GSTM1基因多态性与老年高血压患者肝脏耐降压药损害的相关性

陈秀红 苏 娅 吴 恳 吴超英 羊江鸿

(海南省干部疗养院，海南 海口 571100)

老年高血压患者在治疗的过程中往往使用两种或以上的降压药，而这些降压药可能会对老年患者的肝、肾等器官造成严重影响。药物在肝脏的代谢与生物转化酶类具有密切的关联性，谷胱甘肽转移酶(GSTM)1是肝脏生物转化的重要酶类之一，该酶基因的多态性对酶的功能可产生影响，从而间接影响肝脏的生物转化能力。硝苯地平和依那普利是临床中经常用到的降压药〔1～3〕。本课题组对长期服用此两类药物进行降压的患者进行比对研究，试图了解此两类药物对老年患者肝脏的损害情况及GSTM1基因多态性与患者肝脏对以上两类药物所致损害的耐受性的相关性。

1 资料与方法

1.1 一般资料及纳入标准 纳入2010～2012年在我院就诊的老年原发性高血压患者，所有患者均符合以下条件:年龄60～80岁，近5年主要使用硝苯地平(硝苯地平控释片，20 mg)和依那普利(10 mg，2次/d)进行降压，排除肝肾功能不全、心肌梗死等器质性疾病。

根据以上标准，选择417例患者作为实验组，其中男281例，女136例，平均年龄(75.6±6.4)岁。选择同期在我院进行体检的健康人群420例作为对照组，其中男285例，女135例，平均年龄(74.7±5.3)岁。两组患者的基本资料经统计学分析显示具有可比性(P＞0.05)。

1.2 方法

1.2.1 样本的采集方法 实验组和对照组患者均于清晨采集EDTA抗凝血和促凝血各2 ml，促凝血收集血清用于酶学测定，抗凝血用于基因检测。

1.2.2 血清酶的测定方法 采用全自动生化分析仪测定所有患者的血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)及碱性磷酸酶(AKP)活性。

1.2.3 基因多态性的检测 采集患者外周血，提取基因组DNA。利用PCR的方法扩增包括GSTM1多态性位点rs412502的区段。引物为:P1(ttctgtgggttgttacttcat)，P2(cgattatatctgagacctcaac)，扩增片段为220 bp。反应体系为:15μl反应体系中含有1 μl基因组 DNA，1.5 μl 10倍缓冲液，0.3 μl dNTP，0.15 μl引物混合物。反应条件:95℃预热3 min;94℃ 15 s，60℃ 15 s，72℃ 30 s 循环 11 次;94℃ 15 s，54℃ 15 s，72℃ 30 s，循环 24次;72℃ 3 min。将PCR产物送上海捷瑞生物工程有限公司进行序列测定。

1.3 统计学方法 采用SPSS13.0软件进行t和χ2检验。

2 结果

2.1 血清酶学检测结果 实验组中三种酶的活性均高于对照组，尤其是ALT和AKP的活性组间差异具有统计学意义(P＜0.05)。将ALT＞40 U/L或AKP活性＞128 U/L的病例判定为肝损害发生者，实验组417例患者中有249例发生肝损害，168例未发生肝损害。见表1。

表1 实验组与对照组血清酶活性的检测结果

2.2 基因多态性检测结果 rs412502多态位点可检测出CC、CT、TT三种基因型，实验组中以上三种基因型出现的频率为25.18%、59.23%、15.59%，发生肝损害的频率为 18.7%、34.53%、6.47%，未发生肝损害的比率为 6.47%、24.7%、9.11%。统计学分析结果显示CC和TT基因型的发生率在肝损害组和未损害组间的差异均具有统计学意义(P＜0.05)。

3 讨论

肝是体内生物转化的主要器官，也是药物代谢及排泄的重要转化场所〔4〕。几乎所有的药物最终都要通过肝脏细胞的生物转化作用后才能排出体外。在服用药物的过程中，往往容易对肝造成一定的损伤，此即药物性肝损伤。对身体机能已经衰退的老年人来说，肝损伤更容易发生。肝脏损害可影响到全身的代谢状况，从而进一步引发其他组织器官的损害，恶化老年患者的身体状况〔5，6〕。

老年高血压的患病率较高，是影响老年人生命质量重要的因素之一。由于高血压很难治愈，患者需要长期服用降压药。目前降压药种类很多，硝苯地平和依那普利是临床中的常用药。尽管关于硝苯地平的副作用已有相关的报道，但对于此两类药物联用对肝脏造成的损伤研究尚少，AST、AST、AKP均存在于正常的血清中，而在全身的组织器官中，以上三种酶类含量最丰富的属肝细胞。当肝脏受到损伤，部分肝细胞的破裂将会使血清中此三类酶活性发生很大的变化，因此血清中此三类酶的活性升高可反映肝脏的损伤情况。本研究结果说明长期服用硝苯地平和依那普利的确对老年患者的肝脏造成了损伤。

基因多态性对机体的代谢具有重要的影响，目前已经发现多种基因位点的SNP多态性可引起机体对药物代谢的差异。GSTM是肝脏生物转化Ⅱ相反应中的重要酶类，对药物的代谢及排泄具有重要的意义〔7〕。截止到2012年底，该基因有153个SNP位点登陆NCBI数据库，rs412502是位于GSTM1基因5'端非翻译区的一个单核苷酸多态位点，该位点的基因型可能影响到基因的翻译效率，从而影响机体相关的代谢途径。本研究结果说明rs412502多态性与高血压患者的肝损害耐受性有关，TT型可增强患者对硝苯地平和依那普利所致肝损害的耐受性，对肝脏起到一定的保护作用。

1 方宁远，汪海娅.老年高血压诊治进展〔J〕.老年医学与保健，2012;18(1):3-5.

2 中国居民营养与健康状况调查技术执行组.中国居民2002年营养与健康状况调查〔J〕.中华流行病学杂志，2005;26(7):478-84.

3 张 瑾.降压药临床应用进展〔J〕.中国当代医药，2012;19(30):20-1.

4 蔡玉华，胥振国，杜 江，等.血脂检测在脂肪肝诊断中应用价值〔J〕.蚌埠医学院学报，2013;38(1):97-8.

5 过 瑞.老年慢性病患者急性药物性肝损伤的临床观察〔J〕.中国老年保健医学，2011;9(1):18.

6 张赣生，保志军，邹 健，等.老年药物性肝损伤的临床特点〔J〕.老年医学与保健，2010;16(3):163-5.

7 聂立红.谷胱甘肽硫转移酶研究进展〔J〕.中国病理生理杂志，2000;16(11):1240-3.