木犀草素对高脂血症大鼠血脂和一氧化氮水平的影响

马宝慧，高永胜，潘桂兰，陈晓东，吕 军

(1包头医学院生理学教研室，内蒙古包头014060;2包头医学院第二附属医院)

木犀草素化学名 3'，4'，5，7-四羟基黄酮，是一种弱酸性四羟基黄酮类化合物，在植物界分布广泛，存在于紫苏、金银花、菊花、四方蒿、忍冬花、芹菜、洋白菜、菜花、胡萝卜等许多天然药物和蔬菜、水果中，具有抗肿瘤、抗炎、抗菌等功效［1］。木犀草素多用于抗炎、抗肿瘤等方面，关于木犀草素对高脂血症大鼠血脂与血浆一氧化氮(NO)水平的影响及其关系鲜有报道。我们于2010年4月～2011年10月进行本研究，以高脂饮食建立高脂血症大鼠模型，探讨木犀草素对大鼠血浆NO水平及血脂的影响。

1 材料与方法

1.1 材料 Wistar大鼠24只，雄性，体质量120～202 g、平均153 g，购自内蒙古大学动物实验中心。高脂饲料由81.3%基础饲料、0.5%胆盐、10%猪油、3%胆固醇、0.2%丙基硫氧嘧啶、5%白糖组成。木犀草素(分析纯，纯度99%，陕西慧科植物开发有限公司)溶于 DMSO(含量 ＜0.1%)，去离子水稀释;血浆NO、一氧化氮合酶(NOS)试剂盒购自南京建成生物工程研究所。

1.2 方法

1.2.1 造模及治疗 动物适应性饲养5 d后，随机分为3组，分别为空白对照组(C组)、高脂血症模型组(H组)、木犀草素治疗组(L组)，每组8只，自由饮水。C组饲喂基础饲料，H组和L组饲喂高脂饲料。高脂血症模型成功建立(30 d)后，L组每天用木犀草素溶液灌胃(5 mg/100 g)，C组和H组每天以同体积去离子水灌胃。治疗时间为30 d。

1.2.2 血浆指标检测 木犀草素治疗30 d后，大鼠禁食12 h后眶静脉采血，分离血浆，酶法检测血浆NOS和甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)水平。NO采用硝酸还原酶法测定。

1.2.3 统计学方法 采用SPSS12.0统计软件对数据进行单因素方差分析，数据采用±s表示。P≤0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 高脂饲料饲喂对大鼠血浆TC、TG水平的影响见表1。结果表明高脂血症大鼠模型建立成功。

表1 高脂饲料饲喂1个月后各组大鼠血浆TC、TG 测定结果(mmol/L，±s)

表1 高脂饲料饲喂1个月后各组大鼠血浆TC、TG 测定结果(mmol/L，±s)

注:与 C 组比较，*P ＜0.05

组别 n TG TC C组8 0.56 ±0.11 1.68 ±0.12 H 组 8 0.96 ±0.10* 3.95 ±0.54*L 组 8 0.94 ±0.10* 3.93 ±0.23*

2.2 木犀草素对大鼠血脂代谢指标的影响 见表2。

2.3 木犀草素对大鼠血浆NO水平及NOS活力的影响 见表3。

表2 木犀草素治疗后各组大鼠血脂代谢指标测定结果(±s)

表2 木犀草素治疗后各组大鼠血脂代谢指标测定结果(±s)

注:与 C 组比较，*P ＜0.05;与 H 组比较，△P ＜0.05

组别 n TG(mmol/L) TC(mmol/L) HDL(mmol/L) LDL(mmol/L)TG/HDL LDL/HDL C 组 8 0.69 ±0.05 1.76 ±0.14 1.29 ±0.09 0.26 ±0.06 0.53 ±0.04 0.20 ±0.04 H 组 8 1.12 ±0.13* 4.06 ±0.60* 0.85 ±0.11* 2.87 ±0.46* 1.33 ±0.10* 3.43 ±0.78*L 组 8 0.73 ±0.08△ 2.32 ±0.39△ 1.22 ±0.07△ 1.05 ±0.50△ 0.60 ±0.08△ 0.85 ±0.41△

表3 木犀草素对各组大鼠血浆NO水平及NOS活力的影响(±s)

表3 木犀草素对各组大鼠血浆NO水平及NOS活力的影响(±s)

注:与 C 组比较，*P ＜0.05;与 H 组比较，△P ＜0.05

组别 n NO(μmol/L) NOS(U/mL)C组8 10.89 ±2.18 5.73 ±0.43 H 组 8 17.34 ±2.72* 6.89 ±0.31*L 组 8 12.77 ±1.86△ 5.97 ±0.42△

3 讨论

本实验采用加喂胆固醇+猪油并辅以猪胆盐的高脂饲料建立高脂血症大鼠模型，检测血浆TC、TG含量显示30 d即造模成功。木犀草素是一种黄酮类物质，已被国外确认为一种法定的食品色素，其作为食品添加剂是安全的。本研究旨在分析木犀草素对高脂血症的治疗作用。

血浆LDL是转运肝合成的内源性胆固醇的主要形式，其浓度升高被认为是动脉粥样硬化形成的危险因子。HDL通过三磷酸腺苷结合转运子A1(ABCA1)和三磷酸腺苷结合转运子G1(ABCG1)及SB-RI受体将外周细胞特别是巨噬细胞和泡沫细胞胞膜上的胆固醇转移至肝脏［2］，有利于维持外周细胞特别是动脉壁细胞的胆固醇平衡，从而防止动脉粥样硬化的发生。冠心病、代谢综合征和糖尿病患者体内HDL的促进胆固醇逆向转运的生物学活性遭到破坏，表现为不同程度的促进胆固醇外流能力下降。LDL/HDL是颈动脉粥样硬化的独立危险因素［2］。目前多数研究发现，TG/HDL水平与冠心病的发病独立相关［3］。本实验结果显示，对模型动物采用木犀草素治疗后，可使血浆LDL含量降低，HDL含量升高，LDL/HDL降低;木犀草素治疗组血浆TG、TC含量及TG/HDL均显著低于模型组。这些结果提示木犀草素通过降低LDL含量和升高HDL含量从而改善血脂代谢、降低动脉粥样硬化风险。

血脂升高使机体自由基产生和清除平衡被破坏，大量的氧自由基可减弱脂蛋白脂酶的活性、升高TG和降低HDL，进一步加重脂质代谢紊乱［4］。本研究发现高脂血症模型大鼠血浆NO含量显著增加。NO可与超氧阴离子反应，生成一种强氧化剂——过氧化亚硝酸(ONOOH)，诱导脂质过氧化反应。正常动物血浆中含有生理量的NO，在体内广泛参与多种生理过程。但在受到外界刺激时，体内多种细胞如巨噬细胞、肝细胞、软骨细胞、滑膜细胞等可异常表达 NOS，产生比生理量多得多的NO［5］，且持续时间更长，对细胞造成损害。本研究也发现高脂血症动物血浆NOS活性显著升高，因此推测高脂可能刺激细胞异常表达NOS，产生大量NO，从而引起血浆NO含量明显增高。这与多数研究者的研究结果一致［6，7］。在木犀草素灌胃30 d后实验大鼠血浆NOS活性下降，提示木犀草素可以抑制NOS活性从而降低血浆NO含量。

综上所述，体脂过高刺激细胞NOS异常表达，产生大量NO，造成细胞损伤。木犀草素可降低血脂以抑制NOS活性，降低NO等自由基含量，进而抑制脂质过氧化。

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