金威消石颗粒对小鼠镇痛作用的研究△

杨中良，杨秀云，胡庆禧，曲晓璐，李剑，刘卫东*

(1.上海市浦东新区浦南医院 重症监护室，上海 200125；2.上海市浦东新区浦南医院 中西医结合科，上海 200125；3.浙江省立同德医院 内科，浙江 杭州 310012；4.上海市蓝十字医学科学研究所，上海 200125)

金威消石颗粒对小鼠镇痛作用的研究△

杨中良1，2，杨秀云3，胡庆禧2，曲晓璐2，李剑4，刘卫东4*

(1.上海市浦东新区浦南医院 重症监护室，上海 200125；2.上海市浦东新区浦南医院 中西医结合科，上海 200125；3.浙江省立同德医院 内科，浙江 杭州 310012；4.上海市蓝十字医学科学研究所，上海 200125)

目的：探索金威消石颗粒对小鼠痛阈值的影响及对醋酸致小鼠扭体反应的作用。方法：ICR小鼠60只随机分入金威消石颗粒低、中、高剂量组、阳性药组和对照组，分别经胃灌注不同剂量金威消石颗粒、双氯芬酸钠溶液和蒸馏水，以平板法检测各小鼠给药前及给药后1,2,3,5 h的痛阈值。另取ICR小鼠60只，随机分入上述5组，以上法经胃灌注上述液体，每日1次，连续7 d。于末次给药后1 h，各小鼠由腹腔注射0.7%醋酸溶液0.2 mL，计数注射后20 min内各小鼠的扭体次数。结果：金威消石颗粒各剂量组在给药后2，3，5 h时的痛阈值均明显高于对照组(P<0.01)；各剂量组3 h和5 h痛阈值明显高于各组给药前基础痛阈值和1 h痛阈值(P<0.01)。金威消石颗粒各剂量组醋酸致小鼠的平均扭体次数均明显低于对照组(P<0.01)。结论：金威消石颗粒可提高ICR小鼠热板法痛阈值，减少醋酸致小鼠的扭体次数，具有明显的镇痛作用。

金威消石颗粒；痛阈值；扭体次数；镇痛作用

胆石症是临床常见病、多发病之一，在我国人群中的发病率达0.9%～10.1%[1]。目前胆石症的治疗仍以手术为主,但手术并发症发生率和再手术率均较高[2-3]。中药治疗胆结石有疏肝利胆、消溶结石、行气止痛等方法,具有疗效好、价格低廉、无毒副作用的特点[4-5]。但是，目前以现代科学手段对中草药特别是中药复方制剂的实验研究资料不多。金威消石颗粒是根据上海市浦东老中医胡伯禽先生60多年治疗经验组方制成的颗粒剂，临床试用显示其具有排石和镇痛作用。为量化评估金威消石颗粒的镇痛作用，本课题组研究其对小鼠痛阈值的影响及抗醋酸致小鼠扭体反应的作用。

1 材料与方法

1.1 动物

选择ICR小鼠120只，体重20～22 g。购自上海西普尔-必凯实验动物有限公司。合格证：SCXK(沪)2003-0002。

1.2 药物及试剂

金威消石颗粒由上海市时雨药业有限公司生产(批号：110413)，每包5 g。双氯芬酸钠片由上海医药(集团)有限公司信谊制药总厂生产(100 mg/片，批号：100201)，用时制粉，加蒸馏水并稀释成830 mg·L-1的溶液；醋酸由上海市凌峰化学试剂有限公司生产(批号：101207)，用时稀释成0.7%的溶液；蒸馏水。

1.3 方法

1.3.1 小鼠热板法痛阈值测定实验 取60只ICR小鼠，于实验前1 d用热板法对小鼠进行痛阈筛选，热板仪温度控制在(55.0+0.5) ℃，将小鼠放在热板上，记录小鼠第1次舔后足的时间，作为该小鼠痛阈值[1]。将痛阈值<5 s或>30 s的小鼠剔除后，对入选小鼠进行称重，随机分组，分为对照组(11只)、阳性对照组(10只)及金威消石颗粒低剂量(10只)、中剂量(11只)、高剂量组(11只)。禁食不禁水，次日测定各组小鼠的痛阈值，取前后2次平均值作为基础痛阈值。

