肤疾洗剂质量标准改进

杨亚丽 樊宝娟 吴 芳 杨瑞瑞 陕西省食品药品检验所（西安710065）

肤疾洗剂原质量标准于1998年收入《卫生部药品标准中药成方制剂》第十五册，标准号WS3－B－2918－98，之后有其他企业相继提高此标准，其具有解毒杀虫，止痒收敛，活血祛瘀的功效。用于疥疮、湿疹、脂溢性皮炎、瘙痒性皮肤病、花斑癣。处方由苦参、百部、花椒、白鲜皮、硼砂、雄黄六中药材组成，本文收集了十三批肤疾洗剂样品，结合其方解及现行的质量标准，建立了其中五味药材的鉴别或含量测定方法，方法验证证明此标准专属性好，重复性、准确性符合要求，耐用性好，整个实验过程可操作性强，可以作为控制本品内在质量的标准。

1 仪器与试药

1.1 仪 器 Waters 2487－2695型高效液相色谱仪（美国沃特世公司），BS224S型电子分析天平（赛多利斯公司），KQ500－DE 型数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）。

1.2 试 药 对照品及对照药材均由中国食品药品检定研究院提供：苦参碱（批号：110805－200508含量测定用）；苦参对照药材（批号121019－200705）；花椒对照药材（批号121106－200402）；白鲜皮对照药材（批号978－9301）；肤疾洗剂样品分别由清华德人西安幸福制药有限公司、陕西关爱制药有限公司、陕西康惠制药股份有限公司、陕西摩美得制药有限公司、江西杏林白马药业有限公司提供；肤疾洗剂阴性对照样品及苦参药材由清华德人西安幸福制药有限公司提供。乙腈、甲醇为色谱纯，水为超纯水，其余试剂为分析纯。

2 方法与结果

2.1 制剂中苦参的鉴别［1］为原标准收载方法，此次提高中，对原方法进行了优化：①删除了无水硫酸钠脱水过程。②将原标准中2%氢氧化钠薄层板改为普通硅胶G 薄层板用浓氨试液饱和。③将原展开剂中苯用相对毒性较小的甲苯代替。④为提高专属性，以苦参对照药材作为对照进行控制。结果表明优化后不影响苦参的鉴别结果，故将原标准优化为：取本品10mL，置分液漏斗中，用4%氢氧化钠溶液调节pH 值至10，加三氯甲烷振摇提取2次，每次10mL，合并三氯甲烷提取液，置水浴上蒸干，残渣加三氯甲烷0.5mL使溶解，作为供试品溶液。另取苦参对照药材2g，加水30mL，加热回流2h，滤过，滤液同法制成对照药材溶液。另取不含苦参的阴性样品10mL，同法制成阴性样品溶液。照薄层色谱法（中国药典2010年版一部附录VIB）试验，吸取上述三种溶液各5μL，分别点于同一硅胶G 薄层板上，以甲苯－丙酮－甲醇（8∶3∶0.5）为展开剂，以氨蒸气饱和，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液。供试品色谱中，分别在与对照药材色谱主斑点及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。阴性无干扰。

2.2 制剂中花椒的鉴别 取本品10mL，置分液漏斗中，加乙醚振摇提取2 次，每次10mL，合并乙醚液，挥至约1mL作为供试品溶液。另取花椒对照药材2g，加水30mL，回流2h，滤过，滤液同法制成对照药材溶液。另取不含花椒的阴性样品10mL，同法制成阴性样品溶液。照薄层色谱法（中国药典2010年版一部附录VIB）试验，吸取上述三种溶液各5μL，分别点于同一硅胶G 薄层板上，以正己烷－乙酸乙酯（5∶1）为展开剂，展开，取出，晾干，在紫外光灯（365nm）下观察，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光主斑点。阴性无干扰。

2.3 制剂中白鲜皮的鉴别 为新增标准：取本品10mL，置分液漏斗中，用三氯甲烷－氨水（10∶1）混合溶液提取2次，每次10mL，合并三氯甲烷层，水浴蒸干，残渣加三氯甲烷1mL 溶解，作为供试品溶液。另取白鲜皮对照药材2g，加水30mL，回流2h，滤过，滤液同法制成对照药材溶液。另取不含白鲜皮的阴性样品10mL，同法制成阴性样品溶液。照薄层色谱法（中国药典2010年版一部附录VIB）试验，吸取上述三种溶液各5μL，分别点于同一硅胶G 薄层板上，石油醚（30～60℃）－丙酮（3∶2）为展开剂，展开，取出，晾干，在紫外光灯（365nm）下观察，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。阴性无干扰。

2.4 苦参碱的含量测定 2.4.1 色谱条件：Ultimate XB－NH2柱（250mm×4.6mm，5μm）；流动相［2］：乙腈－无水乙醇－3%磷酸溶液（81∶13∶6）；流速：1.0mL·min－1；检测波长220nm；柱温：30℃；进样量10μL。在上述条件下，供试品中丹酚酸B色谱峰与其他杂质峰基线分离。阴性无干扰。见图1。

