′，5′－四甲氧基黄酮（7）、芹菜素（8）、5，7，4′－三羟基－8－甲氧基黄酮（9）、5，7，4′－三羟基－6－甲氧基黄酮（10）。本文报道以上10个化合物的分离纯化以及结构鉴定工作。

图1 化合物1－10的化学结构Fig.1 Structure of ompounds 1－10

1 仪器与材料

NMR由日本Jeol公司JNM－ECP600型核磁共振仪测定，TMS为内标；HPLC在美国Agilent 1100高效液相色谱仪上完成；旋转蒸发仪（德国Heidolph公司）；BSZ－100自动部分收集器（上海沪西分析仪器厂有限公司）。薄层硅胶和柱层析硅胶（青岛海洋化工厂）；柱层析ODS（北京金欧亚科技发展有限公司）；Sephadex LH－20（Amersham Pharmacia Biotech AB公司）。常用有机试剂均为国产分析纯。

半枝莲样品于2007年10月采自安徽桐城，种属由山东中医药药大学周凤琴教授鉴定为半枝莲Scutellaria barbata D.Don。标本存放于中国海洋大学医药学院天然药物化学一室。

2 提取与分离

将半枝莲干燥全草样品（干重5kg）粉碎后，室温下用甲醇10L动态冷浸提取3次，合并提取液，真空浓缩，得总浸膏426.7g，粗提物浸膏用水溶解，分别用石油醚（2L×4）、乙酸乙酯（2L×4）、水饱和正丁醇（2L×4）萃取。将各萃取相分别减压回收溶剂，得石油醚部分59.5g、乙酸乙酯部分63.5g、正丁醇部分68g。取乙酸乙酯部分63.5g，经100～200目硅胶减压柱层析，氯仿／甲醇梯度洗脱（100%～0%），分为9个粗部位（Y－1～Y－9），经反复正、反相硅胶柱层析、Sephadex LH－20柱层析和半制备高效液相色谱分离纯化，从部位Y－2中得到化合物1（15mg），2（13mg），3（8.8mg），4（17mg），5（4.5mg），6（3.5mg），7（4.7mg）；取正丁醇部分68g，经100～200目硅胶减压柱层析，氯仿／甲醇梯度洗脱（100%～0%），分为7个粗部位（Z－1～Z－7），经反复正相硅胶柱层析、Sephadex LH－20柱层析分离纯化，从部位Z－2中得到化合物8（20mg），9（7mg），10（9mg）。

3 结构鉴定

化合物1：白色针晶（氯仿），mp 308～310℃，硫酸－香草醛反应显蓝色，Liebermann－Burchard反应阳性，提示其为 甾 体 或 三 萜 类 化 合 物，1H－NMR （600MHz，CDCl3）δH：5.28（1H，t，J＝3.40Hz，H－12），3.23（1H，dd，J＝11.5，4.4Hz，H－3），2.82（1H，dd，J＝13.74，4.4Hz，H－18），1.11 （3H，s，CH3－27），0.99（3H，s，CH3－23），0.93（3H，s，CH3－25），0.91（3H，s，CH3－29），0.91 （3H，s，CH3－30），0.78 （3H，s，CH3－24），0.75 （3H，s，CH3－26）。以上数据与文献［7］报道基本一致，经薄层层析检查与齐墩果酸对照品的Rf值，斑点颜色也一致，混合斑点不分离，故鉴定化合物1为齐墩果酸。

化合物2：无色针晶（氯仿），mp 283～288℃，硫酸－香草醛反应显蓝色Liebermann－Burchard反应阳性，提示其为甾体或三萜类化合物，1H－NMR （600MHz，CDCl3）δH：5.26（1H，brs，H－12），3.23（1H，dd，J＝4.8，4.0Hz，H－3），2.87 （1H，d，J＝3.8Hz，H－18），1.08（3H，s，CH3－27），0.99 （3H，s，CH3－23），0.95（3H，d，J＝6.6Hz，CH3－29），0.93 （3H，s，CH3－25），0.86（3H，d，J＝6.6Hz，CH3－30），0.79 （3H，s，CH3－24），0.78（3H，s，CH3－26）。以上数据与文献［8］报道基本一致，经薄层层析检查与熊果酸对照品的Rf值，斑点颜色也一致，混合斑点不分离，鉴定化合物2为熊果酸。

