Bio-Oss结合Bio-Gide修复牙槽临界骨缺损的效果

李 晋 王秉新 (武警总医院临床教研室，北京 100039)

很多口腔急症都会造成牙列或牙槽骨局部缺损，或长期牙缺失等造成牙槽嵴吸收变窄变平，使修复治疗及正畸治疗难以实施，严重影响患者的生活质量和心理健康〔1〕。重建缺损牙槽突的方法主要有自体骨移植、引导性骨组织再生、牵引成骨等。近年来，应用具有骨诱导性、骨传导性以及骨生成性的植入材料充填骨缺损，引导骨再生已成为研究的热点〔2，3〕。Bio-Oss骨粉是一种自体骨替代物质及骨组织再生支架，是很好的骨移植材料，而Bio-Gide膜是一种可吸收生物膜，被宿主吸收不需取出，为骨细胞提供附着载体，不仅利于成骨，而且能够加速骨缺损愈合〔4〕。两者联合应用，对骨缺损及再生有积极促进作用。本实验通过动物自身对照，观察Bio-Oss/Bio-Gide在兔下颌牙槽骨临界骨缺损修复中的成骨效果。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 动物 健康成年新西兰大白兔8只，雌雄各半，体重2.0～2.7 kg，4～6月龄，由兰州大学医学实验中心提供。

1.1.2 药品及试剂 Bio-Oss骨粉，Bio-Gide骨膜(北京雅特盛邦科技有限公司);无水CaCl2分析纯(北京天然生物有限公司);3.8%枸橼酸钠(北京康普汇维科技有限公司);速眠新Ⅱ(北京丰台区动物卫生监督所);利多卡因(山东华鲁制药有限公司)。

1.2 方法

1.2.1 建立兔下颌牙槽骨临界骨缺损模型 动物称重，以速眠新Ⅱ按0.30 ml/kg的剂量，肌肉注射麻醉。常规消毒，铺巾，于下颌第一磨牙近中牙槽嵴顶及颊舌侧局部麻醉，暴露下颌第一磨牙牙颈部及近中牙槽嵴顶骨质，高速涡轮牙钻机钻骨，使骨段恰好分离，撬断骨连续，大约深6 mm，去骨完成后，消除尖锐骨嵴，使其平整，手术形成长×宽×高为5 mm×4 mm×6 mm的骨缺损〔5，6〕。整个手术过程严格无菌操作，防止感染。

1.2.2 分组及干预 采取自身对照，随机选择一侧下颌骨，以Bio-Oss/Bio-Gide修复骨缺损为实验侧;另外一侧只给予生理盐水不进行修复设为对照侧。实验侧:先给予Bio-Oss骨粉混合(约0.05g/术区)，形成凝胶状，再覆盖 Bio-Gide骨膜约6 mm×6 mm，覆盖范围超出骨缺损边缘2 mm以上〔7〕，褥式缝合固定骨膜，间断缝合牙龈。对照组给予等量的生理盐水同上方法及步骤植入缝合。

1.2.3 术后处理 连续1 w给予青霉素40万单位，肌肉注射，1次/d预防感染。观察感染状况，因两侧下颌骨均有创伤，对照观察创伤恢复状况，适量给予流质饮食，持续1～2 w，视其饮食及创伤恢复情况，再恢复正常喂食。

1.2.4 标本采集与处理 于分别于1、4、7、10 w处死动物，每个时间点各处死2只，取下颌植骨区包括周围牙齿、牙龈，10%甲醛溶液固定，常规脱钙，脱水，石蜡包埋，连续切片，行苏木精-伊红染色，光镜下观察牙周缺损愈合情况。

1.2.5 观察指标 定性分析:新骨形成组织学观察，植骨材料的吸收降解情况。定量分析:随机取2张切片选择3个视野，测定两组新骨形成面积占视野总面积的百分比。

1.3 统计学方法 应用SPSS13.0软件进行分析，数据资料以±s表示，采用t检验。

2 结果

2.1 大体标本观察 新西兰大白兔均存活，直到观察点处死。缺损区软组织愈合均良好，两侧均未见感染及糜烂。实验侧2只Ⅰ级愈合，1只Ⅱ级愈合，1只Ⅲ级愈合，对照侧2只Ⅱ级愈合，2只Ⅲ级愈合。

