HPLC测定枳术解郁胶囊中苍术素的含量

李松宾，王伟丽，朱明伟，高芳

(商丘市食品药品检验所，河南 商丘 476000)

HPLC测定枳术解郁胶囊中苍术素的含量

李松宾*，王伟丽，朱明伟，高芳

(商丘市食品药品检验所，河南 商丘 476000)

目的：建立枳术解郁胶囊的质量标准。方法：采用HPLC对枳术解郁胶囊中苍术素的含量进行测定。结果：枳术解郁胶囊中苍术素的含量在0.009 9～0.029 6 μg有良好的线性关系，r=0.999 9，平均回收率为99.31%，RSD=0.70%。结论：建立了枳术解郁胶囊的质量标准，该方法操作易行，稳定可靠，用于枳术解郁胶囊中苍术素的含量，可以用于该制剂的质量控制。

枳术解郁胶囊；苍术素；HPLC

枳术解郁胶囊是经批准生产的医院中药制剂[1](豫药制字Z05140089)，处方由枳实、苍术、苍耳、沉香等中药组成，有健脾胃，消痞满，行气解郁之功效，主要用于胸脘痞满、脘腹胀疼，嗳气以及慢性胃肠病等。该制剂质量标准只有薄层色谱鉴别，没有具体的定量控制方法。根据处方和药理作用确定苍术是枳术解郁胶囊的主药之一，苍术素为其有效成分，为保证制剂质量的稳定可靠，采用高效液相法对制剂中的苍术素进行了含量测定，以提高制剂标准。

1 仪器与试药

Agilent1260高效液相色谱仪；色谱柱Agilent-C18(150 mm×4.6 mm，5 μm)，AUW220D电子天平，苍术素对照品(中国食品药品检定研究院，批号：111924-201001，供含量测定用)，枳术解郁胶囊(商丘市中医院，规格：0.3 g/粒，批号：110801，111023，111121)。

2 方法与结果

2.1 色谱条件[2]

Agilent-C18色谱柱(150 mm×4.6 mm，5 μm)，流动相为甲醇-水(80∶20)，检测波长为240 nm，流速为1.0 mL·min-1，进样量为10 μL。理论塔板数按苍术素峰计算不低于5 000。

2.2 溶液制备

2.2.1 对照品溶液的制备 精密称取对照品苍术素，精密称定19.74 mg，置100 mL量瓶中，加甲醇溶解稀释至刻度，摇匀。再精密量取上述溶液2 mL，置100 mL量瓶中，加甲醇溶解稀释至刻度，摇匀，即得。

2.2.2 供试品溶液的制备[3]取重量差异项下供试品，混匀，精密称取1.0 g，置具塞锥形瓶中，精密加甲醇100 mL称定重量，加热回流1 h，放冷，并补足重量，摇匀，用0.45 μm 微孔滤膜滤过，取续滤液。

2.2.3 阴性对照品溶液的制备 除苍术外，其他各药按处方量投料，然后按2.2.2项下方法配制阴性对照品溶液。

2.3 系统适应性试验

取上述阴性对照溶液、对照品溶液、供试品溶液适量，注入高效液相色谱仪，记录色谱图，苍术素的保留时间为7.84 min，理论塔板数不低于9 000。HPLC图见图1。

2.3.1 线性关系考察 取3.948 μg·mL-1对照品标准母液溶液：精密量取母液10，15，20，25，30 mL分别置100 mL量瓶中，加甲醇溶解稀释至刻度，摇匀。再分别精密量取上述溶液50 mL，分别置100 mL量瓶中，加甲醇溶解稀释至刻度，摇匀，即配制不同浓度的对照品溶液，分别精密吸取10 μL注入液相色谱仪，测定，以苍术素峰面积为纵坐标，以苍术素进样量(μg)为横坐标，进行线性回归，得到回归方程：Y=1 981.4X-2.888，得苍术素线性范围0.009 9～0.029 6 μg，r=0.999 9。

A.阴性对照 B.苍术素对照品 C.样品图1 枳术解郁胶囊及对照品HPLC图

2.3.2 精密度试验 精密吸取供试品溶液10 μL,6次重复进样，测定各次峰面积，结果RSD=0.86%。

2.3.3 重复性试验 称取同一批供试品(批号：111023)，精密称定样品6份，照2.2.2项下方法制备，进样，测定，结果平均含量为0.211 2 mg·g-1，RSD=1.24%。

2.3.4 稳定性试验 取供试品溶液(批号：111023)，分别于0，1，2，4，8，12 h精密吸取10 μL,进样，测定，结果RSD=0.49%，表明供试品溶液在12 h内稳定。

2.3.5 加样回收率试验 取已知含量的样品共9份(批号：111023)，分别精密称取0.5 g，置锥形瓶中,分别精密加入3个高低浓度的苍术素对照品(以0.098 7 mg·mL-1苍术素对照品为母液)，照2.3项下方法制备，进样10 μL，测定，计算苍术素的加样回收率，结果见表1 。

表1 枳术解郁胶囊中苍术素的加样回收试验

2.4 样品含量测定

按上述含量测定方法，测定3批样品(批号为110801，111023，111121)中苍术素含量，测定结果见表2。

表2 枳术解郁胶囊中苍术素的测定(n=3) mg/粒

3 结论

在供试品制备的过程中，由于中药成分的多样与复杂性，曾考虑到其他样品对苍术的影响，比较了超声和回流[4-5]不同提取方法的提取，超声1 h，提取的苍术素的量仅为0.846 mg·g-1，提取不完全。同时比较了回流30 min，1 h，1.5 h，结果证明回流30 min，样品提取不完全，回流1 h和1.5 h提取效果差不多，所以本实验采取了加热回流1 h的提取方法。

通过实验研究，建立了枳术解郁胶囊制剂的质量定量控制方法，而且经方法学验证该方法稳定可靠，专属性较强，可为枳术解郁胶囊制剂质量定量控制提供依据。

[1] 河南省食品药品监督管理局.河南省医疗机构制剂标准[S].豫药制字：Z05140089.

[2] 国家药典委员会.中国药典[S].一部.北京：中国医药科技出版社,2010：150.

[3] 南洋,贾凌云,李倩，等.RP-HPLC法同时测定苍术中苍术素和白术内酯Ⅱ的含量[J].药物分析杂志,2010,30(1):17-20.

[4] 李伟,文红梅,崔小兵.HPLC法测定白术中白术内酯Ⅱ的含量[J].现代中药研究与实践,2005,19(5):35.

[5] 张金龙,秦昆明,徐自升，等.南北苍术炮制前后HPLC特征图谱及苍术素含量测定研究[J].科学技术与工程,2011,11(20):4843-4847.

DeterminationAtractylodininZhizhujieyuCapsulesbyHPLC

Li Song-bin*,WANG Wei-li,ZHU Ming-wei,Gao Fang

(ShangqiuInstituteforFoodandDrugControl,HenanShangqiu476000,China)

Objective： To establish a standard for determination atractylodin in Zhizhujieyu Capsules.Methods： Atractylodin in Zhizhujieyu capsules was determined by HPLC.Results: The linear range of atractylodin was 0.009 9 μg～0.029 6 μg,r=0.999 9.The average recovery of atractylodin was 99.31%,RSD=0.70%.Conclusion: The method is simple,sensitive and accurate,and can be used to determine atractylodin in Zhizhujieyu capsules and its quality control.

Zhizhujieyu capsules; Atractylodin; HPLC

2012-06-01)

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李松宾，男，主管药师，研究方向：药物分析，E-mail：weili1221@163.com