消炎止痒搽剂体外抑菌试验研究

李正平 李琳 张莉 徐俊鸿 陈丽敏

“消炎止痒搽剂”(由苦参、白矾、蛇床子、大黄、地肤子、荆芥、黄芩、穿心莲、黄柏、薄荷脑等中药组成)，由顺德区中医院院内制剂“消炎止痒散”经改剂型而来，具有消炎杀菌，燥湿止痒的作用，临床上用于湿疹、疥疮、细菌性、真菌性皮肤疾病等。临床应用近20年，疗效确切。由于消炎止痒散存在剂型适应范围小，在使用时需要加热水浸泡，有效成分溶出率低，疗效和质量控制有提高的空间等因素，拟通过剂型改良，使其更适于临床应用。本文对其剂型改良前后的抑菌作用做一比较，以其为改剂型研究提供实验基础，同时为消炎止痒搽剂消炎杀菌、燥湿止痒的临床功效提供一定的实验依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1 抑菌试验待检药物 消炎止痒散供试液：取消炎止痒散40 g，加沸水500 ml浸泡提取1 h，时时振摇，滤过，取续滤液浓缩至20 ml，制备成含1 g/ml生药，灭菌备用[1]。

消炎止痒搽剂：精密吸取消炎止痒搽剂适量，浓缩制备成含1 g/ml生药，灭菌备用。

1.1.2 供试菌株 白色念珠菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌由广东省临检中心提供。

首先将供试菌种接种在适于生长的培养基内，置于37℃恒温箱中培养24 h，待菌种复壮后使用。再取复壮的菌种，接种到营养肉汤中，置于37℃恒温箱中培养24 h备用。

1.1.3 培养基制备 营养肉汤：牛肉膏3 g、蛋白胨10g、氯化钠5 g、蒸馏水1000 mL，制备，灭菌备用。

营养琼脂：牛肉膏3 g、蛋白胨10g、氯化钠5 g、琼脂20 g、蒸馏水1000 mL，制备，灭菌备用。

1.1.4 试验器材 离心机、离心管、高压蒸汽灭菌器、冰箱、培养箱、无菌工作台、研钵、三角烧瓶、天平、电炉、烧杯、酒精灯、移液器、接种环、游标卡尺、打洞器、棉签、平皿和试管(高压灭菌后备用)，以上器材均有广东海洋大学临床兽医学实验室提供。

1.2 试验方法

1.2.1 供试中药药物敏感性测定 采用药敏试验的平皿打洞法[2]，即用灭菌棉签蘸取供试菌液，均匀涂布于营养琼脂平板上，然后用直径7mm的琼脂打孔器均匀打孔，每板4孔，去除孔内琼脂并适当封闭孔底。将供试药液加于孔中，以满而不溢为宜并作好标记。置4℃冰箱中作用1 h后取出并置于37℃恒温箱中培养24 h，观察结果。结果判定：抑菌圈直径小于10 mm为耐药，10～15 mm为中度敏感，大于15 mm为高度敏感。

1.2.2 最小抑菌浓度(MIC)测定 取无菌试管24支，分成两组，每组12支，编号。除第一管外，各管中都加入无菌肉汤培养基10 ml，然后于第1管加入试液20 ml，吸出10 ml加至第2管中，混匀;再从第2管中吸取10 ml加至第3管。同法稀释至第10管，11、12管作阴性和阳性对照。

吸取以上各管液体5 ml于灭菌平皿中，加入20 ml普通肉汤琼脂培养基，混匀放冷至室温。每管液体作两块平皿。除第11、12管外，其余平皿均划7个区域，分别接种经18 h培养，浓度为105 CFU/ml的菌液0.01 ml，37℃培养24 h，观察结果，以结果不出现交叉为准。未见细菌生长的最低浓度为MIC。

2 试验结果

最小抑茵浓度(MIC)测定结果：在37℃温箱中培养24 h后，取出试管，肉眼观察各种药物抑菌效果，判断细菌生长情况，结果显示，对白色念珠菌，消炎止痒散的最小抑菌浓度(MIC)为1/4，消炎止痒搽剂的最小抑菌浓度(MIC)为1/32;对铜绿假单胞菌，消炎止痒散不敏感，消炎止痒搽剂的最小抑菌浓度(MIC)为1/32;对金黄色葡萄球菌，消炎止痒散不敏感，消炎止痒搽剂的最小抑菌浓度(MIC)为1/512;对表皮葡萄球菌，消炎止痒散不敏感，消炎止痒搽剂的最小抑菌浓度(MIC)为1/512。见表1。

表1 消炎止痒搽剂改剂型前后对标准菌株抑菌效果

3 小结

综合以上试验结果，表明消炎止痒搽剂具有一定的抑菌作用。并且，通过剂型改良后，消炎止痒搽剂对白色念珠菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌等的抑菌效果优于消炎止痒散[3，4]。说明通过剂型改良，消炎止痒搽剂在一定程度上体外抑菌作用更好，更适于临床应用。这可能是由于剂型改良后，药物中抑菌的有效成分溶出度有所增加而致。这为本院该制剂在皮肤科疾病上的临床应用提供了一定的参考。相信经过剂型改良，该制剂的社会效益和经济效益将有所提高，临床应用前景将更加可观。

[1]徐淑云，汴如濂，陈修.药理实验方法学.第3版.北京：人民卫生出版社，2003：13-62.

[2]曾斌，吕萍，候晓慧.消炎止痒喷雾剂毒理学实验研究.中国医药导报，2008，5(32)：12-13.

[3]郑永平，王海棠，李锦芳.消炎止痒洗剂联合特比萘芬治疗足癣，2009，11(47)：32.

[4]黄晓敏，廖玲军，曾松荣，等.梅花冰片3种剂型体外抗菌活性研究.江西中医学院学报，2005，17(1)：63-65.