2.2 Bio-Oss、Bio-Gide修复前后临界骨缺损模型改变 实验建立的临界骨缺损模型，对照组自行修复11 w后，缺损区只见短而小的骨小梁，骨髓腔弥散稀薄，甚至局部缺如，未形成骨桥连。见图1a。Bio-Oss/Bio-Gide修复术后1 w，可见复合材料周围有一薄层新骨，成骨细胞排列规则有序，纤维结缔组织包绕的新骨和骨粉颗粒明显可见，成骨活跃(图1b);术后4 w时，较对照侧新骨形成多，成骨细胞多见，成骨活跃(图1c)。术后7 w时，新骨形成逐渐增多，骨边缘规则，骨小梁连接成网状结构，植骨材料逐渐减少，吸收边缘可见(图1d);术后10 w时，大片的骨组织形成，骨板排列更加规则，且血供丰富，植骨材料可见更少，吸收更多(图1e)。

2.3 缺损区组织形态学计量结果 实验侧每个时间的新生骨面积百分比均大于对照侧(P＜0.01)，且随时间延长，新骨生成逐渐增多。见表1。

图1 Bio-Oss、Bio-Gide修复前后临界骨缺损模型

表1 实验侧和对照侧新生骨面积百分比(%，±s)

表1 实验侧和对照侧新生骨面积百分比(%，±s)

修复时间 实验侧 对照侧 P值1 w 10.23±1.46 7.17±0.94 ＜0.01 4 w 16.28±1.31 12.43±0.98 ＜0.01 7 w 21.45±1.27 16.01±1.03 ＜0.01 10 w 26.33±1.64 20.35±1.12 ＜0.01

3 讨论

骨量充足不仅能满足口腔美学的要求，还为种植体提供了生物力学方面的支持。为解决种植区骨量不足问题，临床多采用自体骨移植、同种异体骨移植和异种骨移植来补充植骨区的骨量不足〔8，9〕。但不论是自体骨移植还是异体骨移植均有一定缺陷，如自体骨移植来源有限、异体骨移植会存在骨缺损区排斥反应等。因此，目前诱导成骨成为口腔临床医学研究的热点〔10〕，在新骨形成的同时，诱导材料逐渐被生新骨取代，与宿主相容。

大量研究表明，Bio-Oss骨粉的多孔状结构能为新骨生长提供良好的空间支架，对维持间隙起重要作用。Bio-Oss骨粉是冻干的小牛骨通过脱有机质制成，具有良好的生物相容性，已成为公认的良好的骨替代材料以及组织工程支架材料〔11〕。而Bio-Gide骨膜是一种胶原可吸收膜，在骨缺损部位具有引导组织再生功能及骨修复和膜屏障的双重作用，对重建的组织起支持作用，引导骨再生〔12〕。本实验选择 Bio-Oss骨粉结合 Bio-Gide骨膜，修复骨缺损，诱导骨再生，正是利用了Bio-0ss骨粉作为骨移植材料填充拔牙窝及骨缺损区，利用Bio-Gide膜可吸收性并诱导新骨形成的两大优势，很好地解决了牙槽骨的缺损和修复。目前，也有一些实验将一些生长因子与Bio-Oss/Bio-Gide或骨形成蛋白+Ⅰ型胶原+天然珊瑚等混合后对牙槽组织进行修复，利用复合材料的协同性可能更利于新骨的成长。

总之，Bio-oss/Bio-Gide复合材料修复牙槽骨的损伤，具有良好的生物组织相容性，并具有刺激骨再生、诱导成骨的效果，为口腔临床种植牙缺损提供了良好前景，但骨种植区的感染或相关不良反应还有待于进一步长时间的观察。

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