低、中、高剂量组分别给予金威消石颗粒，加蒸馏水研磨并稀释成浓度为66.5,133.0,266.0 g·L-1的混悬液，临用前摇匀。20 mL·kg-1灌胃，给药剂量相当于1.33,2.66,5.32 g·kg-1，分别相当于成人每千克体重临床用量(0.53 g·kg-1)的2.5，5.0，10.0倍。阳性对照组给予双氯芬酸钠溶液，20 mL·kg-1(16.6 mg·kg-1)灌胃。对照组每天给予蒸馏水20mL·kg-1灌胃。分别于灌胃后1，2，3，5 h以平板法测定小鼠的痛阈值，痛阈值超过60 s，则以60 s计。

1.3.2 醋酸致小鼠扭体实验 取60只ICR小鼠，随机分入对照组、阳性对照组及金威消石颗粒低、中、高剂量组，每组12只小鼠。各组给药方法见1.3.1，5组均每天灌胃1次，连续7 d。

末次灌胃后1 h，各小鼠分别由腹腔注射0.2 mL的0.7%醋酸溶液，形成一个化学性刺激致痛模型，计数注射后20 min内小鼠的扭体次数，并计算抑制率[6]。

1.4 统计学分析

2 结果

2.1 不同剂量金威消石颗粒在不同时间点对ICR小鼠热板法痛阈值的影响

各组基础痛阈值差异无统计学意义(P>0.05)，高剂量组和阳性药组给药后1 h痛阈值均明显高于对照组(P<0.01)。金威消石颗粒不同剂量组及阳性药组在给药后2，3，5 h时的痛阈值差异均无统计学意义，但均明显高于对照组(P<0.01)。金威消石颗粒各剂量组和阳性药组1，2，3，5 h痛阈值均明显高于基础痛阈值(P<0.01)；金威消石颗粒低剂量组和阳性药组3 h和5 h痛阈值明显高于1 h痛阈值 (P<0.01)。详见表1。

表1 不同剂量金威消石颗粒对ICR小鼠热板法痛阈值的影响

注：与对照组比较，*P<0.01；与基础痛阈值比较，#P<0.01；与1 h痛阈值比较，△P<0.01；下同

2.2 金威消石颗粒对醋酸致小鼠扭体次数的影响

金威消石颗粒不同剂量组醋酸致小鼠的平均扭体次数，均明显低于对照组(P<0.01)，金威消石颗粒不同剂量组与阳性药组小鼠平均扭体次数无显著差异(P>0.05)，见表2。

表2 金威消石颗粒对醋酸致小鼠扭体次数的影响

3 讨论

胆结石分为胆固醇结石、胆色素结石和混合性结石，其产生症状主要取决于结石是否阻塞胆囊管，产生胆汁瘀积、感染[7-8]。中药在排除胆石、控制炎症、解除痉挛以及防止结石复发等方面疗效肯定[4-5]。金威消石颗粒是根据上海市浦东老中医胡伯禽先生60多年治疗经验组方制成的颗粒剂，临床试用显示其具有排石和镇痛作用。本课题研究观察金威消石颗粒对ICR小鼠平板法痛阈值及抗醋酸致小鼠扭体反应的影响，研究其镇痛作用，为今后临床推广提供可靠的理论依据。

金威排石颗粒组方以疏肝利胆为主，即以金钱草和延胡索为君药，有清热利湿和疏肝理气作用，以虎杖和威灵仙为臣药有保肝、利胆、排石作用；佐以枳实和人工牛黄有疏肝理气和利湿排石作用。其中延胡索为罂粟科植物延胡索的干燥块茎，具有疏肝、理气、止痛的功效，其主要成分延胡索乙素(1-THP)可抑制外周神经自发放电，进而抑制周围神经系统的疼痛[9]。枳实行气化滞，并可扩张胆管，有利于排石[10]。虎杖能明显提高小鼠的痛阈值，具有明显的抗炎镇痛作用[11]。威灵仙利胆排石,为排石佳品，具有明显的抗炎镇痛作用[12]。本研究表明，与对照组相比，不同剂量的金威消石颗粒均可以提高ICR小鼠的热板法致痛阈，降低醋酸致小鼠的扭体次数，提示其有明显的镇痛作用。金威消石颗粒的镇痛作用与双氯芬酸钠相似，两者差异无统计学意义。

总之，金威消石颗粒可提高ICR小鼠热板法痛阈值，减少醋酸致小鼠的扭体次数，具有明显的镇痛作用。

[1] 中国中西医结合学会消化系统疾病专业委员会.胆石症中西医结合诊疗共识[J].中国中西医结合杂志，2011，31(8)：1041-1043.

