时间分辨荧光免疫分析法定量检测845例乙型肝炎标志物结果分析

马兴璇，刘春明，王林春

（广西壮族自治区柳州市中医院检验科 545001）

目前检测乙型肝炎的方法有两种，一种是检测方法是用聚合酶链反应（PCR）法检测其核酸，即乙型肝炎病毒（HBV）DNA；另一种方法是检测乙型肝炎标志物，主要方法有酶联免疫法（ELISA）和时间分辨荧光免疫分析法（TRFIA），PCR法因技术和实验室要求较高，基层医院难以开展，ELISA法是传统检测乙型肝炎的主要方法，但该方法的主要缺点是只能定性不能定量，不便于临床治疗过程的观察。近年来，随着TRFIA广泛应用于临床，解决了检测乙型肝炎标志物只能定性不能定量的难题，为了探明TRFIA定量检测乙型肝炎标志物的临床意义，本文用TRFIA与ELISA同时检测845例临床诊断为乙型肝炎患者的乙型肝炎标志物，并对检测结果进行对比分析，结果报道如下。

1 材料和方法

1.1 标本来源 845例临床诊断为乙型肝炎患者均来自本院的肝炎科门诊。

1.2 试剂 上海新波生物技术有限公司生产的乙型肝炎表面抗原（HBsAg），抗-HBs，乙型肝炎表面e抗原（HBeAg），抗－HBe，抗-HBc定量检测试剂盒；英科新创（厦门）科技有限公司生产的ELISA法定性检测乙型肝炎标志物试剂盒；卫生部临床检验中心提供的HBV血清学标志物质控品，批号为20110302。

1.3 仪器 上海新波生物技术有限公司SYM-B10型时间分辨荧光免疫分析仪及洗板机。雷杜RT-600酶标仪及DNX-9620全自动洗板机。

1.4 方法 TRFIA定量检测 HBV血清学标志物和ELISA法定性检测HBV血清学标志物，均严格按照试剂各自说明书的要求进行操作，并做好质量控制。

1.5 结果判定 ELISA法定性结果参照试剂说明书中的判定方法。TRFIA法检测的不同浓度标准品检测的结果：以HB－sAg＞0.2ng／mL，抗-HBs＞10mU／mL，HBeAg＞0.5PEIU／mL，抗-HBe＞0.2PEIU／mL，抗-HBc＞0.9PEIU／mL，判定为阳性，否则为阴性。

1.6 统计学方法 采用SPSS11.0软件统计分析，计量资料用x±s表示，配对资料用χ2检验。

2 结 果

2.1 本文资料显示 用TRFIA与ELISA对845例临床标本同时检测，两种方法的结果经配对χ2检验，HBsAgχ2＝0.02，P＞0.05；HBeAgχ2＝0.00，P＞0.05；抗-HBeχ2＝0.11，P＞0.05；抗-HBcχ2＝0.11，P＞0.05；除了抗-HBs外，其余的标志物用两种方法检测的结果比较均无统计学意义（P＞0.05），两种方法的符合率最低的都超过了90%，与文献报道一致［1－3］，见表1。

表1 两种方法检测阳性结果比较表（n＝845）

2.2 两种方法检出的指标模式有所不同。ELISA法只能检出传统的常见模式（HBsAg，HBeAg，抗-HBc，均阳性，俗称“大三阳”和 HBsAg，抗-HBe，抗-HBc，均阳性，俗称“小三阳”），而TRFIA法除了检测出常见的“大三阳”和“小三阳”外，还检测出了 HBsAg，抗-HBs，HBeAg，抗-HBe，抗-HBc，均阳性；HB-sAg，HBeAg，抗-HBe，抗-HBc，均 阳 性；HBsAg，抗-HBs，HBeAg，抗-HBe，均阳性；HBsAg，抗-HBs，HBeAg，抗-HBc，均阳性等四种不常见的模式。

3 讨 论

ELISA方法对乙型肝炎血清标志物的检测，只能是定性，无法检测到其浓度，给临床选择治疗方案和判断治疗效果带来诸多不便，而TRFIA能对乙型肝炎血清标志物进行定量，是检测乙型肝炎血清标志物的最大进步，将更有利于临床对乙型肝炎的预防和治疗。

TRFIA法比ELISA法具有更高的灵敏度。本文比对的845例标本中，有53例HBsAg低浓度的标本由TRFIA法检出，而ELISA法为阴性，它们的浓度均在0.25～0.62ng／mL之间。

抗-HBs的定量测定能够对抗体是否真正具有“中和”HBV的免疫力作出正确评估，对乙型肝炎的预防起到监督作用。抗-HBs的含量在10mU／mL以上感染者ELISA检测即可呈阳性结果，但并不提示机体都一定具有免疫力，而抗-HBs的含量在10～100mU／mL之间的样本，定性虽为阳性，但此时机体对HBV的免疫力较弱，甚至不能预防HBV感染。只有抗-HBs的含量达到100mU／mL以上时才可确定具有抵抗HBV入侵的作用［4］。作定量检测，可根据抗-HBs的含量判断机体对HBV的免疫状态及乙肝疫苗的免疫效果。因此定量测定对乙肝疫苗免疫力的评介和高危人群预防免疫具有重要意义。

资料显示，HBV含量不仅能较好地反应HBV携带者的病毒血清水平和感染强弱程度，对动态观察治疗前后HBV含量变化以及评价和预测疗效均有重要意义［5］。因此，对乙型肝炎血清标志物进行定量检测和动态观察是临床观察疗效和判断预后的有效指标［6］。在治疗过程中，若 HBsAg和 HBeAg浓度降低，说明病情好转，治疗有效。如果治疗过程中HBsAg和HBeAg浓度不降反升，说明治疗无效或效果欠佳，应考虑更改治疗方案［7－8］。

总之，TRFIA法检测乙型肝炎标志物具有可定量、特异性强、灵敏度高等优点，临床可根据定量检测结果进行疗效判断和选择治疗方案，具有良好的临床应用价值。

［1］ 邓志峰，韦祖兴，刘行超，等.时间辨荧光免疫分析法定量测定乙肝两对半［J］.华夏医学，2007，20（1）：119-120.

［2］ 徐晓玲，陈芳.乙型肝炎两对半定量检测结果分析［J］.检验医学与临床，2011，8（8）：902-903.

［3］ 徐红珍，王露.两种方法检测乙肝血清学标志物的比较分析［J］.当代医学，2011，19（17）：30-31.

［4］ 马红霞，周运恒，杨蔺，等.ELISA法和电化学发光免疫法检测血清 HbsAg结果比较分析［J］.检验医学，2010，25（6）：473-474.

［5］ 贺云方.定性酶标测定与定量检测对乙肝两对半结果的影响分析［J］.医学信息，2011，6（3）：2283.

［6］ 李引钰.两种免疫分析法检测乙型肝炎的分析［J］.检验医学与临床，2011，8（3）：349-350.

［7］ 魏成翠，贾琳，刘阿玲.两种方法在乙型肝炎病毒检测中的应用比较［J］.临床和实验医学杂志，2009，8（5）：9-11.

［8］ 蔡军，刘晓丽.时间分辨荧光免疫分析法测定乙肝HB-sAg的临床意义［J］.山西医科大学，2011，42（5）：406-408.