HMGB1在panc-1荷瘤裸鼠束缚应激模型移植瘤中的表达及意义

姜旭平，李玉军 (青岛大学医学院附属医院病理科，山东 青岛 266003)

胰腺癌是一种恶性度高、预后极差的恶性肿瘤，患者5年生存率不足2%，各种综合因素导致肿瘤发生和恶化。笔者旨在探讨心理应激对panc-1荷瘤裸鼠移植瘤中高迁移率族蛋白1(HMGB1)蛋白水平的影响，现将具体情况报告如下。

1 材料与方法

1.1 材料:人胰腺癌细胞株panc-1(中国协和医院微生物实验室);BALB/C(nu/nu)裸小鼠，雄性，4～6周龄，体质量15～18 g(上海斯莱克实验动物有限责任公司);HMGB1抗体和caspase3抗体(北京博奥森生物技术有限公司)等。

1.2 方法:①建立裸鼠胰腺癌移植瘤束缚应激模型:裸鼠饲养在相对无菌的环境中，将20只裸鼠随机分为两组:单纯荷瘤组(a组)和荷瘤加应激组(b组)，每组10只。b组在肿瘤后给予束缚(每天10:00AM～6:00PM，共2周)，a组正常活动。结束后处死全部裸鼠，取移植瘤，具体步骤参考文献［1-3］。②免疫组化:采用PV-6001法，按试剂盒说明书进行操作。结果判定:HMGB1表达于肿瘤细胞核，细胞质中有微量表达，具体判定标准按许良中等所述［4］。

1.3 统计学处理:所有数据采用 SPSS16.0软件进行分析。数值资料以均数±标准差(±s)表示，采用t检验;等级资料采用非参数统计秩和检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 荷瘤裸鼠体质量和瘤质量:实验前两组裸鼠体质量差异无统计学意义，a组实验后体质量为(21.78±1.40)g，b组实验后体质量为(20.26±1.10)g，两组比较差异有统计学意义(t=2.713，P＜0.05)，束缚应激使裸鼠体质量增长缓慢。与a组相比，束缚应激可使移植瘤质量明显增加［(0.96±0.41)g比(1.45 ±0.42)g，t=-2.685，P ＜0.05］。

2.2 免疫组化结果:b组移植瘤组织中HMGB1的阳性表达显著高于 a组(Z=-2.500，P ＜0.05)，详见表1。

表1 两组裸鼠移植瘤组织中HMGB1的表达

3 讨论

HMGB1是与染色体结合的非组蛋白成分之一，对维持核小体结构的稳定有着非常重要的意义，HMGB1可积极参与DNA复制、转录和修饰，对类固醇激素受体、NF-kB、P53等蛋白的转录进行有效调节。有报道认为，HMGB1参与肿瘤发生发展的机制可能包括:①HMGB1的过表达引起某些基因表达失调，从而导致肿瘤表型;②HMGB1的过表达可使获得肿瘤表型的细胞免于凋亡，导致肿瘤发生;③通过与相关受体相结合(主要为RAGE和Toll-样受体4)、改变细胞性能、调节细胞外基质降解、调节血管新生、调节炎性微环境等方式促进肿瘤的侵袭和转移。本实验结果显示，b组移植瘤组织中HMGB1的阳性表达显著高于a组，提示应激能刺激肿瘤细胞产生HMGB1蛋白促进肿瘤的发生和发展。其机制可能是应激状态引起神经内分泌及免疫功能改变，进而引起体内神经内分泌介质和细胞因子的释放失控，而HMGB1基因的转录调控与几种类固醇激素有关，其中包括GC，而且IFN-γ、TNF-α、成熟THP-1巨噬细胞中转化生长因子-β和人外周血中单核细胞能上调HMGB1的转录［5］。

总之，本文研究结果表明，心理应激促进PANC-1荷瘤裸鼠移植瘤生长的机制可能是通过激活神经内分泌信号传导通路，上调HMGB1的表达而实现的。

［1］黄 鹏，王春友，吴河水，等.胰腺癌细胞株PANC-1中肿瘤干细胞生物学行为的研究［J］.中国普通外科杂志，2008，17(9):865.

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［4］许良中，杨文涛.免疫组织化学反应结果的判断标准［J］.中国癌症杂志，1996，6(4):229.

［5］苏卫民，毕明宏.高迁移率族蛋白B1的表达与肿瘤侵袭性的关系［J］.临床肺科杂志.2011，16(2):245.