附子与人参不同比例配伍对急性心衰大鼠神经—体液因子的影响

李玉梅,张 超,王楚盈,刘 佳,赵庆峰,张大方

(长春中医药大学,长春 130117)

心力衰竭是一种严重的心脏疾病,神经内分泌因素如儿茶酚胺、血管紧张素Ⅱ、内皮素、细胞因子水平等增高是加重血液动力学紊乱,毒害心肌细胞的重要因素之一。本研究将探讨不同比例附子与人参配伍对急性心衰大鼠血浆N 终端脑钠素前体(NT-proBNP)、心钠素(ANP)及血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)的影响。

1 实验材料

1.1 实验动物 Wister 大鼠,体质量240～260 g,吉林大学基础医学院实验动物中心提供,合格证号:SCXK(吉)-2011-0004;饲养条件:室温(22±2)℃,湿度40%～60%,动物自由进食及饮水,自然昼夜节律。

1.2 实验仪器 16 道生理记录仪MP-150 系统(美国Biopac 公司);MP-2003 注射泵(上海雷恩医疗器械有限公司);小动物呼吸机HX-300S(成都泰盟科技有限公司)。

1.3 实验药物与试剂 附子(黑顺片)、人参药材购于长春宏检药业;参附注射液(阳性对照药),雅安三九药业有限公司,专利号:ZL96117458.7,批号:100513,规格:10 mL/支;戊巴比妥钠,上海爱紫特生物科技有限公司批号: 100808;乌拉坦,国药集团化学试剂有限公司,批号:T20 090811;NT-proBNP、ANP、AngⅡ试试盒:北京伊普瑞斯科技有限公司。

2 实验方法

2.1 造模及给药分组 取健康Wister 大鼠64 只,雌雄各半,体质量240～260 g,随机分成空白对照组(KB)、模型对照组(MX)、参附注射液阳性对照组(YX)、附子组(FZ)、人参组(RS)、附子∶人参=1∶0.5组(FR1∶0.5)、附子∶人参=1∶1组(FR1∶1)、附子∶人参=1∶2组(FR1∶2),每组各8 只。参照文献[1]方法,进行左心室插管,记录各组LVSP、左室最大上升速率(+dp/dtmax)、左室最大下降速率(-dp/dtmax)的正常指标后,开胸并连接呼吸机,稳定后股静脉恒速注射1.5%戊巴比妥纳(6 mL/h)当+dp/dtmax 降到正常值的20%～40%稳定后,以0.5%戊巴比妥钠4.5 mL/h 保证模型稳定,模型稳定5 min 以上即视为心衰模型成功。经十二指肠给予受试药物,阳性对照药舌下静脉注射给药,模型组给予等量的蒸馏水,空白组不给任何药物,给药后60 min 于腹主动脉取血,分离血浆,按试剂盒方法,测定血浆NT-proBNP、ANP、Ang Ⅱ的含量。

2.2 统计学处理方法 采用SPSS 统计学软件处理,均采用方差分析方法,数据用均数±标准差()表示。

3 实验结果

3.1 血浆NT-proBNP 测定结果 造模后,NT-proBNP含量明显升高,与空白组比较有统计学意义(P ＜0.05)。给药治疗后各组大鼠血浆NT-proBNP 含量与模型组比均有所降低,尤以附子人参1∶0.5组和附子人参1∶1组作用更强(P ＜0.05)。

3.2 心房肽(ANP)检测结果 模型组与空白组比较,ANP 含量明显增高。给药后,ANP 含量有所下降。且附子人参配伍后,对ANP 的调节作用有所增强,尤以附子人参1∶0.5组作用更为明显,与模型组比较有统计学意义(P ＜0.01)。

3.3 Ang Ⅱ测定结果 造模后模型大鼠血浆中Ang Ⅱ显著上升,给药治疗后与模型组比较,其含量均有所下降。实验结果见表1。

表1 血浆NT-proBNP、ANP、Ang Ⅱ含量测定结果(,n=8)

表1 血浆NT-proBNP、ANP、Ang Ⅱ含量测定结果(,n=8)

注:与KB组比较,#P ＜0.05,###P ＜0.001;与MX组比较,△P ＜0.05,△△P ＜0.01。

4 讨论

附子为临床常用有毒中药,具有强心、抑制心室颤动,改善学流动力学指标,缓解心衰的治疗作用[2-4],而在心衰的发展变化中,神经—体液因子的释放也起着重要作用,探讨其与心衰的相关性,有利于更进一步分析附子抗心衰用作的机制。

BNP 和NT-proBNP 为利钠肽家族中的成员,BNP主要由心室分泌,当心肌受到牵张或室壁压力增大时,心肌BNP 前体原(PreProBNP)裂解为BNP、NTproBNP,二者与心功能有良好的相关性,NT-ProBNP较BNP 体外稳定性高,且具有个体差异较小、浓度较高等优点,利于测定,NT-ProBNP 与BNP 相比是更敏感的发现早期心脏功能不全的标志物,是较理想的检测指标[5]。研究结果表明附子人参1∶0.5组降低血中NT-proBNP 作用最强。分析原因,可能是附子人参均有一定的强心作用,其相互配伍后,对急性心衰有更好的改善作用,进而调节NT-proBNP 的释放作用。

心房肽(ANP)是心房合成和分泌的一种具有生物活性的多肽激素,ANP 主要在心功能不全时最大程度激活。血浆ANP 升高,这对判断有无心力衰竭及心力衰竭程度有帮助[6]。本研究表明:附子人参配伍后,对ANP 的调节作用尤以附子人参1∶0.5组作用最为明显。表明附子与人参的强心作用,可能与调节ANP 的释放有关。

心衰与肾素—血管紧张素—醛固酮系统(RAAS)的激活密切相关[7]。Ang Ⅱ是RAAS 中最为重要的活性激素,在病理情况下,Ang Ⅱ是心室重构的重要因素,Ang Ⅱ可诱导小动脉收缩,增加醛固酮分泌,增强交感神经活性,引起心脏和血管重塑,最终导致高血压、心肌肥厚、心力衰竭等病理变化[8]。本结果表明:各给药组血液中Ang Ⅱ含量降低,尤以附子人参1∶0.5组作用明显(P ＜0.05),Ang Ⅱ含量的降低,提示治疗药对心衰有缓解作用。

综上所述,实验结果提示附子与人参按适当比例配伍后可能通过提高心肌功能,反馈调节急性心衰大鼠血浆Nt-proBNP、ANP、Ang Ⅱ的含量,从而更好的达到回阳救逆,改善、缓解心功能的作用。

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