上消化道疾病患者幽门螺旋杆菌抗体谱检测结果分析

许文龙，李齐云，佘亚辉，韩媛媛

（安徽省亳州市人民医院检验科 236800）

临床上幽门螺杆菌（Hp）的检测方法很多，常用的有快速尿素酶实验，14C、13C呼气试验。14C呼气试验因有放射性而渐被淘汰，13C较安全却过于昂贵；而单一的尿素酶实验又无法识别是否为产细胞毒素的Hp感染以及易出现假阴性，影响结果的准确性。本文采用蛋白芯片技术对上消化道疾病患者进行Hp血清学检查，探讨Hp抗体谱检测在上消化道疾病诊断中的意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取本院门诊与住院患者557例，因上消化道症状而行胃镜检查，其中胃溃疡73例，男49例，女24例，年龄20～88岁，平均年龄49.3岁；十二指肠溃疡32例，男26列，女6例，年龄19～71岁，平均年龄39.5岁；慢性胃炎258例；男114例，女144例，年龄11～76岁，平均年龄23.5岁。上消化道肿瘤组（均经病理证实）56例，男35例，女21例，年龄44～76岁，平均年龄61.3岁。另外138例健康体检体检者作为对照组。

1.2 血清Hp抗体检查方法

1.2.1 标本采集和保存 空腹抽取静脉血2mL置于普通生化管中，分离血清，如未能及时检查则置于－20℃冻存。

1.2.2 采用试剂 由深圳欣康基因数码科技有限公司提供的Hp蛋白检测芯片试剂盒。

1.2.3 原理 Hp芯片抗体检测试剂盒将Hp特异性重组蛋白包括细胞毒素相关蛋白（CagA）、空泡毒素A蛋白（VacA）、尿素酶（Ure）、热休克蛋白60（Hsp60）和氮素还原酶（RdxA）以方阵形式固定于支持膜上，待检标本中的特异性抗体（IgG）与抗原发生反应，便在膜上形成抗原－抗体免疫复合物，再用胶体金标记物（显色剂）与该免疫复合物结合，最终形成肉眼可见的红色斑点，借助芯片阅读仪对待检标本中的抗体做定性分析。1.2.4 操作步骤 严格按深圳欣康基因数码科技有限公司提供的HP蛋白检测芯片试剂盒说明书操作。

1.3 结果判断 检测5种 Hp抗体中以CagA、VacA、Ure、Hsp60抗体中任意一项阳性即判断为Hp抗体阳性；以分泌CagA／VacA为Ⅰ型Hp，无分泌CagA／VacA为Ⅱ型Hp。

1.4 统计学方法 应用SPSS15.0统计软件，采χ2检验，多组总体率比较检验水准α＝0.05。

2 结 果

2.1 对照组、慢性胃炎、胃溃疡、十二指肠溃疡、上消化道肿瘤各组的Hp抗体谱感染率比较见表1。Hp抗体谱感染率在各组间总体比较差异有统计学意义（χ2值为15.413，P 为0.004）；慢性胃炎组、上消化道肿瘤组Hp感染率与对照组比较差异均无统计学意义（χ2值分别为0.035、0.020，P分别为0.853、0.888）；胃溃疡与十二指肠溃疡组间及慢性胃炎组与上消化道肿瘤组Hp抗体谱感染率比较差异亦无统计学意义（χ2值分别为0.012、0.081，P分别为0.912、0.776）；溃疡组 Hp抗体谱感染率明显高于对照组与慢性胃炎组（χ2值分别为8.849、9.453，P 分别为0.003、0.002）。

表1 各组间Hp抗体谱感染率及Hsp60阳性率［n（%）］

2.2 Hsp60抗体在对照组、慢性胃炎组、胃溃疡组、十二指肠溃疡组、上消化道肿瘤组的阳性率分别为9.4%、1.75%、20.5%、3.1%、46.4%（见表1）。上消化道肿瘤组 Hsp60阳性率与其他4组比较差异均有统计学意义（χ2值分别为33.968、65.589、9.79、17.955；P 值 分 别 为 0.000、0.000、0.002、0.000）。

2.3 对照组、慢性胃炎、胃性溃疡、十二指肠溃疡、上消化道肿瘤各组的Ⅰ型和Ⅱ型Hp感染率比较见表2。胃溃疡、十二指肠溃疡、上消化道肿瘤组Ⅰ型和Ⅱ型Hp感染率明显高于对照组与慢性胃炎组。

