HPLC测定湘莲莲子心中莲心碱的含量△

吴梅青，陈丹

(湘潭职业技术学院，湖南 湘潭 411102)

HPLC测定湘莲莲子心中莲心碱的含量△

吴梅青*，陈丹

(湘潭职业技术学院，湖南 湘潭 411102)

目的：采用HPLC测定了6个不同产地的湘莲莲子心中莲心碱的含量。方法：色谱柱为ODS C18(250 mm×4.6 mm，5 μm)；流动相为乙腈-0.015 mol·L-1十二烷基磺酸钠-冰醋酸(56∶43∶1)；体积流量为1 mL·min-1；检测波长为282 nm。结果：莲心碱在质量浓度0.011 0～0.121 0 mg·mL-1与峰面积呈良好的线性关系，平均回收率99.14%，RSD=1.85%。湖南6个不同产地的湘莲莲子心生物碱的含量均在0.21%～0.32%。结论：测定的6个产地湘莲莲子心中莲心碱的含量均大于0.2%，符合《中国药典》2010版规定的要求，以产自湘潭的莲子心中莲心碱的含量最高，为0.32%。

HPLC法；湘莲；莲子心；莲心碱

莲子心为睡莲科植物莲NelumbonuciferaGaerth.的成熟种子中的干燥幼叶及胚根，具有清心安神，交通心肾，涩精止血的功能。用于热入心包，神昏谵语，心肾不交，失眠遗精，血热吐血[1]。莲子心中生物碱包括莲心碱、甲基莲心碱、异莲心碱等，是莲子心的主要药效成分[2]，具有降血压、抗心律失常、抗血小板聚集、抗脂质过氧化及清除自由基、抗癌等药理作用[3-5]。“湘莲”，又称寸三莲，在历史上被称为“贡莲”，种植历史悠久，产量高，质量优良，驰名中外，饮誉古今。采用HPLC测定6个不同产地湘莲莲子心中莲心碱的含量，对湘莲莲子心中莲心碱的含量进行了分析。

1 仪器与试药

1.1 仪器

高效液相色谱仪(岛津LC-10ATVP)；岛津SPD210Avp紫外可见检测器；分析天平(十万分之一，赛多利斯BP211D)。

1.2 试药

莲子心购于湖南各地，经鉴定为莲NelumbonuciferaGaerth.种子干燥的幼叶和胚根；莲心碱高氯酸盐对照品(批号：111686-201101，购于中国食品药品检定研究院)；水为超纯水；乙醇为95%医用乙醇；甲醇、乙腈为色谱纯，其余试剂均为分析纯。

2 方法和结果

2.1 色谱条件[1]

色谱柱为ODS C18(250 mm×4.6 mm，5 μm)；流动相为乙腈-0.015 mol·L-1十二烷基磺酸钠-冰醋酸(56∶43∶1)；体积流量为1 mL·min-1；检测波长为282 nm；温度为室温；进样量为10 μL。

2.2 溶液制备

2.2.1 对照品溶液 精密称取莲心碱高氯酸盐对照品11.000 0 mg，置50 mL量瓶中，加甲醇溶解并定容至刻度，制成0.220 0 mg·mL-1的对照品贮备溶液。精密吸取贮备溶液5 mL置10 mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，制成浓度为0.110 0 mg·mL-1的对照品溶液。

2.2.2 供试品溶液 取不同产地的莲子心粉末(过四号筛)适量，精密称定，精密加入2%盐酸甲醇溶液25 mL，称定重量，加热回流30 min，放冷，再称定重量，用2%盐酸甲醇溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液5 mL，置10 mL量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，用0.22 μm微孔滤膜滤过，取续滤液，即得。

2.3 系统适应性试验

分别吸取莲心碱对照品溶液及供试品溶液各10 μL注入液相色谱仪。在此条件下，莲心碱峰达到基线分离，理论板数以莲心碱峰计不低于5 000，HPLC图见图1、2。

图1 莲心碱对照品的HPLC图

图2 莲子心供试品溶液的HPLC图

2.4 线性关系考察

分别精密吸取2.2.1项下对照品溶液1，3，5，7，9，11 μL进样，测定峰面积。以峰面积Y为纵坐标，进样量X为横坐标进行线性回归，得回归方程:Y=1.4×106X+1 339.3，r=0.999 5。结果表明莲心碱在进样量范围内与峰面积呈良好线性关系。

