影响蛋鸡血液指标检测的因素及解决措施

邓 卉

（四川省畜牧科学研究院饲料研究所，四川 成都 610066）

1 检测指标列举

蛋鸡血液指标包括常规指标和生化指标。血液常规指标主要包括白细胞计数（WBC）、红细胞计数（RBC）、血红蛋白（HGB）、红细胞压积（HCT）、血小板计数（PLT）等；生化指标主要指谷氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸转移酶（AST）、碱性磷酸酶（ALP）、总蛋白（TPRO）、白蛋白（ALB）、尿素氮（UN）、肌酐（CRE）、血糖（GLU）、总胆红素（TBILI）等。

2 影响血液指标测定结果的因素及解决措施

2.1 样品采集前影响检测结果的因素及处理方案

2.1.1 饮食因素 由于采血对象进食会对许多血液指标分析产生光学干扰作用，所以采集标本前，实验人员需对试验蛋鸡做下列处理工作：在鸡只进食12～16h后空腹静脉采血，临采血前禁止饮水。

2.1.2 生理因素 试验蛋鸡在生理上具有个体差异性，每只鸡的机体功能和代谢水平都不尽相同，并且由于生理波动性的存在，其不同时段的血液理化指标值也存在着差异，这种差异是正常的、必然存在的。基于上述原因，实验人员需在采集血样前观察各蛋鸡的健康和精神状况，为蛋鸡提供一个舒适的生活环境，保证蛋鸡每天有规律的饮食作息，避免发生异常状况。

2.1.3 抗凝剂使用量与采血量的比例关系 对于血常规检测，采血样本需加入抗凝剂，且样本量与抗凝剂用量的比例要合适。血液比例过高时，容易出现微凝块，可能阻塞血细胞分析仪，同时影响一些检验结果；血液比例过低，抗凝剂相对过剩，会引起血细胞形态和体积的一些改变，也会导致结果不准确。基于上述缘由，采血前应根据试验所需的标本量选择适当比例的抗凝剂加入采样管并密封好，事先做好准备工作，避免产生检测误差。

2.2 样品采集过程中影响检测结果的因素及应对措施

2.2.1 标本溶血 标本溶血是血液采集过程中对检测结果产生严重影响的一个因素，出现这种现象的主要原因有以下几个方面：（1）静脉穿刺困难导致抽血不顺利，针头在蛋鸡皮下反复多次穿刺，过度损伤组织。（2）抽血时抽动注射器活塞过快、负压过大致使血液快速通过针头。（3）抽出的血液在注入试管时没有卸下针头，注入时细胞受挤压而破裂溶血；注入时产生许多气泡，血球因细胞表面张力或放置一段时间后干燥，造成血细胞破裂溶血；再次，注射器或容器中有氧化还原洗涤剂，也会使细胞出现溶血现象。

标本溶血引起检测结果明显异常的影响是多方面的：标本溶血后，红细胞明显升高。当红细胞内浓度低于血浆浓度，即比值＜1时，则溶血相当于血清被稀释，造成某些成分的检测值降低。标本溶血后，血细胞成分进入血浆中所引起的化学反应导致细胞中某些含量高的成分大量进入血浆，致使相应检测项目的检测值升高。标本溶血后，血红蛋白的颜色在531nm和555nm波长附近会使比色法、比浊法检测的吸光特性和吸光度发生改变或使滴定法测定的滴定终点难以判断而带来误差。

综上所述，标本溶血会很大程度地引起检测结果异常，造成这种现象多是由采血人员的技术不熟练，操作不规范所致。因此，采血人员需提高自身专业技能水平，规范操作手法，谨记操作要领，加强实践能力。

2.2.2 抗凝问题 蛋鸡在采血时出于本能会拼命挣扎，这给采血带来了一定困难，血液在针管中滞留过久会形成细小血丝，导致抗凝剂不能发挥作用。此外，采血人员在采血后需立即颠倒采血管5～10次，以确保抗凝剂混匀，发挥作用。

2.3 样品采集后影响检测结果的因素和解决措施

2.3.1 送检时间 血液样品采集后要及时送检，尤其是鸡舍温度超过22℃时。因为血液标本放置时间过长会导致某些生化成分发生改变，如糖酵解使血糖浓度降低，周围环境变化导致血液pH值变化、酶活性降低或丧失等。另外，样品采集后试管必须加塞，管口向上、垂直放置，以减少管中内容物的震动，防止样品蒸发、污染和外溅等。

2.3.2 样品检测前的预处理工作 检验人员接收样品后要予以分类，准备离心。加抗凝剂的血液标本可以立即离心；加促凝剂的标本可于采血后5～15mi尽早离心。离心标本前如发现试管壁和管塞上有凝块，请尽量避免使用小木棒或类似器材去剥离，否则容易导致溶血。

2.3.3 样品检测中出现的问题及解决办法 此次试验蛋鸡的血液样品在检测过程中遇到了以下一些问题，检验人员采用科学有效的方法消除了干扰：

（1）血样稀释倍数不准确，导致血细胞检验计数出现问题。检验人员在进行血细胞检验计数项目的操作时，人为地降低了血样的稀释倍数，导致检测结果不准确。稀释倍数过低，会形成细胞排队通过传感器的重合缺损；稀释倍数过大，则会造成一定测定容量内血细胞的数量过少，这也会严重影响血液细胞检验的测量精度。

（2）样品自身因素的影响。样品本身存在的一些不可抗拒因素会对血细胞检测结果造成影响。血小板受环境干扰会造成血小板计数假性增高或假性降低；核红细胞增多会使白细胞计数假性增高；而淋巴细胞中可能存在体积稍小的嗜碱性粒细胞，使得淋巴细胞分类计数假性增高。检测人员采用人工分类镜检可以有效避免上述影响。

（3）测定血糖（GLU）指标，排除胆红素的干扰采用氧化酶法测定GLU指标时，由于胆红素作为一种还原剂会与氧化反应过程中过氧化氢（H2O2）分解产生的新生态氧发生反应，从而使得新生态氧与氧化酶法反应中的色原物质结合减少，导致结果偏低为消除上述影响，检测人员可以预先加入胆红素氧化酶，将胆红素氧化成较稳定的氧化产物——胆褐素，避免胆红素与新生态氧发生反应。此方法取得了很好的效果。

3 结论

本试验不仅探究了鸡采血、验血过程中会影响检测结果的因素，而且针对这些影响因素提出了科学有效的解决方案，为提高禽类动物血液指标检测的准确性提供了参考。今后可以进行深入的理论研究，以便更深层次地完善禽类动物采血、验血操作规程。

参与文献：

[1] 刘亚芝.浅谈临床血常规检测质量的影响及控制[J].中医疗，2011，（25）：185.

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[3] 张俊凤，崔翠翠，肖琛.血液标本采集与处理的质量制[J].临床输血与检验，2005，7（2）：145-146.

[4] 刘涌.关于提高血常规检验质量的方法探讨[J].中国医导报，2008，5（16）：171.