化合物3：无色油状物 （氯仿），1H－NMR （600MHz，CDCl3）δH：7.51（1H，d，J＝15.9Hz，H－3），7.44（2H，d，J＝8.8Hz，H－5，9），6.90 （2H，d，J＝8.8Hz，H－6，8），6.61（1H，d，J＝15.9Hz，H－2），2.39（3H，s，CH3）。以上数据与文献［9］报道基本一致，鉴定化合物3为反式－4－甲基肉桂酸。

化合物4：白色针状结晶（氯仿），mp 179～181℃，1HNMR （600MHz，CDCl3）δH：7.71 （2H，d，J＝7.7 Hz，H－j，j′），7.52 （1H，d，J＝7.7Hz，H－I），7.44（2H，dd，J＝7.7，7.15Hz，H－k，k′），7.29（1H，m，H－h），7.26 （2H，m，H－g，g′），7.22 （2H，m，H－f，f′），7.17 （1H，m，H－d），7.14 （2H，m，H－c，c′），7.07（2H，d，J＝7.7Hz，H－b，b′），6.77（1H，d，J＝7.7Hz，Benzoyl－NH），6.00（1H，d，J＝8.3Hz，CH－CO－NH－CH），4.77 （1H，m，H－2′），4.35 （1H，m，H－2），3.93（1H，dd，J＝11.0，4.4Hz，H－1b），3.83（1H，dd，J＝11.0，4.4Hz，H－1a），3.21（1H，dd，J＝13.7，6.8Hz，H－3′b），3.06（1H，dd，J＝13.7，8.3Hz，H－3′a），2.75 （2H，m，H－3），2.02（3H，s，CH3－CO）。13C－NMR （150MHz，CDCl3）δC：64.5 （C－1），49.4 （C－2），37.4 （C－3），170.3 （C－1′），55.0（C－2′），38.4 （C－3′），136.7 （C－a），129.1 （C－b，b′），128.5 （C－c，c′），126.7 （C－d），136.6 （C－e），128.7（C－f，f′），129.3 （C－g，g′），127.1 （C－h），167.1 （C－m），133.6 （C－i），127.0 （C－j，j′），128.6（C－k，k′），131.9（C－l），20.8 （CH3－CO），170.8 （CH3－CO）。以上数据与文献［10］报道基本一致，鉴定化合物4为金色酰胺醇酯。

化合物5：无色针晶（石油醚），mp 111～113℃，三氯化铁－铁氰化钾反应阳性，示有酚羟基存在。1H－NMR（600MHz，DMSO－d6）δH：10.60 （1H，s，4－OH），9.78（1H，s，CHO），7.75（2H，d，J＝8.8Hz，H－2，6），6.92 （2H，d，J＝8.8Hz，H－3，5）。13C－NMR（150MHz，DMSO－d6）δC：191.2 （C＝O），128.4 （C－1），132.5（C－2，6），116.4（C－3，5），164.4（C－4）。以上数据与文献［11］报道基本一致，鉴定化合物5为对羟基苯甲醛。

化合物6：无色针晶（石油醚），三氯化铁－铁氰化钾反应阳性，示有酚羟基存在。1H－NMR （600MHz，DMSO－d6）δH：10.37（1H，brs，4－OH），7.82（2H，d，J＝8.8Hz，H－2，6），6.84 （2H，d，J＝8.8Hz，H－3，5），2.46（3H，s，CH3）。13C－NMR（150MHz，DMSO－d6）δC：196.1 （C＝O），128.7（C－l），130.8 （C－2，6），115.3（C－3，5），162.1（C－4），26.4（CH3）。以上数据与文献［12］报道基本一致，鉴定化合物6为对羟基苯乙酮。

