非小细胞肺癌化疗前后血清VEGF和MMP-9水平的对照观察

钱海红

非小细胞肺癌(NSCLC)是一种最常见的恶性肿瘤，近年来发病率不断增高。NSCLC的早期诊断尚有困难，大多数患者确诊时已是晚期。处于相同阶段的非小细胞肺癌患者，其疾病进展程度也有显著差异。NSCLC的治疗目标是减慢疾病的进展，缓解患者的症状，提高总体生存率。以铂类为基础的化疗药物是晚期NSCLC治疗的一线用药，据报道，含铂类的化疗方案应答率达20% ～35%，中位生存时间约10个月［1］。但是许多患者接受一线化疗后，病情依然恶化，因此寻找新的作用靶点成为NSCLC的研究趋势，而在肺癌的治疗过程中，也需要能够客观有效地评价其化疗效果的指标作为观察依据。本研究通过

观察NSCLC化疗前后血清VEGF和MMP-9水平的变化，以及与NSCLC患者化疗疗效之间的关系，探索二者在化疗疗效评价中的意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料 收集我院2008年2月至2010年12月住院的晚期非小细胞肺癌患者54例，其中男37例，女17例;年龄38～74岁，平均年龄(63±7)岁;鳞癌32例，腺癌22例。所有患者化疗前均经病理组织学或细胞学检查确诊，并均为未接受手术或放、化疗的初诊病例。临床TNM分期按照2002年国际抗癌联盟(UICC)标准:ⅢB期29例，Ⅳ期25例。

1.2 治疗方法 所有入组患者治疗前均行胸部 CT，血清VEGF和MMP-9检测。采用以铂类为基础的化疗方案(GP、TP、NP)，连续治疗2个周期后，再次复查胸部 CT，血清VEGF和MMP-9，以评价临床近期疗效及两个因子的血清水平变化。

1.3 疗效判断标准 参照RECIST评价标准分为完全缓解(CR)，部分缓解(PR)，无变化或稳定(SD)和进展(PD)，CR+PR视为治疗有效，SD+PD视为治疗无效。

1.4 血清VEGF和MMP-9的检测 分别于化疗第一周期前和第二周期结束后在空腹状态下抽取静脉血，离心分离血清，分装后贮存于－20℃待测。VEGF和MMP-9采用酶联免疫法(ELISA)检测。试剂盒购自R＆D Systems公司，各步骤均严格按照试剂盒说明书进行。用酶标仪依试剂盒的要求，在一定波长的紫外灯下读取各样品的OD值。根据标准品浓度得出校准曲线和换算公式，最后计算出待测样品的浓度。

1.5 统计学分析应用SPSS 13.0统计软件，计量资料以±s表示，采用t检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 临床近期疗效比较 所有入组的54例患者，CR 0例，PR 34 例(62.96%)，SD 9 例(16.67%)，PD 11 例(20.37%)。有效34 例(62.96%)，无效20 例(37.04%)。

2.2 治疗前后血清VEGF和MMP-9变化比较 与化疗前相比，化疗后血清VEGF水平无明显降低(P ＞0.05)，而MMP-9与化疗前相比有显著降低(P＜0.05)。有效组化疗后血清VEGF水平与化疗前相比有所降低，但差异无统计学意义(P＞0.05);血清 MMP-9水平与化疗前相比明显下降(P＜0.05)。无效组血清VEGF和MMP-9水平的变化差异均无统计学意义(P ＞0.05)。见表1、2。

表1 化疗前后血清VEGF和MMP-9变化比较n=54，pg/ml，±s

表1 化疗前后血清VEGF和MMP-9变化比较n=54，pg/ml，±s

指标 化疗前 化疗后 P值VEGF 296 ±124 288 ±104 1.045 MMP-9 585 ±135 406 ±89 0.038

表2 有效组和无效组血清VEGF和MMP-9化疗前后变化比较pg/ml，±s

表2 有效组和无效组血清VEGF和MMP-9化疗前后变化比较pg/ml，±s

3 讨论

肿瘤的形成、生长、侵袭和转移都依赖于血管生成。VEGF在肿瘤血管生成中发挥重要作用，VEGF可刺激肺癌组织微血管生长和促使血管通透性增加而促进肺癌的进展和转移。VEGF过表达对NSCLC，尤其是腺癌患者的生存期产生不利影响［2］。MMP-9可激活形成Ⅳ型胶原酶，降解与血管生成相关的Ⅳ型胶原蛋白，在细胞外基质的降解和再塑造中发挥作用。MMP-9可能参与肿瘤进展的许多过程，如基质膜的降解、肿瘤细胞进入血液循环、局部迁移、肿瘤生长和血管生成的微环境的形成等［3］。有研究证实，VEGF和MMP-9在非小细胞肺癌中表达增高，而且与分化程度、淋巴结转移及TNM分期相关［4］。也有研究发现MMP-9的疗前水平与NSCLC的预后相关［5］。

