超临界CO2萃取蜂胶护肤霜的制备

赵璐　张培培　杜康

摘 要：文章使用超临界CO₂萃取技术对蜂胶进行提取，将得到的蜂胶提取物加入护肤霜中制成蜂胶护肤霜，该护肤霜有较好的美容功效。

关键词：超临界CO₂萃取；蜂胶；护肤霜

中图书分类号：S896.6 文献标识码：A 文章编号：1006-8937（2012）32-0175-02

蜂胶是蜜蜂从植物树皮、枝条和嫩芽上采集的树脂状分泌物，混入其上颚腺分泌物和蜂蜡等加工咀嚼而成的一种具有芳香气味的胶状固体物。享有“黄酮宝库”和“紫色黄金”的美誉。蜂胶呈棕黄色、棕褐色，有时略带青绿色，少数黑褐色，有光泽。常温下呈不透明团块或碎片状，20℃以下有脆性，30℃逐渐变软，有粘性。蜂胶不溶于水，易溶于乙醚、丙酮、氯仿、乙醇等。

蜂胶的化学成分极为复杂，大约有三百多种天然成份。其中包括三十多种人体必需的微量元素，二十种氨基酸，数十种芳香族化合物，大量的黄酮类物质，维生素、木脂体、酶类、多糖等具有生物活性的天然成份。近年来的研究表明，蜂胶的生物学、药理学及医疗功效主要与蜂胶中所含黄酮的种类和数量有关。蜂胶中已分离鉴定的黄酮类物质，其数量之多是目前我们研究的任何一种中草药所不及的。随着生活水平的提高，消费观念不断更新，人们对含有天然活性成分的蜂胶越来越重视。蜂胶已成为当前国内外日化品以及美容保健食品开发研究的一个热点。我国是世界第一蜂胶生产大国，目前由国家食品药品监督管理局批准的蜂胶保健食品已经有50多个。此外，蜂胶在国内外已被开发成系列产品，医药产品如润喉片、口服液、片剂、酊剂、止咳剂、洁口剂，生活日用产品如蜂胶牙膏、蜂胶护发香波、蜂胶沐浴露、蜂胶洗面奶、蜂胶洗手液、蜂胶香皂、防晒膏等等。

目前市场上的蜂胶产品，能见到的几乎全是黑色或赤褐色的液体或胶囊，这是由于蜂胶原胶在使用乙醇为提取剂时生成了一种多酚咖啡酸聚合物。同时乙醇的残留，使得消费者在使用蜂胶产品时增加了过敏的可能性。普通蜂胶提取方法存在生产周期长等缺陷，为了寻找更科学更先进的蜂胶提取工艺，提高蜂胶有效成分的提取率，超临界CO₂萃取技术越来越受到人们的关注。本文使用超临界CO₂萃取技术对蜂胶进行提取，并进行后续实验制成蜂胶护肤霜。

1 材料与仪器

1.1 材 料

蜂胶（扬大实验蜂场）、芦丁标准品（北京化学试剂公司）、95%乙醇、硬脂酸、单硬脂酸甘油酯、十六醇、白油、鲸蜡醇、硬脂醇、丙二醇、三乙醇胺、甘油、橄榄油、甘油硬脂酸单脂、氢氧化钠、氢氧化钾、香精（玫瑰、柠檬），以上试剂均为分析纯；防腐剂（尼泊金丙酯，自制）、蒸馏水、精密pH试纸。

1.2 仪 器

SFE 500 超临界流体萃取系统（Thar Technologies公司）；高速万能粉碎机（北京中西远大科技有限公司）；紫外可见分光光度计、电动搅拌器、温度计、电子天平、电炉、水浴锅、旋转蒸发器。

2 实验方法

2.1 蜂胶提纯

从蜂箱里采集的粗蜂胶中往往混杂着树脂和胶状物质、蜂蜡和花粉夹杂物等多种物质。而蜂蜡会微溶于乙醇，影响蜂胶中黄酮类化合物的提取和质量控制，并且不被人体吸收，故应先去除蜂蜡。

将粗蜂胶冷冻，粉碎，称取10 g放入盛有水的烧杯中（水大约250 ml左右），70℃水浴加热，不断搅拌，使蜂蜡析出。当没有杂质再从烧杯底部浮上水面时，停止加热。用滤纸滤去上层液，再加入70 ml乙醇，放置搅拌。当胶状物全部溶解时，停止搅拌。减压抽滤，将滤液进行旋转蒸发，将剩余溶液（除蜡蜂胶）低温冷冻过夜，得棕褐色固体。再次粉碎，晾干，备用。