化合物7：黄色粉末（氯仿），mp 187～190℃，三氯化铁－铁氰化钾反应阳性，示有酚羟基存在，盐酸－镁粉反应阳 性，示 为 黄 酮 类 化 合 物。1H－NMR （600MHz，CDCl3）δH：12.73（1H，s，5－OH），7.12（2H，s，H－2′，6′），6.59（1H，s，H－3），6.56（1H，s，H－8），5.93（1H，s，H－6），4.01 （6H，s，3′，5′－OCH3），3.99（3H，s，4′－OCH3），3.94 （3H，s，7－OCH3）。13CNMR （150MHz，CDCl3）δC：158.1（C－2），154.8 （C－3），182.7（C－4），162.6（C－5），98.5（C－6），166.0（C－7），93.1（C－8），166.0（C－9），104.1 （C－10），141.8（C－l′），106.0 （C－2′），158.1 （C－3′），162.6 （C－4′），106.0（C－5′），126.9 （C－6′），61.5 （OCH3－7），56.7 （OCH3－3′），56.8 （OCH3－5′），56.2 （OCH3－4′）。以上数据与文献［13］报道基本一致，鉴定化合物7为5－羟基－7，3′，4′，5′－四甲氧基黄酮。

化合物8：黄色针状结晶（甲醇），mp 347～348℃，三氯化铁－铁氰化钾反应阳性，示有酚羟基存在，盐酸－镁粉反应阳性，示为黄酮类化合物。1H－NMR （600MHz，DMSO－d6）δH：13.00（1H，s，5－OH），10.78（1H，s，7－OH），7.93 （2H，d，J＝8.8Hz，H－2′，6′），6.93（2H，d，J＝8.8Hz，H－3′，5′），6.79（1H，s，H－3），6.49（1H，d，J＝2.2Hz，H－8），6.20（1H，d，J＝2.2Hz，H－6）。13C－NMR （150MHz，DMSO－d6）δC：164.1 （C－2），103.7 （C－3），181.8 （C－4），157.3 （C－5），98.8（C－6），163.8 （C－7），94.0 （C－8），157.2 （C－9），102.9（C－10），121.2 （C－1′），128.5 （C－2′），116.0 （C－3′），161.5（C－4′），116.0 （C－5′），128.6 （C－6′）。以上波谱数据与文献［14］报道的芹菜素基本一致，故鉴定化合物8为芹菜素。

化合物9：黄色针状结晶（甲醇），mp 299～301℃，三氯化铁－铁氰化钾反应阳性，示有酚羟基存在；盐酸－镁粉反应阳性，示为黄酮类化合物。1H－NMR （600MHz，DMSO－d6）δH：12.65（1H，s，5－OH），7.94（2H，d，J＝8.8Hz，H－2′，6′），6.97（2H，d，J＝8.8Hz，H－3′，5′），6.81（1H，s，H－3），6.29（1H，s，H－6），3.84（3H，s，8－OCH3）。以上波谱数据与文献［14］对照基本一致，鉴定化合物9为5，7，4′－三羟基－8－甲氧基黄酮（4′－羟基汉黄芩素）。

化合物10：黄色针状结晶（甲醇），mp 228～230℃，三氯化铁－铁氰化钾反应阳性，示有酚羟基存在；盐酸－镁粉反应阳性，示为黄酮类化合物。1H－NMR （600MHz，DMSO－d6）δH：12.65（1H，s，5－OH），7.94（2H，d，J＝8.8Hz，H－2′，6′），6.93（2H，d，J＝8.8Hz，H－3′，5′），6.79（1H，s，H－3），6.60（1H，s，H－8），3.75（3H，s，8－OCH3）；13C－NMR （150MHz，DMSO－d6）δC：164.0（C－2），102.5（C－3），182.1（C－4），152.9 （C－5），131.4（C－6），157.2 （C－7），94.2 （C－8），152.5 （C－9），104.1 （C－10），121.2 （C－1′），128.4 （C－2′），116.1（C－3′），161.2 （C－4′），116.1 （C－5′），128.5 （C－6′），60.0（6－OCH3）。以上波谱数据与文献［12］对照基本一致，鉴定化合物10为5，7，4′－三羟基－6－甲氧基黄酮。

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