虽然大量研究表明疗前VEGF和MMP-9水平与NSCLC患者的生存相关，但是化疗与VEGF、MMP-9血清水平的变化之间的关系却知之甚少。Yoshimoto等［6］用吉非替尼治疗晚期非小细胞肺癌患者52例后，发现MMP-9与疗前相比无显著变化。本研究发现，经过以铂类为基础的一线化疗后，总有效率为62.96%。测定化疗前后VEGF与MMP-9血清水平的变化，结果发现VEGF血清水平在化疗前后无显著差异，可能由于样本量较少，研究本身存在一定局限性，因此还有待于进一步扩大样本量进行观察。化疗有效组MMP-9血清水平明显降低，提示MMP-9可以作为判断疾病进展的重要指标。

MMP-9是一个功能复杂的分子，在肿瘤进展过程中发挥重要作用。据文献报道，MMP-9可以介导Kit配体释放，从而诱导骨髓造血细胞的动员，它可以重构细胞外基质，促使VEGF与内皮细胞表面的受体结合，从而促进新血管的生成［7］。此外，有研究发现MMP-9与一些皮肤肿瘤的进展或预后相关，如恶性黑色素瘤［8］，基底细胞癌［9］等。近来有研究报道，通过双磷酸盐抑制MMP-9作为恶性血管内皮细胞瘤的支持治疗，可以抑制肿瘤血管生成，诱导抗肿瘤免疫［10］。

综上所述，本研究发现化疗有效的NSCLC患者血清MMP-9水平较化疗前显著降低，提示MMP-9可以反映患者病情的变化，为病情的进展和预后提供依据。MMP-9和VEGF对NSCLC疗效评价的意义尚未完全揭示，有待于进一步的研究。

1 Waters JS，O’Brien MER.The case for the introduction of new chemotherapy agents in the treatment of advanced non small cell lung cancer in the wake of the findings of The National Institute of Clinical Excellence(NICE).Br J Cancer，2002，87:481-490.

2 Cox G，Jones JL，O’Byrne KJ.Matrix metalloproteinase 9 and the epidermal growth factor signal pathway in operable non-small cell lung cancer.Clin Cancer Res，2000，6:2349-2355.

3 Ertan E，Soydinc H，Yazar A.Matrix metalloproteinase-9 decreased after chemotherapy in patients with non-small cell lung cancer.Tumori，2011，97:286-289.

4 付伟，高杨，刘爱东.VEGF、MMP29和E2cadherin在非小细胞肺癌中的表达及其关系.肿瘤防治研究，2010，37:226-228.

5 Zheng S，Chang Y，Hodges KB.Expression of KISS1 and MMP-9 in nonsmall cell lung cancer and their relations to metastasis and survival.Anticancer Res，2010，30:713-718.

6 Yoshimoto A，Kasahara K，Nishio M.Changes in angiogenic growth factor levels after gefitinib treatment in non-small cell lung cancer.Jpn J Clin Oncol，2005，35:233-238.

7 Heissig B，Hattori K，Dias S.Recruitment of stem and progenitor cells from the bone marrow niche requires MMP-9 mediated release of kit-ligand.Cell，2002，109:625-637.

8 Vihinen PP，Hernberg M，Vuoristo MS.A phase II trial of bevacizumab with dacarbazine and daily low-dose interferon-alpha2a as first line treatment in metastatic melanoma.Melanoma Res，2010，20:318-325.

9 Monhian N，Jewett BS，Baker SR.Matrix metalloproteinase expression in normal skin associated with basal cell carcinoma and in distal skin from the same patients.Arch Facial Plast Surg，2005，7:238-243.

10 Ishibashi M，Fujimura T，Hashimoto A.Successful Treatment of MMP-9 Expressing Angiosarcoma with Low-Dose Docetaxel and Bisphosphonate.Case Rep Dermatol，2012，4:5-9.