二藤风湿药酒急性毒性研究

郝 婷 亢孝弟 周 伟 陕西省友谊医院（西安710068）

二藤风湿药酒是以雷公藤、鸡血藤、白芍、血竭等中药组成，用白酒为溶剂制成的酒剂。具有祛风除湿，活血通络，消肿止痛之功效，对细胞免疫和体液免疫均有抑制作用。用于治疗类风湿关节炎、强直性脊柱炎、Still病等自身免疫性疾病。做为医院制剂，累计已使万余名自身免疫性疾病患者受益［1－3］。但由于处方中含有的雷公藤，在《中药大辞典》中记载有大毒［4］，按照医院制剂新的注册管理办法的要求，再注册过程中需要做急性毒性药理实验，并进行质量标准的提高，为此我们做了这方面的研究。

1 材料与方法 1.1 材料 1.1.1 ICR 小鼠，体重20～24g，雌雄各半，由西安交通大学医学院实验动物中心提供（动物生产许可证：SCXK（陕）2008－008；动物使用许可证号为：SYXK（陕）2012－005。

1.1.2 二藤风湿药酒由西安航天总医院制剂室制备（批号：20101115，规格每100mL 含生药41g，批准文号：陕药管制字［2001］第1897号）

1.1.3 电子天平BL310（德国Sartorius公司）；超声清洗器（KQ5200B，频率40KHZ，昆山市超声仪器有限公司）

1.2 二藤风湿药酒的制备方法 按处方量称取雷公藤（去皮），切片用白酒作溶剂浸泡30～40d，滤过，滤液加血竭搅拌使之溶解，备用；另取容器，将白芍、鸡血藤加水煎煮两次，滤过，合并滤液，适量浓缩，加冰糖搅拌溶解。将滤液与浓缩液合并，搅拌均匀，静置24h滤过，补充白酒至处方量。按质量标准进行薄层鉴别及用HPLC 法定量测定雷公藤甲素含量符合规定后，即可。

1.3 实验方法 50只小鼠禁食不禁水10h，将小鼠分成4组，每组10～13只，雌雄各半。二藤风湿药酒实验组按预实验摸索的剂量0.4 mL／10g，24h内4次灌胃给药，对照组给予生理盐水，按同剂量，同方法灌胃给药。给药后正常颗粒饲料喂养，自由饮水，自然光照12h，维持动物饲养室温度20～24℃，相对湿度45%～60%。在给药后4h内详细观察动物的反应情况，然后每天上、下午各观察一次。连续观察14 d，重点观察动物体重变化、饮食、外观、行为、分泌物、排泄物等。记录所有动物的死亡情况、中毒症状及中毒反应的起始时间、严重程度、持续时间、是否可逆等。14d后逐只称重并处死解剖，分别摘取相关脏器，按脏器指数＝脏器重量／体重×100进行计算，并组间进行t检验以判断差异。

2 实验结果 2.1 给药二周内对小鼠体重的影响 见表1。

2.2 实验结果 小鼠第1 次给药后有1 只雄鼠，2只雌鼠出现步态不稳，第2次给药后雄鼠4只，雌鼠2只出现步态不稳。给药14d后无死亡，实验组动物未发现胸腔、腹腔积液。结束逐只称重后处死解剖，实验组体重减轻，但无统计学意义。用分析天平对动物心、肝、脾、肺、肾、肾上腺、胸腺、卵巢、子宫、精囊前列腺、睾丸，各器官进行称重，并计算脏器指数，组间进行t检验以判断差异。结果雄性给药组肝指数、脾指数、胸腺指数降低；雌性给药组肝指数、子宫指数减低，经统计学处理，无显著差异。实验组雌性动物胸腺指数明显降低，与对照组比较，有显著性差异。动物实验提示，二藤风湿药酒在相当于人用药剂量120倍时，对肝功能有影响，用药后会使动物免疫功能下降，雌性小鼠子宫萎缩，这些在临床用药时应引起注意。

表1 二藤风湿药酒对小鼠体重的影响（±s）

表1 二藤风湿药酒对小鼠体重的影响（±s）

给药后（d）组别性别动物给药前3 7 10 14对照组雄12 16.7±1.93 20.8±2.38 25.8±2.74 26.8±2.23 25.7±4.16 雌11 14.8±1.62 19.32±1.33 23.36±1.51 25.83±1.74 25.87±2.10 合23 15.8±2.00 20.1±2.05 24.6±2.53 26.3±2.03 25.8±3.27实验组雄12 17.7±2.00 22.6±1.41 26.3±1.75 27.2±1.37 27.6±1.55 雌11 15.9±1.84 19.53±1.42 24.15±1.30 24.29±1.33 22.91±1.31合23 16.8±2.08 21.0±2.08 25.2±1.85 25.7±1.99 25.1±2.75

