油脂提取及脂肪酸分析方法评述

霍彦龙，胡金山，李红霞

(河北联合大学化学工程学院，河北唐山063009)

食品中的脂肪酸分为必需脂肪酸和非必需脂肪酸。不同的脂肪酸对人体的健康的作用不同，例如多不饱和脂肪酸及必需脂肪酸在防治心脑血管疾病等方面具有重要的功能［1］，而反式脂肪酸则会引起一些病症，因此，脂肪酸的种类和含量是评价油脂质量的重要标准。为了对食品中的油脂进行更好的研究，需要有合适的从食品中快速提取无损纯净油脂的方法，而传统的油脂提取方法存在溶剂残留，耗时费力等缺点。准确分析脂肪酸的种类及含量的方法是评价油脂的关键所在。因此，脂肪的提取新方法的研究及其脂肪酸定量和定性方法的研究，及其进一步的完善优化，成为了研究的焦点。

1 油脂的提取方法

传统的油脂提取方法存在残油率高、原料浪费严重、动力消耗大、溶剂选择性差、溶剂消耗量大、部分溶剂具有污染性等缺点。近年来提出一些新方法，主要有离子液体法、超临界流体法、超声波法、微波辅助提取技术等。这些新技术具有提取率高、溶剂消耗少、提起时间短的优点。

1.1 离子液体提取法(ILE)

Young等［2］提出了一种由亲水离子液体和极性共价分子组成的混合溶剂提取脂肪酸的方法。离子液体具有表面张力高、溶解度相对较大、易于与其他物质分离的特点，这都有效提高了脂肪由细胞内到外的传质作用，取得了较好的提取效果。离子液体作为一种新型的高效溶剂，在分离和纯化技术领域(包括脂肪提取方面)具有很好的潜在应用价值。

1.2 超临界流体提取法(SFE)

Pradhan等［3］研究了超临界CO2萃取亚麻油，在压力为30～50 MPa和温度40～80℃时，总产率可达96.8%，比索氏提取效率提高了4.6%，多不饱和脂肪酸含量也有所增加。Long-HuWang等［4］采用了SFE和液-液萃取联用技术，既提高了溶剂的选择性又提高了分离效率和产率。SFE具有提取效率高，操作温度低，且有较宽的压力和温度调控范围，产品无溶剂残留和环境污染，应用在食品领域和化学油脂工业方面有明显优势。

1.3 超声波辅助提取法(UAE)

Lou［5］研究了强力超声和一般溶剂萃取的脂肪提取方法，结果表明在强力超声250 w和50℃下，辅助提取20 min，脂肪产率达到80.66%，比传统溶剂提取产量提高10.45%，时间是比索氏提取的1/12，溶剂是比索氏提取用量的1/3。同时SAE能提高维生素E和类胡萝卜素总含量，可大大改善油脂的营养价值。UAE能避免高温高压对有效成分的破坏，具有快速、简便、价廉、高效等优点，适合天然活性成分的提取。

1.4 微波辅助提取法(MAE)

Capote等［6］采用MAE索氏提取放法从面包中提取脂肪，与Folch方法相较，MAE的时间缩短3倍，溶剂用量是后者的75%～85%，成本较低，不用考虑压力和稳定度，而且不饱和脂肪酸含量有所提高，重现性也较好。真空微波提取技术兼备了微波加热快，均匀及真空条件下低温提取的优点，可避免高温对热敏物质的损坏。

2 脂肪酸定性定量分析方法

脂肪酸的类别、性质、结构、含量等直接造成脂肪的营养及其性能的差异，同时也影响着人类的健康。脂肪酸定性和定量方法有色谱，红外光谱，核磁共振和电泳分析方法等。

2.1 薄层色谱法(TLC)

孟祥河等［7］采用薄层色谱法中性脂质进行分离，可实现甘油三酯(TG)、甘油二酯(DG)、甘油一酯(MG)、游离脂肪酸(FFA)的分离。TLC可和FID或气相色谱联合应用具有较好的效果。TLC设备要求简单，成本低，操作方便，操作时间短，方法重现性好，并可做到定性和定量研究。

2.2 气相色谱法(GC)

Couallier等［8］建立了气相色谱法同时测定酿酒废水中8种脂肪酸和营养成分的分析方法。GC最大的特点是灵敏度高，分离效率高，选择性高，分析迅速，应用范围广。Li等［9］采用气相色谱-质谱法，定性、定量分析了斑马鱼蛋中长链脂肪酸制备的脂肪酸甲酯的分布及含量。该方法在脂肪酸研究领域的应用非常广泛。它发挥GC了快速分离及MS能进行化合物结构测定的综合优势，可以较好地对各种样品中的脂肪酸成分进行定性定量分析。

2.3 高效液相色谱法(HPLC)

赵玉生等［10］采用HPLC法对油脂中的脂肪酸进行了测定，经优化确定以(甲醇-乙腈)(90∶10)-水为流动相梯度洗脱，在检测波长246 nm、柱温35℃和流速0.35 mL/min的色谱条件下，18 min内能完成对13种脂肪酸衍生物的分离检测。HPLC法具有操作简单，分析检测时间短，溶剂消耗少，分离度好的优点。

Dai［11］等通过NMR与LC-MS对天然产物进行了平行分析，再通过对单一成分的保留时间、核质比和化学位移做综合分析，得到了其大量定性和定量信息。LC-NMR和LC-NMR-MS是最新发展的在线分析复杂混合物的联用技术，能够确定未知成分的结构组成。联用技术具有较好的发展前景，但存在NMR检测灵敏度低、费用高和溶剂选择范围小的缺点。

2.4 红外光谱法(IR)

孔翠萍等［12］对采用近红外光谱法快速测定了脂肪酸甲酯、单甘酯、二甘酯、三甘酯和甘油进行了研究，只需1～2 min，具有较高的检测效率和检测精度。杨小红等［13］采用傅里叶近红外漫反射光谱技术，结合偏最小二乘法，以294份样品建立了玉米籽粒四种主要脂肪酸含量和含油量的近红外光谱(NIRS)校正模型，使其应用价值倍增。IR具有快速、不破坏样品、多组分同步测定、成本低等优点，应用前景广泛。

2.5 毛细管电泳法(CE)

经毛细管区带电泳(CZE)或胶束电动力学毛细管色谱(MEKC)模式分离后，采用间接紫外法检测食品中的游离脂肪酸(FFA)含量，CZE方法只能分析C1～C7的FFA，而MEKC可分离C8～C20的脂肪酸［14］。Marcone［15］等人采用毛细管区带电泳(CZE)模式，间接紫外法分析皂化油脂脂肪酸的组成，不到10 min就可检出9种C10～C20脂肪酸，有效缩短检测时间。文献［16］采用CZE分析了椰子油中的不饱和脂肪酸组成。在电解缓冲液中加入3-甲基-β-环糊精及60%的甲醇，可检出16种C12-C18线性不饱和脂肪酸。

3 展望

脂肪酸来源多种多样，传统方法已无法满足科研的需求，合理优化组合分离和分析方法成为研究脂肪酸的有效途径之一。因此，联用技术是当前研究的焦点，使得油脂中的脂肪酸研究更加深入和更广泛。

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