[2] 王蒨,孙百军,李东华,等.中药利胆灵对胆色素结石患者引流胆汁中胆汁酸的影响[J].天津中医药,2007,24(2)：110-113.

[3] 马玉红,李栩.温针法治疗胆石术后尿潴留的临床体会[J].天津中医药,2007,24(1)：29.

[4] 王恒杰,郭吕.中药对胆石症患者胆汁成分影响的研究进展[J].辽宁中医药大学学报,2010,12(9)： 213-215.

[5] 左予桐,高文远,贾伟,等.中药防治胆石症的研究进展[J].中国中药杂志,2004,29(9)： 14-16，93.

[6] 丰艳梅,车晓侠. 复方虎杖烧伤凝胶抗炎镇痛作用实验研究[J]. 中国药师, 2010,13(5)：620-622.

[7] Wang DQ, Cohen DE, Carey MC. Biliary lipids and cholesterol gallstone disease[J]. J Lipid Res，2009，50：S406-411.

[8] Venneman NG, Van Erpecum KJ. Pathogenesis of Gallstones[J]. Gastroenterol Clin N Am，2010，39(2)：171-183.

[9] 杜兰芳,杜永平,徐晖,等.延胡索乙素对大鼠外周神经疼痛作用的实验研究[J].中国中医急诊,2009,18(5)：781-783.

[10] 张红,孙明江,王凌.枳实的化学成分及药理作用研究进展[J].中药材, 2009,32(11)：1787-1790.

[11] 杨溪琳.虎杖的现代药用研究[J].中国社区医师,2008,10(17)：24.

[12] 周薇,唐乾利,赫军,等. “大黄灵仙汤”治疗胆石症29例临床观察[J].江苏中医药,2008,40(6)：44-45.

AnalgesicEffectofJinweiLithiasis-eliminatingGranulesinMice

YANG Zhong-liang1，2,YANG Xiu-yun3,HU Qing-xi2,QU Xiao-lu2,LI Jian4,LIU Wei-dong4*

(1.Dept.ofICU,ShanghaiPunanHospitalofPudongNewDistrict,Shanghai200125,China;2.Dept.ofIntegratedTraditionalandWesternMedicine,ShanghaiPunanHospitalofPudongNewDistrict,Shanghai200125,China;3.Dept.ofInternalMedicine,TongdeHospitalofZhejiangProvince,Hangzhou310012,China;4.ShanghaiBlueCrossReasearchInstituteofMedicalScience,Shanghai200125,China)

Objective：To explore the influence of Jinwei lithiasis-eliminating granules on the pain threshold of mice and its effect on torsion numbers of acetic acid-induced mice.Methods:Sixty ICR mice were randomly distributed to three pilot groups(low-,middle-and high-dose group),positive drug group and control group.Aqueous solutions containing Jinwei lithiasis-eliminating granules(1.33,2.67,5.32 g·kg-1),diclofenac sodium tablet(16.6 mg·kg-1)and isovolemic distilled water were perfused by stomach for corresponding mice,respectively,and plate method was used to measure the pain thresholds of mice before and 1,2,3,5 h after stomach perfusion in each group.Another 60 mice were randomly distributed to the above-mentioned groups and managed by the same stomach perfusion,once daily,for 7 d.Each mouse was injected intra-peritoneally 0.2 mL of 0.7% acetic acid solution 1 h just after the final perfusion,and the torsion numbers of all mice during post-injection twenty minutes’ period was counted.Results:The mean pain thresholds of mice 2,3,5 h after stomach perfusion were significantly higher in three pilot groups than that in control group(P<0.01),whereas no significant difference when compared to positive drug group(P>0.05).The mean pain thresholds of mice 3 h and 5 h after stomach perfusion were significantly higher than those before and 1 h after stomach perfusion in the pilot groups(P<0.01).The mean torsion numbers of mice in three pilot groups were less than that in control group(P<0.01),no significant difference existed in the mean torsion numbers of mice between three pilot groups and positive drug group(P>0.05).Conclusion:Jinwei lithiasis-eliminating granules could increase the pain threshold of ICR mice by plate method and decrease the torsion numbers in acetic acid-induced mice,implying a considerable analgesic effect.

Jinwei lithiasis-eliminating granules;Pain threshold;Torsion number;Analgesic effect

2012-11-23)

△

上海市卫生局中医药开发研究基金(2011XY011)

*

刘卫东，E-mail：liuwdpn@tom.com