表2 各组间Ⅰ型、Ⅱ型Hp感染率比较［n（%）］

3 讨 论

Hp是从慢性活动性胃炎患者的胃黏膜分离的一种革兰阴性杆菌，一般情况下定植于胃黏膜，可引起慢性胃炎、消化性胃溃疡等消化道疾病，并且是胃腺癌与胃淋巴瘤的诱发因素之一［1］。Hp在胃黏膜繁殖后，能产生丰富的尿素酶，有极强的分解尿素的作用，尿素分解后产生的氨对黏膜产生毒性作用，致使黏膜损伤，破坏胃黏膜，发生上消化道各种疾病。

Hp在人群中有较高的感染率。Hp感染人体后可呈现不同的临床结果，这除了可能与宿主的个体差异有关以外，Hp菌株的不同可能是导致不同临床结果的关键因素。由于菌株不同，其所含细胞毒素相关蛋白也不尽相同。一些Hp表达空泡毒素和细胞毒素它们在导致黏膜损伤中起重要作用［2］。现已表明Hp不同的抗体成分决定了其致病特点或与Hp感染的预后及耐药密切相关［3］。据此特性临床上把Hp分为2种类型，即分泌CagA／VacA为Ⅰ型，无分泌Cag A／VacA为Ⅱ型［4］。它们在胃和十二指肠疾病中造成的后果不一样，Ⅱ型HP不产生细胞毒素，它虽然能覆盖在部分胃黏膜上，并使人体产生相应的免疫应答（产生Hp抗体），但不能侵入胃上皮细胞，可长期无临床症状。相反感染Ⅰ型Hp后，由于细胞毒素的作用造成胃上皮细胞空泡、损伤、坏死及溃疡，因此感染此类Hp与胃、十二指肠溃疡及胃部肿瘤可能有较密切的关系［5］。本文中上消化道疾病的Hp总阳性率为57.27%（319／557），与文献［6］报告相似，表明Hp感染与上消化道疾病密切相关。Ⅰ型Hp感染率在消化性溃疡组与上消化道肿瘤组均明显高于对照组，显示具有高毒力因子（CagA及VacA）的Hp是上消化道疾病的主要致病菌株。

Hsp是一种分子伴侣，能以分子模拟宿主自身抗原，逃避宿主免疫和（或）诱发自身免疫，同时其具有抗原特异性可引起抗感染免疫。目前至少已认识到4族Hsp，即Hsp90、Hsp70、Hs p60和小Hsp。研究表明Hp中存在Hsp60，它可能与Hp对胃黏膜上皮的黏附有关，而且参与蛋白质的细胞外装配和（或）在宿主胃环境中保护尿素酶的活性［7－8］。本研究中上消化道肿瘤组Hsp60阳性表达率显著高于慢性胃炎组、消化性溃疡组及对照组，表明Hsp60的高表达可能与肿瘤的发生、发展和生物学行为有密切的关系。胃癌的形成、发展有如下模式：即浅表性胃炎－萎缩性胃炎－肠上皮化生－不典型增生－胃癌，其中肠上皮化生和不典型增生是胃黏膜良性病变向胃癌演变的前奏，属于慢性增生性疾病，而在此过程中Hsp60阳性表达率呈逐渐上升趋势［7］。

在人群中采用Hp检测的血清学筛查，能够及早发现各种消化性疾病患者，并得到早期治疗。本组结果表明，Hp蛋白芯片血清学检测可以为临床判断是否为产毒的Hp感染提供科学依据，对判断预后有重要的临床意义，很适合广大基层医院推广应用。

［1］ 姚永莉，张万岱.幽门螺杆菌致病因子研究进展［J］.世界华人消化杂志，2002，10（4）：455-458.

［2］ 岑朝，黄赞松，周喜汉，等.百色地区居民幽门螺杆菌的毒力及其耐药状况研究［J］.广西医学，2009，31（1）：7-9.

［3］ Go MF，Graham DY.How does Helicobacter pyl ori cause duodenal ulcer disease：the bug，the host，or both？［J］.J Gastroenternal Hepatol，1994，9（Supp l1）：8-10.

［4］ 朱人敏，秦苏堤，金鑫鑫，等.幽门螺杆菌分型与上消化道疾病的关系［J］.医学研究生学报，2005，18（10）：911-917.

［5］ 林裕龙，龙国进，兰萌.幽门螺旋杆菌抗体谱检测在不同消化系统疾病的临床意义［J］.广东医学，2006，27（12）：1887-1888.

［6］ 成积儒，蔡永林，黄德旺，等.336例上消化道疾病患者的幽门螺杆菌抗体谱检测结果分析［J］.广西医学，2009，31（6）：806-807.

［7］ 马锐，孙丽萍，袁媛，等.胃黏膜病中 Hsp60的表达及意义［J］.中国肿瘤临床，2005，32（1）：43-44.

［8］ 尹晓燕.上消化道出血207例分析［J］.检验医学与临床，2010，7（10）：987.