温阳通络凝胶治疗腰椎间盘突出症的实验研究

李玉奎 马振勇 冯传博 余 堃

温阳通络凝胶治疗腰椎间盘突出症的实验研究

李玉奎 马振勇 冯传博 余 堃

目的观察温阳通络凝胶治疗腰椎间盘突出症的作用。方法建立大鼠腰椎间盘突出症神经根受压模型，观察高倍光镜下3个视野的神经根、神经节炎性细胞数目及对大鼠后肢的机械性刺激阈值的影响。结果温阳通络凝胶在一定程度上有减少腰椎间盘突出症模型大鼠神经节、神经根炎性细胞浸润作用的趋势，可提高机械性压迫所致的痛阈值。结论温阳通络凝胶有一定抗炎、镇痛作用。

温阳通络凝胶；腰椎闻盘突出症；实验研究

1 资料与方法

1.1 实验材料

1.1.1 实验动物选用SPF级成年SD大鼠60只，雌雄各半，体重250～300g。随机分为A：空白对照组；B：模型对照组；C：黑膏药组；D：治疗组，每组15只。

1.1.2 实验药品温阳通络凝胶，药物组成：生川乌30g，生草乌30g，生马钱子20g，生白芍50g，生麻黄50g，桑寄生40g，生黄芪40g，防风20g，雪上一枝蒿50g，桂枝30g。基质为聚乙烯醇等。温阳通络凝胶10cm2/kg，生药0.41/kg；黑膏药：加广丹熬制成黑膏药。以上均制成1.5×3.0cm大小，外用。

1.1.3 实验试剂及仪器YLS-3E型电子压痛仪；电子天平：SARTORIUS AG GOTIINGEN R200D德国产品。

1.2 实验方法

1.2.1 造模除空白对照组外，大鼠适应性喂养1周，40mg/kg戊巴比妥钠腹腔内注射麻醉，背部手术区域备皮消毒、铺无菌巾。以双侧髂棘最高点连线为中心，取背部后正中切口，依次切开皮肤、皮下组织并沿棘突两侧剥离。利用专门的动物手术器械，包括微型咬骨钳、血管钳、牵开器及神经剥离子等行L4～L5，L5～L6右侧半椎板及小关节切除，町轻柔粘附于神经表面，无需特殊固定。然后用3-0丝线逐层关闭切口，完成手术。术后当天禁食、禁水，自术后第1天起给予正常食、水，术后连续3天肌注青霉素40万U，术后1周开始治疗。

1.2.2 给药A：正常对照组不作处理；B：模型对照组外敷无菌辅料：C：黑膏药组在背部拆线后外敷黑膏药。D：治疗组在背部拆线后给予温阳通络凝胶外敷。每24小时更换一次。

1.3 检测指标待动物适应饲养环境后，在手术前l天及术后l天、1周、2周及4周分别进行动物的行为学测试和病理学检查。每次进行测试前将大鼠置于测试观察箱中适应20min，尽量消除外界干扰因素对动物的影响。

1.3.1 动物运动功能评价动物运动功能评价是将大鼠置于地面，观察其步态情况。采用Chatani等[3]的运动功能损害评分方法：3分为下肢功能严重受损，无法行走；2分为中度受损，可以行走，但呈现明显跛行步态；1分为轻微跛行；0分代表行走正常。

1.3.2 测量大鼠后肢的机械性刺激阈值采用YLS-3E型电子压痛仪测定给药第1、7、14、28天大鼠右后足的痛阈值。比较给药第1、7、14、28天各组大鼠痛阈值。

1.3.3 病理学检查C组和D租分别于满4周后，用空气栓塞法每组处死15只实验动物，迅速切下L4/5、L5/6神经根、神经节。4%甲醛固定，组织块经常规脱水，石蜡包埋，切片厚度为5μm，HE染色，图像采集MIQAS医学图象定量分析系统进行图像采集，计数400倍光镜下3个视野的神经根、神经节炎性细胞数目。

