猪圆环病毒2型引起急性肺水肿新症状

许瑞

（驻马店市动物疫病预防控制中心，河南驻马店 463000）

猪圆环病毒2型引起急性肺水肿新症状

许瑞

（驻马店市动物疫病预防控制中心，河南驻马店 463000）

猪圆环病毒（PCV）是迄今发现的最小动物病毒之一，现已知PCV有两个血清型，即PCV-1和PCV-2。PCV-1为非致病性的病毒，PCV-2为致病性的病毒。PCV-2是断奶仔猪多系统衰竭综合征（PMWS）的主要病原，PMWS最早发现于加拿大。最近在美国有学者报道，猪圆环病毒出现一种新的表现症状，称为急性肺水肿型(APE），它主要影响刚出生和刚断奶的小猪，死亡率可达20%，临床症状包括急性呼吸困难随后导致迅速死亡，有的猪通常死亡前未见任何临床症状。下面笔者就在美国发生的急性肺水肿型圆环病毒病做一下介绍，供大家参考。

一、APE猪的主要临床症状和病理学变化

2009年，有学者报道，在美国中西部，免疫过圆环2型疫苗的猪出现了急性肺炎症状，主要发病猪为刚出生和刚断奶的小猪。临床症状包括急性呼吸困难、喘气，随后导致迅速死亡，皮肤也没有变化，有的猪通常死亡前未见临床症状。我们知道，一般情况下猪圆环病毒2型（PCV-2）与猪群中发生的许多疾病密切相关，主要引起断奶仔猪多系统衰竭综合征（PMWS）、猪皮炎与肾病综合征（PDNS）、断奶猪和育肥猪的呼吸道病综合征（PRDC）、幼龄仔猪的先天性震颤等疾病，统称为圆环病毒相关疾病（PCVAD），同时可造成免疫抑制。而这种急性肺炎导致迅速死亡的现象很容易与其他呼吸道病相混淆，进而造成误诊。

解剖APE猪，其病理变化主要为肺部病变，显示胸腔充满清亮的积液，肺部潮湿和厚重， 呈现中度或重度的小叶性肺炎，大部分呈现大叶性肺炎，有的肺有片状出血(图1A）。肺的显微镜检查显示小叶内膈叶弥漫性水肿膨胀，从而导致肺水肿的出现，肺间质中有大量巨噬细胞和淋巴细胞浸润，血管壁坏死破裂(图1B），周围间隙是导致肺水肿的原因(图1C）。多数感染猪淋巴系统衰竭，个别有鼻炎症状。

二、为什么说APE症状是由PCV-2病毒引起

Cino-Ozuna等调查了堪萨斯和内布拉斯加州相隔不少于200米的8个农场，发现在其中四个农场7周龄和14周龄的猪均出现了APE症状，其中7周龄的保育猪临床症状非常明显。用PCR和免疫组织化学诊断方法来确诊圆环病毒2型感染。结果显示在同一农场的同一群猪中呈现急性肺炎的猪和无临床症状猪的数量几乎相等。所有急性肺炎猪群血清和组织中PCV-2呈阳性。不同的PCR检测包括oligo核酸探针针对PCV2a和PCV2b的检测发现PCV2b是优势基因型，而且肺、淋巴结和脾等各组织匀浆的PCR循环低至7个循环，说明PCV-2还在猪群中大量存在。相反，无临床症状的猪群的13份血清样本中仅2份PCV-2阳性，PCV-2病毒在急性肺炎和无临床症状猪群之间有明显的不同。PCV-2病毒大量存在于急性肺炎猪群，且在肺和淋巴结免疫组织化学反应阳性得到进一步确诊。另外在肺血管内壁单核细胞的细胞质中可以观察到PCV-2抗原，且在血管内皮细胞中也可以观察到PCV-2抗原(图1D）。病毒蛋白在内皮细胞核的定位表明其可能是病毒复制的活性部位。