2.3 给药2周后对小鼠脏器指数的影响 见表2、表3、表4。

表2 二藤风湿药酒对雄性动物脏器指数的影响（±s）

表2 二藤风湿药酒对雄性动物脏器指数的影响（±s）

组别动物心指数肝指数脾指数肺指数肾指数胸腺指数肾上腺指数对照组雄性 12 18.50±1.19139.79±13.39 8.84±1.54 21.47±2.04 44.19±3.74 11.16±3.90 1.90±4.00实验组雄性 12 17.60±2.68138.31±15.83 9.81±2.80 22.82±1.91 45.19±5.16 10.41±3.18 0.91±0.40

表3 二藤风湿药酒对雌性动物脏器指数的影响（±s）

表3 二藤风湿药酒对雌性动物脏器指数的影响（±s）

组别动物心指数肝指数脾指数肺指数肾指数胸腺指数肾上腺指数对照组雌性 11 14.95±2.89 127.9119.04 9.93±2.22 21.01±3.35 34.27±3.58 14.45±3.25 1.05±0.45实验组雌性 11 13.54±1.44 116.01±9.39 11.29±3.66 20.96±2.28 31.73±2.76 11.28±1.78△1.00±0.24

表4 二藤风湿药酒对动物生殖系统脏器指数的影响（±s）

表4 二藤风湿药酒对动物生殖系统脏器指数的影响（±s）

组别雄性动物睾丸精束前列腺雌性动物卵巢子宫对照组12 45.89±6.81 18.12±8.24 11 20.20±7.08实验组12 45.73±8.45 13.85±4.52 11 16.50±3.47

3 讨 论 二藤风湿药酒是根据中医理论，以雷公藤为君药，白芍为臣药，鸡血藤为佐药组成的复方制剂。方中雷公藤治疗自身免疫疾病，疗效确切，但有一定的毒副作用，一直以来，人们不断在寻找增效减毒的较好方法［5］。白芍具有养血、柔肝、敛阴、止汗、缓急止痛的功效，与雷公藤配伍后增效减毒［6］。因二藤风湿药酒中酒精含量在40～60%，如果1日剂量1次灌胃给药，动物昏昏欲睡，步态不稳。经预实验，1 日剂量4次给药，对小鼠的正常活动基本没有影响。小鼠按0.4mL／10g的剂量给药，相当于成人给药剂量的120倍（成人按60kg体重，1d20mL）。二藤风湿药酒常规剂量治疗，控制病情，缓解期应用小剂量间歇疗法，稳定病情，不失为目前治疗类风湿关节炎、强直性脊柱炎的经济有效方法。毕竟经典甲氨蝶呤、环磷酰胺、来氟米特等疗法也有较严重不良反应［7］。生物制剂注射用重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体－抗体融合蛋白（益赛普）［8］虽然起效快，但因价格昂贵及不良反应，也不能普及推广。

二藤风湿药酒动物急性毒性实验表明，对肝脏有损害，在临床应用中很少出现这种情况，但对肝功异常的自身免疫性疾病患者，应保肝护肝。如长期使用，剂量不变，会引起免疫功能低下。唯独对生殖系统的毒性，到目前还没有有效防治办法，在实际中对预生育的自身免疫性疾病患者，禁止使用。总之，在急性期采用

［1］ 周 伟，闫 娟.抗风湿药酒治疗强直性脊柱炎100例临床观察［J］.中国煤炭工业医学杂志，2006，9：975.

［2］ 周志祥，王汉雄，黄泽彦，等.雷公藤药酒治疗活动期类风湿关节炎48例［J］.陕西中医，2011，32（12）：1596－1598.

［3］ 李振明，杨 雄.雷公藤多甙联合泼尼松治疗成人紫癜性肾炎30 例疗效观察［J］.陕西医学杂志，2010，39（11）：1542－1543.

［4］ 江苏新医学院.中药大辞典［M］.上海：上海科学出版社，2004，下册2469.

［5］ 窦建卫，雷 莹，王嗣岑.雷公藤毒性的研究现状［J］.陕西中医，2006，27（4）：485－487.

［6］ 李兴锐，陈茂红，王和融.白芍总苷合雷公藤多苷治疗类风湿关节炎60例［J］.安徽中医学院学报，2011，30（3）：16－18.

［7］ 姜远英.临床药物治疗学［M］.北京：人民卫生出版社，2008：333－336.

［8］ 于学满，王晓非.益赛普与传统方法治疗类风湿关节炎疗效分析［J］.中国误诊学杂志，2008：8（3）：567－568.