使用荧光定量PCR检测孕妇Uu和Ct感染情况分析

吴玉霞

(北海市第二人民医院检验科，广西 北海536000)

解脲脲原体(Ureaplasma urealyticum，Uu)和沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis，Ct)是可寄居于人体并能引起疾病的病原体。在妇女怀孕期间可导致母婴传播，对母体本身、胎儿及新生儿均可造成明显的不良后果[1]。快速准确诊断非常重要，采用实时荧光定量PCR(Real-time quantity PCR)方法检测临床收集的2348份孕妇标本的Uu和Ct，分析孕妇Uu和Ct的感染情况，取得较好效果，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 收集2006年7月至2013年1月在我常规产前检查的孕妇2348例,年龄18～38岁。所有被检查者在此研究前30d均无局部或全身使用抗菌素史。

1.2 标本处理 用无菌棉拭子轻轻擦取患者生殖道宫颈分泌物密闭送检。将棉拭子放入0.5ml无菌生理盐水中浸泡10min,充分挤压洗脱棉签,吸取200μl放置-20℃保存待检。

1.3 方法

1.3.1 PCR法 仪器使用杭州博日Line Gene9620自动荧光PCR扩增仪，试剂盒由中山医科大学达安基因诊断中心提供，操作严格按说明书。以Uu或Ct-DNA≥103copies/ml作为判断阳性的标准。质控物由广西临床检验中心提供。

1.3.2 培养法 Uu培养、鉴定试剂盒由珠海浪峰生物技术有限公司提供，Ct培养试剂盒由珠海浪峰生物技术有限公司提供，操作严格按说明书。

1.3.3 统计分析 将得到的结果应用卡方χ2检验分析，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

检测的2348例孕妇中，使用实时荧光定量PCR法检出Uu阳性者920例 (39.18%),Ct阳性者286例 (12.18%)，Uu和 Ct混合阳性者 11例(0.47%)，合计检出阳性者1217例(51.83%)。培养法检出Uu阳性者406例 (17.29%)，CT阳性者44例(1.87%)，Uu和 Ct混合阳性者 9例 (0.38%)， 合计459例(19.54%)，结果实时荧光定量PCR法阳性检出率明显高于培养法(P<0.05)，见表1。

表1 PCR与培养法的阳性检出率比较[n(%)]

3 讨论

Uu、Ct是介于细菌和病毒之间的病原微生物，是人类泌尿生殖道最常见的寄生菌之一[2]。均能引起女性生殖道感染，相当部分为无症状携带者，因此令感染者未能引起重视而及时就医。当孕妇感染时虽没有不适，但Uu是引起自然流产,而Ct是引起先兆流产的危险因素。且孕妇感染Uu和Ct可引起胎膜早破[3]产生不良的妊娠结局 ,还可通过母婴的垂直传播使新生儿发病 ,如新生儿肺炎、结膜炎、中耳炎、阴道炎及脑膜炎等。有文献报道20~40岁年龄组患者感染率为85.80%是发病的高危人群[4]，而此年龄段也是最佳生育期。本文检测的2348例孕妇中，1017阳性占43.31，高于国内报道[5]，说明孕妇感染Uu和Ct的几率相当高。

本文就目前Uu和Ct检测常用的两种方法实时荧光定量PCR法和培养法做比较，结果实时荧光定量PCR法阳性检测率显著高于培养法法 (P<0.05)。因此本文建议孕期应重视生殖道Uu和Ct感染的检测，在产科门诊建卡时对宫颈分泌物行Uu和Ct常规筛查，且选用实时荧光定量PCR法，及时发现及早治疗无症状携带者，达到预防胎膜早破、早产，降低母婴病率，提高围产保健质量，达到优生优育目的。

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[2]马晓波,宋秀宇,郑燕青,等.专科患者解脲脲原体的培养结果及耐药性分析[J].实验与检验医学,2009,27(6):681.

[3]尤莉芳,蔡惠萍.孕妇生殖道解脲支原体和沙眼衣原体感染与胎膜早破的关系研究[J].苏州大学学报(医学版)2011,31(4)684-685.

[4]姚晔,万琼,李志红,等.345例支原体阳性患者病原体分布及药敏分析[J].实验与检验医学,2010,28(1):84-85.

[5]梁宝珠,解脲脲原体沙眼衣原体与妊娠结局的关系[J].解脲脲原体沙眼衣原体与妊娠结局的关系[J].河北医学,2006,(5):401-402.