有人利用免疫荧光法对PCV-2特异性抗体进行检测(IFA），其中所有的猪均注射圆环病毒2型疫苗，免疫荧光法不能区分注射疫苗产生的抗体和野毒感染产生的抗体，但是，急性肺炎猪的抗体有很重要的特征，例如，9份急性肺炎猪中有5份检测不到抗体，提示我们，急性肺炎猪任何PCV-2型抗体不管来自母源抗体或者疫苗源抗体都缺失。

图1 APE猪的解剖学和显微镜组织学特征。A：急性死亡猪的胸腔内含有大量的积液，肺部明显水肿，淤血，出血。B：肺薄膜用苏木精-曙红染色。表示肺间质有巨噬细胞、淋巴细胞、浆细胞浸润和动脉管壁平滑肌纤维素样坏死。C：肺水肿的肺薄片的组织苏木精-伊红染色。呈现明显的周围动脉扩张（箭头）。D：肺的PCV-2抗原免疫组织化学染色。动脉管腔内许多细胞（单核细胞）的细胞质染色和动脉壁内皮细胞核染色（箭头）。

除了圆环病毒之外，作为辅助因子，Cino-Ozuna等还调查了其他几种病毒（猪蓝耳病病毒PRRSV、猪巨细胞病毒PCMV、猪输血传播病毒TTV、猪流感病毒SI等）。猪蓝耳病病毒是一个常见的与正在感染和严重感染PCVAD的病例相关的病毒，尽管在Cino-Ozuna调查的其中一农场曾经有过蓝耳病史，但蓝耳病毒PCR诊断和血清学检测显示所有急性肺炎猪群蓝耳病毒阴性，另外，四个感染APE的农场有两个场整体蓝耳病毒阴性。猪鼻炎的存在暗示PCMV的可能性，Hamel等报道，血清和组织样本的PCMV的PCR检测显示PCMV（猪巨细胞病毒）在APE猪和无临床症状的猪群之间的流行情况无明显的差别。近年来，猪输血传播病毒TTV病毒被认为与圆环病毒相关疾病具有协同作用。Segale，s等PCR检测TTV-1和TTV-2显示TTV阳性率在APE猪和无临床症状的猪群中基本相同。猪流感的临床症状的缺失与APE感染猪鼻腔试纸的阴性结果可以排除猪流感的可能性。其他普通病毒的结果相似，显示与APE没有明显关系。

三、APE发生原因的探讨

1.PCV-2基因突变。为什么免疫过圆环病毒2型的猪还会发生急性肺炎？一个可能原因是PCV-2衣壳蛋白基因突变从而逃离了抗体的保护。从同一农场的4个急性肺炎猪的PCV-2的ORF2的肽链序列是从组织病料进行PCR扩增而得，这4个PCR扩增产物测序序列基本相同，仅有一条序列第30位氨基酸由V变成了L，其中一条急性肺炎病例的PCV-2的ORF2的肽链序列D71923，与在美国中西部2005-2006年暴发PCVAD时分离的11条具有代表性的堪萨斯序列相比很相似，并且与其中四条237-A，237-C，237-D，和D-28-1序列完全相同。因此，与APE相关的圆环病毒2型是在该区域一段时期内流行的代表性病毒，也很容易启发我们想到可能PCV-2其中某个蛋白基因的突变就有可能脱离保护或者引起新的症状。

2.猪圆环病毒2型疫苗的广泛使用。PCV-2是一种在环境中普遍存在的病毒，各生长阶段的猪都易感，后备母猪在6～8周龄后进行最后一次PCV-2疫苗免疫，抗体水平逐渐消退，分娩时，初乳中母源抗体的低水平就不能充分地保护新生仔猪 PCV-2感染。在PCV-2疫苗发挥作用之前，新生仔猪可以被在母猪繁殖之前一定程度的自然感染产生的母源抗体保护。因此，APE可能是一个意想不到的由于PCV-2疫苗的广泛使用而导致的后果。