2.2 超临界CO₂萃取蜂胶

超临界流体萃取是近十几年来迅速发展起来的一项新技术。超临界流体，是介于气液之间的一种既非气态又非液态的物态，这种物质只能在其温度和压力超过临界点时才能存在。超临界流体的密度较大，与液体相仿，而它的粘度又较接近于气体。因此超临界流体是一种十分理想的萃取剂。CO₂气体的临界温度和临界压力低（31.06℃，7.39 MPa），而且无色、无味、无毒、价格便宜、易提纯，因而成为应用最为广泛的超临界流体。传统的蜂胶萃取技术，需高温将提取液中乙醇蒸发，浓缩过程中萜烯类等挥发油损失很大，活性成分遭到破坏；将超临界流体萃取技术用于蜂胶萃取，则避免了这些情况。

将所得除蜡蜂胶用纱布包好，放入萃取釜中。开启超临界CO₂萃取装置，将CO₂加压、加温。设定试验条件：萃取温度恒定为60℃，选取萃取压力为25 MPa，乙醇浓度95%，固液比6：1，萃取时间为4 h，流体流速35 kg/h。萃取结束后收集蜂胶提取液。

2.3 黄酮含量的测定（芦丁法）

参照文献方法，根据吸光度值、稀释度和标准曲线得出样品中黄酮的含量。

2.4 护肤霜的制备

护肤霜是白色膏状乳剂类化妆品。乳剂是指一种液体以极细小的液滴分散于另一种互不相溶的液体中所形成的多相分散体系。护肤霜通常是以硬脂酸皂为乳化剂的水包油型乳化体系。水相中含有多元醇等水溶性物质，油相中含有脂肪酸、长链脂肪酸、多元酸等非水溶性物质。当护肤霜被涂于皮肤上，水分挥发后，吸水性的多元醇与油性组分共同形成一个控制表皮水分过快蒸发的保护膜，它隔离了皮肤与空气的接触，避免皮肤在干燥环境中由于表皮水分过快蒸发导致的皮肤干裂。也可以在配方中加入一些可被皮肤吸收的营养物质。

蜂胶无毒、安全、缓稳、长效，可长期每天使用，能收到养颜护肽的最佳效果。我们在护肤霜中加入由超临界CO₂萃取所得到的蜂胶提取物，以提高护肤霜的美容功效。

2.4.1 配方的确定

所得到的蜂胶护肤霜配方成分及加入量如表1所示。

2.4.2 配 制

按配方一中的量分别称量硬脂酸、单硬脂酸甘油酯、白油、十六醇和丙二醇，将称量好的原料加入250 ml烧杯中，水和碱称量后加入另一250 ml烧杯中。分别加热至90℃，使物料熔化、溶解均匀。再缓慢加入蜂胶提取物，调节电动搅拌器搅拌均匀。装水的烧杯在90℃下保持20 min灭菌。然后在搅拌下将水慢慢加入到油相中，继续搅拌，当温度降至50℃时，加入自制防腐剂尼泊金丙酯。降温至40℃后，加入香精，搅拌均匀。静置、冷却至室温。调整膏体的pH，使其在要求的范围内。

将配制好的蜂胶护肤霜静置72 h，没有分层和变色情况发生。

3 结 语

我国轻工业部护肤霜的标准要求理化指标要求包括：膏体耐热稳定性，微碱性pH≤8.5，微酸性pH4.0～7.0；感官要求包括：色泽、香气和膏体结构（细腻，擦在皮肤上应润滑、无面条状、无刺激）。按照表1中配方配制的护肤霜经试用后完全符合行业要求，配方中添加了超临界CO₂萃取法所得到的蜂胶提取液以提高美容功效。我们以芦丁为对照品，采用分光光度计法测定了该蜂胶提取物中的总黄酮含量，经计算得到总黄酮提取率为17.2%。黄酮类物质具有很好的抗氧化作用，能稳定和清除自由基，减少脂质过氧化物和脂褐素的产生与沉积，保护细胞膜，增强细胞活力。这类成分有很好的抗衰防老、降血脂、预防动脉粥样硬化、治疗慢性前列腺炎、抗癌抗肿瘤、增强免疫力等效果，医疗保健和美容功效显著。我国蜂胶资源丰富、价格相对较低，随着蜂产品深加工技术的开发利用，蜂胶的研究、开发和应用必将会有更广阔的前景。

参考文献：

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