1.4 统计学处理计量资料以（±s）表示，进行方差分析，组间t检验，数据统计均由SPSS l3.0软件完成。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 动物运动功能评价所有四组实验动物手术前、后均未出现跛行、步态异常或瘫痪的现象，运动损害功能评分为0分。

2.2 机械性刺激

表1 机械性压迫所致痛阈值的影响[(±s),n=15]

表1 机械性压迫所致痛阈值的影响[(±s),n=15]

注：与模型对照组比较★P＜0.05，与黑膏药组比较▲P＜0.05

组别 术后1周 术后2周 术后4周空白对照组713.4±105.3★▲718.7±79.1★▲714.3±81.6▲★模型对照组510.3±90.2 528.1±71.3▲627.3±98.6▲黑膏药组 514.3±91.2 613.1±102.2★678.8±101.5★治疗组 518.1±101.3 644.2±97.5★716.2±94.5▲★

空白对照组动物未出现明显的机械痛觉过敏现象；其余大鼠都出现了手术侧（同侧）后肢的机械刺激阈值明显降低；逐渐恢复的一个过程，且痛觉过敏的现象无论是否应用药物，术后4周均能恢复，而用药物治疗的大鼠恢复较快。治疗组与黑膏药相比，在镇痛方面无明显优势。

2.3 病理学检查结果

表2 病理学观测到神经根炎性细胞数目[(±s),n=15,个数,/HP]

表2 病理学观测到神经根炎性细胞数目[(±s),n=15,个数,/HP]

注：与模型对照组比较★P＜0.05；与黑膏药组比较▲P＜0.05

组别 炎性细胞总数中性粒细胞 巨噬细胞 淋巴细胞空白对照组1.90±1.41★▲0.47±0.27★0.24±0.14★▲1.21±1.43★模型对照组4.77±2.12▲0.97±0.91▲0.83±0.75▲2.95±1.71▲黑膏药组3.50±2.81★0.63±0.96★0.41±0.58★2.30±1.12治疗组 2.21±1.91★▲0.33±0.16★▲0.40±0.50★1.50±1.01★▲

3 讨论

本方以《伤寒论》乌头汤为基本方进行加减而成，乌头汤能温经散寒止痛，主治寒痹。因临床所见椎间盘脱出症患者大多畏寒怕冷，所以我校附属医院以本方制成黑膏药外敷取得良好效果。然而黑膏药采用麻油炸法，对中药材中各种有效成份的提取度很小，难以达到有效的治疗浓度；而且，中药复方制剂的成分复杂，通常不提取单一纯品，用药剂量一般较大，又可容纳中药复方的极细药粉、提取药物等，工艺条件简单，适合中医药的发展[2]。本文通过动物实验证实，制剂改革后，使用温阳通络凝胶制剂用药1周时无明显变化，用药3周时其镇痛效果明显优于黑膏药；在抗炎方面，新制剂与传统制剂相比，对于神经根上炎性细胞的总数有显著地统计学意义。

[1]车立新,依力哈尔•沙迪克,谢淑萍,等.手术和保守治疗腰椎间盘术后椎间盘炎疗效的病例对照研究[J].中国骨伤,2012,25(8)：670-673.

[2]王金凤,蔡兴东.中药凝胶剂研究近况[J].中国当代医药,2011, 18(2)：14-15.

[3]Olmarker K, Nutu M, Storkson It, et a1.Changes in Spontaneous Behavior in Rats Exposed to Experimental Disc Herniation are Blocked by SelectivenTNF-Alpha Inhibition[J].Spine,2003,28： 1635-1642.

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】1673-5846(2013)08-0038-02腰椎间盘突出症是常见病、多发病。保守治疗可以获得较为满意的远期疗效[1]。中药外敷一直是有效的治疗方法，但制剂落后，制剂改革势在必行，而凝胶制剂的研究日益受到重视[2]。温阳通络凝胶将传统的黑膏药改成凝胶制剂，通过实验研究，验证其疗效和发现其作用机理，更好地为临床应用提供科学依据。

商丘医学高等专科学校，河南商丘 476100