四、如何预防APE的发生

PCVAD被描述为育肥猪的慢性渐进性最终衰竭死亡的传染性动物疾病，肺水肿是由圆环病毒2型导致的免疫抑制或者功能障碍从而引起典型的细菌继发感染或者病毒感染的结果。相反，APE猪死亡率的传播很快速，容易感染健康猪， APE更容易感染年幼猪，不与其他的传染性疾病相关，其发病机理起初是年幼猪肺内单核细胞和血管壁内皮细胞内有大量病毒增殖，导致机体更易感染并且有助于更高水平的病毒复制，感染常发生于接种疫苗之前的仔猪，在缺乏母源抗体保护水平的情况下，APE易感猪体内缺乏相应的抗体保护水平，而在免疫之前感染。所以，一种使幼猪避免APE的方法是早期免疫。另一种方法是做好繁殖动物的抗体跟踪监测，当PCV-2特异性抗体水平低的时候进行及时补免和补防来提高和改善。

另外就是适合本场科学合理的免疫程序，不要千篇一律，照搬照抄，否则会适得其反，达不到相应的预防疾病的效果，浪费人力、物力和财力；还有至关重要的一点就是做好日常饲养管理工作，这也是一种预防的方法，不能忽视，把工作做在平时，对防制工作很重要。以下是防制中的几个具体建议。

1.加强饲养管理。降低饲养密度，实行严格的全进全出制和混群制度，减少环境应激因素，控制并发感染，保证猪群具有稳定的免疫状态，加强猪场内部、外部的生物安全措施，购猪时保证猪只来自清洁的猪场是预防控制本病、降低经济损失的有效措施。

2.做好猪主要传染病的预防免疫和免疫效果监测。虽然APE与其他传染病无明显的联系，但PCV-2与其相关猪病的发生还需要另外的条件或共同因素才能诱发临床症状，且常见于与其他病毒病或细菌病混合感染时。所以目前世界各国控制本病的经验是做好适当的主动免疫和被动免疫，做好猪场猪瘟、猪伪狂犬病、猪细小病毒病、气喘病和蓝耳病等疫苗的免疫接种，确保胎儿和吮乳期仔猪的安全是重中之重。一般规模猪场各方面免疫做的还都比较好，有些大型猪场和种猪场免疫效果的跟踪监测做的也很好，主要还是一些散养户和小规模的猪场做的不够，也很容易发生疾病，这方面要引起注意。

3.人工被动免疫和自家疫苗的使用。可采取血清疗法。从猪场的育肥猪采血(健康的淘汰种猪血最好），分离血清，给断乳期的仔猪腹腔注射，最好是本场内的猪，这种方法见效快，立竿见影。猪场一旦发生本病，可把发病猪的内脏加工成自家疫苗，据临床实践，效果不错。但要注意灭活要彻底，保证其安全性，以免散毒。

4.“感染”物质的主动免疫。“感染”物质指本猪场感染猪的粪便、死产胎猪、木乃伊胎等，用来喂饲母猪，尤其是初产母猪在配种前喂给，能起到较好的效果。如有一定抗体的母猪在怀孕80 d以后再作补充喂饲，则可产生较高免疫水平，并通过初乳传递给仔猪。这种方法，不仅对防制本病、保护胎猪和吮乳仔猪的健康有效，而且对其他肠道病毒引起的繁殖障碍也有良好的效果。但使用本法要十分慎重，如果场内有小猪会造成人工感染。

5.药物预防。预防性投药和治疗，对控制细菌源性的混合感染或继发感染，是非常可取的，但注意要适当投药，不能滥用药以免造成细菌耐药性的产生。

备注：本文编译自《Character ization of a New Disease Syndrome As sociated with Porcine Circovirus Type 2 in Previously Vaccinated Herds》A da G. Cino-y， Richard Hesse. C linical Veterinary Microbiol.[J] ，May 2011; 49: 2012 - 2016.