舒郁散对慢性应激抑郁血清肾上腺皮质激素水平的影响*

赵桂景 李文娜 陈利平 王发渭 孙志高 许成勇

（解放军总医院海南分院，海南 三亚 572004）

应激是机体受到应激原负荷时出现的防御反应及适应过程。研究表明：当机体长期处于应激状态时，会出现神经、内分泌的功能改变［1］。长期如此，则导致HPA轴功能持续亢进，出现大脑海马区激素受体的表达过度引起海马神经元的损伤及其功能障碍，患者表现出情绪低落、抑郁、失眠、健忘等症状［2-3］。目前全球抑郁人口多达1.2亿人［4］。舒郁散是本院临床应用多年治疗抑郁症的有效验方，具有疏肝解郁，养心安神之功效。实验研究显示舒郁散具有抗抑郁作用，可调节抑郁大鼠脑神经递质、神经肽以及海马5-HT受体表达而发挥抗抑郁的作用［5-6］。笔者通过观察舒郁散对慢性应激抑郁模型大鼠行为、血清肾上腺皮质激素 （ACTH）、血浆皮质酮（CORT）、下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素（CRH）水平的影响，探索舒郁散治疗抑郁症的作用机理，为临床治疗提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 分组与造模 60只Wister大鼠 （解放军总医院医学实验动物中心提供，动物号为SCXK-京-2009-0007），体质量 180～220 g，先用敞箱（Open-Field）法作行为学评分［4］。选择得分相近的50只大鼠随机分为正常对照组、模型组、百忧解组、小剂量舒郁散组、大剂量舒郁散组，每组10只大鼠。模型组及各药物组大鼠进行21 d的慢性不可预见性应激刺激建立慢性应激抑郁大鼠模型［7-8］。正常对照组每笼饲养5只，其他组每笼饲养1只。

1.2 药品与试剂 舒郁散处方由中国人民解放军总医院中医科提供。由郁金15 g，枣仁15 g，栀子10 g，五味子6g，炙麻黄6g组成，上药浸泡、煎煮、过滤，于80℃恒温水浴中浓缩成含生药量5 g/mL药液，存冰箱备用，使用时蒸馏水稀释大鼠灌胃。百忧解胶囊（20 mg/次，礼来苏州制药有限公司分装，国药准字2006017）。甲醛、二甲苯及无水乙醇均为分析纯购自天津市华东试剂厂。大鼠CRH、ACTH、CORT放免试剂盒：北京北方生物技术研究所生产。

1.3 给药方法 舒郁散小剂量组含生药0.5 g/mL、舒郁散大剂量组含生药5.0 g/mL。大、小剂量舒郁散组，百忧解组的大鼠灌胃治疗，2 mL/次，每日1次，连续给药21 d。在各药物组灌胃同时，正常对照组每日灌胃生理盐水，2 mL/次，每日1次，连续灌胃生理盐水21 d。

1.4 标本采集与检测 各组动物于治疗后第22日腹腔静脉取血，血液在冰浴试管中静置30 min，4℃，3000 r/min，离心10 min，分离血清，保存在-70℃冰箱中，用放射免疫分析法测定，按试剂盒说明书操作。

1.5 open-field实验 采用open-field方法观察各组大鼠药物治疗前及治疗后2 min内行走路线及格子交叉点数的变化了解大鼠行为改变。敞箱装置由不透明材料制成，底面为76 cm×76 cm的正方形并被等分为25个等边方格，周围有高45 cm的周壁。将大鼠置于中心方格内，观察大鼠在3 min内水平穿越格数（三爪均进入的方格方可计数，为水平运动得分）、后肢直立次数（两前爪腾空或攀附墙壁方可计数，为垂直运动得分）。每只大鼠进行1次测定，每次3 min。分别于造模前，造模后，以及治疗结束后进行open-field实验测定，由2位观察者打分，取2人的均值。

1.6 统计学处理 应用SPSS12.0统计软件。数据进行正态性检验，计量资料以（x±s）表示，多个样本均数比较采用方差分析。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 各组大鼠治疗前后旷场活动的比较 见表1。结果显示，模型组大鼠水平运动与垂直运动次数明显少于正常对照组（P＜0.05），说明造模成功。百忧解组、大剂量舒郁散组的大鼠旷场活动次数明显多于模型组（P＜0.05）。

2.2 舒郁散对各组大鼠血清CRH、ACTH、CORT含量的比较 见表2。模型组大鼠的CRH、ACTH、CORT含量与正常对照组相比均明显增加（P＜0.05）。百忧解组CRH含量与模型组相比显著降低（P＜0.05）。大剂量舒郁散组ACTH、CORT含量与模型组相比，明显减少（P＜0.05）。其余治疗组指标与模型组相比虽有降低的趋势，但与模型组比较无显著差异（P＞0.05）。