图1 HPLC色谱图（1.苦参碱）

2.4.2 精密称取苦参碱对照品适量，加无水乙醇制成每1mL含0.05mg的溶液，即得。

2.4.3 供试品溶液的制备：取本品适量，摇匀，精密量取1mL，加水至25mL，加浓氨试液1mL 及三氯甲烷25mL 超声处理（功率500W，频率40kHz）30min，分取下层液，低温蒸干，残渣加无水乙醇溶解，转移至25mL 容量瓶中，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜（0.45μm）滤过，取续滤液，即得。

2.4.4 阴性对照溶液的制备：称取不含苦参的阴性样品，同法制成阴性对照溶液。

2.4.5 线性实验：精密吸取苦参碱对照品溶液（质量浓度89.0μg·mL－1）1，2，5，10，15，25和50μL，在上述条件下测定峰面积，以峰面积（y，A）对对照品进样量（x，μg）作标准曲线，计算回归方程为Y ＝61126 X－14588，r＝0.9999（n＝7），表明苦参碱对照品的进样量在0.089μg～4.45μg之间与峰面积呈良好的线性关系。

2.4.6 精密度实验：精密吸取对照品溶液10μL，重复进样6次，其峰面积RSD为0.79%。

2.4.7 重复性实验：取同一批号供试品（批号），精密量取6份，分别按供试品溶液同法制备，测定，平均含量为34.8μg·mL－1，RSD 为0.92%。

2.4.8 稳定性实验：取同一供试品溶液（批号111009）分别在0，3，6，9，12 和18h 测定，其RSD 为1.79%。

2.4.9 加样回收率实验：精密量取已知含量的样品（批号111009苦参碱含量为34.8μg·mL－1）6份各0.5mL，分别精密加入对照品溶液（0.87mg·mL－1）1mL，按供试品溶液同法制备，测定含量，平均回收率为101.8%，RSD 为0.76%。

2.4.10 样品测定：按2.7.1色谱条件，精密吸取13批供试品溶液各10μL，注入液相色谱仪，测定，结果13 批样品含量分别为0.73，0.86，0.84，1.84，1.19，2.34，4.09，4.15，1.37，1.01，2.45，2.44 和2.48μg·mL－1。

3 讨 论

3.1 鉴别部分 对原标准的方法进行了优化及提高：①将硼砂及雄黄的鉴别方法进行了优化［2］，②将苦参的鉴别采用专属性更强的苦参对照药材进行对照，③优化了花椒的鉴别方法［3，4］。依据方解新增了处方中白鲜皮的薄层鉴别方法［5，6］。通过重现实验，发现原标准中百部的薄层鉴别方法不可行，建议删除，其鉴别方法有待进一步研究。

3.2 检查部分 由于肤疾洗剂是由液体和雄黄粉末的固体组成，本文通过对13批样品的测定及工艺增加了一下内容：①确定了液体部分的pH 值及相对密度的范围：其中pH 值范围为6.3～8.0，相对密度的范围为不得低于1.05，②增加了雄黄粉末中三氧化二砷的检查［2］，增加了雄黄粉末的装量检查。

3.3 含量部分 ①参照《中国药典》2010年版一部雄黄项对其含量进行了测定［2］，结果含量范围为：43.0～89.7%，表明部分企业使用雄黄质量不好，建议将雄黄中二硫化二砷的含量测定列入标准。②依据原标准及相关文献［7］建立了苦参碱的含量测定方法，并对方法进行了耐用性实验（其中包括波长、柱温、色谱柱、提取方式、提取溶剂、提取时间、提取次数、流动相组成比例、流动相流速等因素的选择），结果方法简便可行，重现性好，列入标准正文，通过对13批样品含量测定，考虑到药材来源以及制剂生产、贮藏、转移率等因素，将苦参碱的含量限度修订为本品每1mL 含苦参以苦参碱（C15H24N2O）计，不得少于0.80mg。

［1］ 王立军，刘丽萍.黄柏止痒洗剂中黄柏、苦参的薄层色谱鉴别［J］.陕西中医，2011，32（10）：1407－1408.

［2］ 国家药典委员会.中国药典2010年版［S］.北京：中国医药科技出版社，2010：70－71.

［3］ 方明余.复方苦黄洗剂的薄层色谱鉴别［J］.河北中医，2012，34（3）：433.

［4］ 杨 瑜，刘 萍，胡汉昆，等.白癜酊质量控制［J］.中国医院药学杂志，2008，28（24）：2132－2133.

［5］ 黄 慧，顾 卫，黄丽雅，等.肤宁洗剂的质量标准［J］.中国药师，2012，15（8）：1096－1098.

［6］ 张丽娟，贾 俊，王小焕，等.克银丸质量控制方法研究［J］.现代仪器，2012，18（2）：39－41.

［7］ 纪 佳.HPLC 同时测定苦参药材中苦参碱和氧化苦参碱的含量测定方法［J］.中国医药指南，2012，10（27）：86－87.