两种不同套材制备洗涤红细胞的质量比较

李玉秋 时 卉丽 孙晓红

洗涤红细胞是一种重要的红细胞制剂，由于在洗涤中它去除了80%以上的白细胞和98%以上的血浆蛋白，同时去除了钾、氨、乳酸、抗凝剂和微凝物等，故应用本制品可显著降低输血不良反应的发生率。其临床应用比例逐年增高，而采用多联袋系统制备WRC，不用反复开放血袋即减少了细菌污染的机会又省时省力，应用越来越普遍，我站采用两种不同样式的联袋套材(用A、B表示)各制备30袋洗涤红细胞进行对比实验，并将其质量检测情况进行分析，报告如下。

1 材料与方法

1.1 红细胞来源 本站采集制备的3～6 d内的400 ml全血，2 U去白悬浮红细胞为原料红细胞。

1.2 考察对象 洗涤套材A(型号:CB－CPCM406C20，批号:20101222N)为MAP五联袋，洗涤套材B(型号:ACM505B01，批号:85EH23AB003)为250 ml三联盐水加100 ml红细胞保存液袋。

1.3 仪器与设备 RC12BP大容量低温离心机(美国Kendro公司)，全自动无菌罐对接机(日本Terumo公司)，日立7180全自动生化分析仪(日本株式会社日立高新技术公司)，AC.T 5diff AL血球计数仪(贝克曼库尔特)，Nageotte血细胞计数盘

1.4 方法

1.4.1 应用洗涤套材A制备:本套材自带采血针头，直接将全血采集到含CPD液的母袋中，离心，将血浆分至空转移袋，并一同去除白膜，再将第三袋中的洗涤液液加入母袋中、混匀，进行第一次洗涤;再离心，分出上清液将第四袋中的洗涤液220g－230g加入母袋中，混匀，进行第二次洗涤;重复操作，进行第三次洗涤;最后向洗涤三遍红细胞洗涤袋中加入第五袋中的红细胞保存添加剂100g，封口热合即可。

1.4.2 应用洗涤套材B制备:通过无菌接驳机将要制备的原料血(通常为去白悬浮红细胞)与生理盐水联袋接通，在2～6℃ 2 840 r/min速度离心14 min，制成浓缩红细胞再依次加入250 ml 0.9%氯化钠溶液分3次对红细胞进行洗涤，在洗涤过程中尽可能移去白膜。最后在红细胞中加入100 ml的红细胞保存液制得。

1.4.3 检测方法:血细胞分析仪测定红细胞回收率，Nageotte血细胞计数盘测定白细胞清除率;双缩脲试剂测定血浆蛋白清除率。

1.5 统计学分析应用SPSS 13.0统计软件，计量资料以±s表示，采用t检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两种套材的异同点比较 见表1。

表1 两种套材比较

2.2 两种套材制备的WRC制品的质量检测结果见表2。

表2 两种套材制备WRC制品质量比较%，±s

表2 两种套材制备WRC制品质量比较%，±s

注:与洗涤套材A比较，*P ＜0.01

洗涤红细胞上清残留蛋白含量洗涤套材 A 0.80 ±0.42 84.4 ±2.29 99.35 ±0.47 0.511 ±0.042套材 红细胞回收率 白细胞清除率 血浆蛋白清除率洗涤套材 B 0.89 ±0.38* 98.5 ±1.99* 96.97 ±1.21*0.508 ±0.039

3 讨论

国家对洗涤红细胞质量的要求是:回收率≥70%;白细胞清除率≥80%;血浆蛋白清除率≥98%［1］。按照这一标准两种套材在红细胞回收率和白细胞清除率上均达标，而B套材的血浆蛋白清除率未达标，我们分析原因认为:血浆蛋白清除率在很大程度上受到原料血中蛋白含量的影响，这是因为A套材以全血为原料血，其中含有大量血浆蛋白，而B套材的原料血是去白悬浮红细胞，因为分离制备时已经去除了大部分血浆，其蛋白含量自然就低，这样按照计算公式［2］B套材制备的洗涤红细胞蛋白清除率有很多都不达标，而实际上B套材制备的洗涤红细胞中血浆蛋白的残留量并不多，所以血浆蛋白清除率并未能真正反映洗涤红细胞血浆的残留程度，我们认为血浆蛋白残留量更能体现该产品的质量，这一点有关文献也有报道［3］。另外，从检测指标上看A型联袋在红细胞回收率和白细胞清除率上都要略差于B型联袋，分析原因应该是由于它是集采血和洗涤制备于一体的全封闭血袋，原料血是全血，制备工艺采用的是传统的手工挤白膜法，白细胞的去除是与离心效果和制备经验手法密切相关，去除率可以达到80%以上;B型联袋的原料血是已经用去白滤器过滤了的去白悬浮红细胞，而去白滤器就能去除90%以上的白细胞，再经过三次洗涤后白细胞去除率可以达到99%以上;在红细胞回收率上由于A套材为了提高白细胞清除率，手工去白膜操作会丢失大量红细胞，而B套材损失的红细胞只是滤除白细胞时残存在滤器中损失掉的，3次洗涤很少损失，因此红细胞回收率也比较高。这样看来B套材由于可以自由选择原料血故应用更灵活方便，但A套材始终使血液处于封闭状态减少了污染机会，其洗液为红细胞保存液，可以使红细胞始终处于被保护状态，可以更好的维持红细胞功能。综上所述两种套材各有优点，大家可根据不同需要使用。

1 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局.GB 18469－2001全血及成份血质量要求.北京:中国标准出版社，2001.

2 中华人民共和国卫生部.中国输血技术操作规程.天津:天津科学技术出版社，1997.15-16.

3 蔡雁，张颖.2种原料制备洗涤红细胞蛋白清除率结果比较.中国输血杂志，2009，22:1008-1009.