2.5 精密度试验

精密吸取2.2.1项下莲心碱对照品溶液10 μL，按2.1色谱条件下，连续进样6次并测定峰面积，莲心碱的RSD=0.31%，结果表明仪器精密度良好。

2.6 重复性试验

取湘潭产寸三莲莲子心粉末6份，按2.2.2项下方法操作，在上述色谱条件下，各取10 μL进样，测定峰面积。计算得莲心碱的平均含量为0.32%，RSD=0.95%，结果表明该方法重复性好。

2.7 稳定性试验

精密吸取同一供试品溶液10 μL，按上述色谱条件，分别于制备后0，2，3，8，10，12 h进样，测定峰面积。计算得莲心碱RSD=1.04%，表明溶液中莲心碱在12 h内稳定。

2.8 加样回收率试验

称取已知含量的莲子心粉末(莲心碱含量为0.32%)0.5 g，精密称定，共6份，分别精密加入已知含量的莲心碱对照品贮备溶液5 mL，每份按2.2.2项下方法操作，在上述色谱条件下，各取10 μL注入高效液相色谱仪，依法测定，计算回收率，结果见表1。

注：莲心碱对照品加入量均为1.100 0 mg

2.9 样品含量测定

分别精密吸取各供试品溶液10 μL注入高效液相色谱仪，记录色谱峰面积，计算莲子心中莲心碱的含量。6个不同产地的莲子心中莲心碱的含量测定结果见表2。

3 讨论

文中采用高效液相色谱法对湘莲莲子心中的莲心碱碱含量进行了测定。湘莲品种主要有湘潭寸三莲、杂交莲，华容荫白花，汉寿水鱼蛋，耒阳大叶帕，桃源九溪江、衡阳的乌莲等。经测定，6个不同产地的湘莲莲子心中莲心碱的含量均大于0.2%，符合《中国药典》2010版规定的要求。6个产地的莲子心中莲心碱的含量相差不大，其中湘潭产莲子心中莲心碱的含量最高，为0.32%。

在对莲子心进行含量检测时，《中国药典》2010版规定是以莲心碱含量作为莲子心质量控制的指标，但是莲子心异莲心碱、甲基莲心碱同样具有明确的药理作用[6-7]。从6个供试品的谱图中可以看出莲子心中异莲心碱和甲基莲心碱的峰面积都要大于莲心碱的峰面积。如果能以莲心碱、异莲心碱、甲基莲心碱的总含量共同评价莲子心的质量，将能更全面地评价莲子心质量。

[1] 国家药典委员会.中国药典[S].一部.北京:中国医药科技出版社，2010:256-257.

[2] 何晓娟，孙长海，于江华，等.HPLC测定不同产地莲子心中莲心碱、异莲心碱、甲基莲心碱[J].中草药，2010，41(5)：834-836.

[3] 张弦，潘扬.植物莲中生物碱类成分的研究概况[J].南京中医药大学学报(自然科学版)，2002，18(6)：382-384.

[4] 谢纲，曾建国.莲子心的主要成分和药理作用研究进展[J].湖南中医药大学学报，2007，13(8)：384-386.

[5] 董兰，郑申声，陈昌国.莲心总碱的提取分离及其抗氧化性研究[J].食品工业科技，2011，7(21)：329-331.

[6] 陈灵骏，罗顺德.莲心碱抗血小板聚集和抗凝血作用[J].中国医院药学杂志，2011，31(15)：1257-1259.

[7] 唐小卿，曹建国.甲基莲心碱的药理作用[J].中国药理学通报，2004，20(1)：8.

DeterminationofLiensinineinPlumulaNelumbinisfromHunanProvincebyHPLC

WU Mei-qing*，CHEN Dan

(XiangtanPolytechnicalCollege，Xiangtan411102，China)

Objective:To determine Liensinine in Nelumbinis Plumula from six different areas of Hunan province by HPLC method.Methods：The ODS C18(250 mm×4.6 mm，5 μm)column was used with the mobile phase of acetonitrile-0.015 mol·L-1Sodium dodecylsulphate-acetic acid(56∶43∶1)at detection wavelength of 282 nm.The flow rate is 1 mL·min-1.Results：The linear ranges of liensinine was 0.011 0 ～ 0.121 0 mg·mL-1.The average recovery was 99.65%，and RSD was 0.76%.The Liensinine content in Nelumbinis Plumula from six different areas were 0.21%～0.32%.Conclusion：The Liensinine content in Nelumbinis Plumula from six different areas were all > 0.2%，according with the regulation of Chinese Pharmacopoeia which was published in 2010.The liensinine in Nelumbinis Plumula from Xiangtan was 0.32% and it was the highest in the six samples.

HPLC； Hunan lotus； Plumula Nelumbinis； Liensinine

2013-02-15)

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湖南省教育厅基金研究项目(11C1256)

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吴梅青，E-mail:wmq0519@sina.com