四数九里香水提液对离体蟾蜍坐骨神经动作电位的影响

2013-07-09杨刘英姿李旭伟胥正敏

中国民族民间医药 2013年7期

金曼肖阳杨刘英姿宋强刘丹林欢李旭伟胥正敏

1.川北医学院基础医学院机能实验中心，四川南充 637000;2.川北医学院麻醉学系，四川南充 637000;3.川北医学院药学院，四川南充 637000

四数九里香 (Murraya tetramera Huang)又称千里香、满山香、过山香、千只眼等，为芸香科九里香属植物，是一种落叶乔木，产于广西的百色、德保和云南的砚山、富宁、文山、西畴，常见于石灰岩山顶阳光充足的地方，以根和叶入药，性辛、苦、微寒。具有行气止痛、活血化瘀、祛风除湿、麻醉镇惊等功效［1］。早期曾有报道，九里香在临床上可用于局部麻醉、抗生育作用、治疗流行性乙型脑炎、破伤风、急慢性肾炎等。现代药理学研究表明，九里香具有抗生育和终止妊娠、抗菌、抗甲状腺肿大、降血糖、麻醉镇静及增强免疫功能等作用［2］。相关研究表明，九里香在醋酸致痛小鼠扭体试验 (Nakainur的方法)及热板试验 (Eddy的方法)中均表现出一定的镇痛作用，说明其具有一定的外周镇痛及中枢镇痛作用［3］。本研究从电生理学的角度，观察不同浓度四数九里香溶液对离体蟾蜍坐骨神经动作电位的影响，以进一步探讨九里香镇痛作用的可能机制。

1 材料和方法

1.1 实验试剂任氏液 (NaC1 6.5g，KC1 0.14g，CaCl20.12g;NaHCO30.20g;NaH2PO40.01g加蒸馏水至1000 ml，所用试剂均为化学纯，购自成都科龙化工试剂厂);四数九里香水提液:四数九里香购自广西地道药材铺，取260g阴干四数九里香枝叶，粉碎，加任氏液梯度超声浸泡法，过滤制成3.75L水提液，浓度为0.069g/ml原生药浓度，取200ml用任氏液稀释为 0.0045g/ml，0.009 g/ml，0.0175 g/ml，0.035g/ml溶液。

1.2 实验仪器 BL－420F生物机能实验系统 (四川成都泰盟科技有限公司);神经屏蔽盒 (四川成都泰盟科技有限公司);电子天平Model:ES6000－1(沈阳龙腾电子有限公司生产)。

1.3 实验动物分组中华大蟾蜍24只，雌雄兼用，体重80～100g，由川北医学院实验动物中心提供，随机分为6组 (任氏液组，0.0045g/ml，0.009 g/ml，0.0175 g/ml，0.035g/ml，0.069g/ml四数九里香溶液组)，每组6只。

1.4 坐骨神经标本制备将蟾蜍进行称重，捣毁脑和脊髓，分离坐骨神经3～5cm，尽量将神经干周围的组织剔除干净，神经干脊柱端和足端用棉线结扎，置于任氏液中浸泡孵育10分钟以稳定其兴奋性。

1.5 动作电位引导并记录将孵育后的神经干慢慢沿培养皿壁取出，沥干其水分，搭到神经屏蔽盒的电极上，测定动作电位振幅和传导速度。再将神经干取出屏蔽盒，放入不同浓度四数九里香溶液中浸泡2分钟，沿管壁轻轻取出，沥干其水分并防止刮伤神经。将该神经干依照之前的位置搭在电极上，在位于刺激电极与引导电极的神经干上分别放置浸湿药液 (0.0045g/ml，0.009 g/ml，0.0175 g/ml，0.035g/ml，0.069g/ml四数九里香溶液)的小棉条，用BL－420F生物机能实验系统每隔5分钟检测动作电位相关值。动作电位速度测定需要测量两个电极之间距离。单个动作电位及传递速度测定仪器设置值:方式，单刺激;延时，5.00ms;波宽，0.05ms;强度，1.00v;频率，10KHz;采样率，1.25ms/div。

1.6 数据处理记录各组给药前与浸泡后坐骨神经复合动作电位的振幅与传导速度，实验数据用±s描述，采用配对t检验进行显著性检验。