3 讨论

抑郁症的发病病理机制非常复杂。研究认为，神经内分泌系统功能异常与抑郁症的发病密切相关，而促肾上腺皮质激素释放因子是在神经、内分泌调节过程中起关键作用的化学递质，下丘脑-垂体-肾上腺轴是通过促肾上腺皮质激素释放因子影响中间代谢和血压，平衡体内各器官对应激反应的活动，其他因子则通过促肾上腺皮质激素释放因子来达到其调节作用［9］。本研究采用慢性不可预见性应激抑郁模型，该模型不仅可模拟抑郁症的核心症状，同时存在HPA轴的亢奋，符合实验研究的要求［10］。本实验采用的是孤养与慢性轻度不可预见性应激抑郁相结合的抑郁模型，从发病学、临床表现和治疗学效应以及抑郁症的现代认识等方面均基本符合中医理论的慢性应激抑郁症。

表1 各组治疗前后旷场活动比较（±s）

表1 各组治疗前后旷场活动比较（±s）

与正常对照组同时间段比较，*P＜0.05；与模型组同时间段比较△P＜0.05。下同。

组 别 水平活动 垂直活动正常对照组 治疗前 38.23±12.84 21.29±6.72（n＝10） 治疗后 35.14±13.63 20.32±7.46模型组 治疗前 15.62±6.22* 19.53±7.42*（n＝10） 治疗后 17.34±8.76 8.94±3.76百忧解组 治疗前 16.21±7.64 20.21±6.64（n＝10） 治疗后 28.86±9.58△ 15.26±4.63△大剂量舒郁散组 治疗前 16.92±8.76 18.92±6.76（n＝10） 治疗后 26.23±8.84△ 14.78±3.44△小剂量舒郁散组 治疗前 17.86±8.58 19.86±7.58（n＝10） 治疗后 22.23±9.84 12.46±4.47*

表2 各组血清CRH、ACTH、CORT含量比较±s）

表2 各组血清CRH、ACTH、CORT含量比较±s）

组 别 n CRH（pg/mL）正常对照组 10 48.83±22.14模型组 10 80.65±26.82*百忧解组 10 55.24±17.63△大剂量舒郁散组 10 64.16±18.98小剂量舒郁散组 10 69.97±22.73 ACTH（pg/mL）CORT（nmol/L）35.79±23.61 41.19±16.79 64.29±20.14*73.53± 22.47*50.76±19.07 59.61±19.34 42.25±21.14△ 48.46±22.78△56.73±18.96 61.42±26.78

各种应激刺激都可使血中激素水平不同程度升高［11］。笔者研究也证实，长期的慢性刺激可导致大鼠肾上腺皮质激素过度分泌。本研究显示，舒郁散能改变慢性应激抑郁大鼠血清中CORT含量，明显降低CRH、ACTH激素的含量。百忧解仅能降低CRH的含量，百忧解在临床上广泛应用于抑郁，具有较好的疗效，百忧解为选择性的5-羟色胺摄取抑制剂，通过调节突触间隙单胺递质来发挥疗效［11］。本实验研究表明，舒郁散能有效改善抑郁症状，提高慢性应激抑郁大鼠神经肽及海马神经元5-HT表达［5-6］。抑郁症属于中医的郁证，治疗本病，实证以疏肝理气解郁为主，虚证宜养心健脾安神，在治疗上采用具有疏肝理气、养心解郁功效的中药舒郁散治疗抑郁症，该方具有调理心肝、疏肝理气、养心解郁之功效，本方对治疗抑郁症具有较好的疗效，其他文献也有报道［12-14］。

从本实验结果看，造模后大鼠血清CORT和ACTH含量明显升高，表明大鼠处于HPA轴亢进状态；中药治疗后血清CORT和ACTH含量显著降低，大剂量舒郁散可以改善大鼠抑郁旷场活动次数，说明中药舒郁散可以调节慢性抑郁大鼠体内ACTH及CORT浓度，这可能是其抗抑郁的作用机制之一。上述作用与其剂量呈正相关。说明中药舒郁散可以调节慢性抑郁大鼠体内ACTH及CORT浓度，这可能是其抗抑郁的作用机制之一。本研究仅观察舒郁散对慢性应激抑郁大鼠行为、激素含量变化，抑郁证的发病机理较为复杂，有关舒郁散的作用机理还有待进一步的研究。

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