D－二聚体两种检测方法的比较

冯 金，孟庆艳，胡宏波 (广西柳州市柳铁中心医院检验科，广西 柳州 545007)

D－二聚体(D－dimer，D－D)是交联纤维蛋白在纤溶酶水解后所形成的特异性降解产物，是体内高凝状态和继发纤溶亢进的分子标志物。随着研究的进展，D－二聚体已经逐渐被认为是确诊深静脉血栓(DVT)、肺栓塞(PE)、弥漫性血管内凝血(DIC)等疾病的关键指标［1－3］;此外，D二聚体还被认为是评估恶性肿瘤、心脑血管疾病和肝脏疾病等多种疾病的病情，疗效及预后的可靠指标［4－6］。D－二聚体的测定应用于临床，对多种疾病的诊断、疗效观察、预后判断具有广泛的应用价值。目前检测的方法很多，主要有胶乳凝集法、免疫比浊法、酶联免疫吸附法和免疫渗滤法等。近年来，笔者对免疫比浊法和胶乳凝集法两种D－二聚体的检测方法进行了比较，现将结果报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料:标本均来自2012年在我院住院患者和健康体检者，其中患病组150例，男89例，女61例，平均年龄(57±10.9)岁，为在我院神经内科住院的患者。健康体检组50例，其中男35例，女15例，平均年龄(55±6.24)岁，均证实无创伤、血栓性疾病、肝病、无心脑血管疾病和肿瘤等。

1.2 方法:真空采血管(含枸橼酸钠溶液抗凝剂)采集患者清晨空腹静脉血。3 000 r/min离心15 min，分离乏血小板血浆待测。并在2 h内完成检测。免疫比浊法测定D－二聚体含量时采用SYSMEX CA7000全自动凝血仪，所使用试剂质控品和标准品均为siemens Dade(德灵)血凝试剂。严格按照仪器操作规程进行操作，测定的正常参考值为0～500 mg/L，超出500 mg/L判定为阳性结果。胶乳凝集法测定D－二聚体含量时所采用的试剂购自天津美德太平洋，严格按照胶乳凝集法操作手册中操作步骤进行，测定的正常参考结果为阴性，即无肉眼可见的颗粒形成。

1.3 统计学分析;采用SPSS13.0统计分析软件分析，计数资料采用χ2检验，P＜0.01为差异有统计学意义。

2 结果

免疫比浊法和胶乳凝集法分别检测患者及健康体检者D－二聚体检出率，结果如表1和表2所示，健康体检者两种方法检测均未出现阳性结果，在150例患者中，免疫比浊法所检测的阳性率为84%，显著高于胶乳凝集法的阳性检测率(34.6%)，差异具有统计学意义(P＜0.01)。

表1 健康体检者血浆D－二聚体两种方法检测阴性率和阳性率比较(n=50)

表2 患者血浆D－二聚体两种方法检测阴性率和阳性率比较(n= 150)

3 讨论

D－二聚体的检测在国内已开展多年，为血栓性疾病的诊断治疗、纤溶活性的鉴别以及肿瘤患者的治疗、观察、预后等都提供了重要的参考价值［7－8］。

D－二聚体的检测方法可分为半定量和定量。半定量检测方法中比较常用的方法是乳胶凝集法，其原理是被检血浆中D－二聚体与包被在乳胶颗粒上的单抗相作用，产生絮状沉淀反应。乳胶凝集法由于其简单的操作方法，不需要复杂的仪器，适用于床边检测(POCT)，适合临床上个体检测;此外，由于乳胶凝集法快速、经济，该方法在各个基层医院中得到广泛推广。免疫比浊法是定量方法中较常用的方法之一。其工作原理是:标本中D－二聚体与包被有高特异性D－二聚体单克隆抗体的乳胶颗粒结合后，乳胶颗粒发生凝集，在405 nm波长下检测透射光强度的变化，凝集程度与标本中D－二聚体的含量成正比。免疫比浊法由于其准确、快速、简便的特点，尤其通常是由自动化仪器完成检测，具有更高的灵敏度与精密度，避免了人工加样的偶然误差，在临床上也得到广泛应用。

根据上述试验结果，D－二聚体的两种检测方法——乳胶凝集法和免疫比浊法均有良好的阴性预期值，但两者的敏感性存在很大差异。经χ2检验分析比较，两种检测方法的结果，结果发现免疫比浊法的敏感性显著高于乳胶凝集法。在本研究中，笔者发现，只有在含量＞5 000 mg/L的标本(采用免疫比浊法检测)，乳胶凝集法才呈现阳性结果，因此，乳胶凝集法的阳性预期值不佳。反观使用SYSMEX CA7000免疫比浊法检测D－二聚体，该法能够对标本中的D－二聚体进行准确快速的定量，具有良好的阴性预期值和阳性预期值。此外，在阳性结果的判断上，乳胶凝集法往往存在主观差异，且无法给出具体的数值，因此乳胶凝集法检测标本中的D－二聚体虽然对排除和诊断DIC、深静脉血栓、肺栓塞有一定帮助，但无法给临床医生提供治疗效果的依据及病情的监测。而免疫比浊法使用方便、操作简单，可适用于各种生化分析仪，并可实现定量测定，为疾病的治疗、观察、预后等都提供了重要的参考价值。

综上所述，笔者认为，免疫比浊法准确、快速、简便，具有较高的灵敏度，并可实现定量测定，满足了临床急诊需要，值得在各大中型医院中推广使用。

［1］ 黄荣宁，陈显源，林 英，等.D二聚体、血气分析测定在慢性阻塞性肺疾病中的价值探讨［J］.海南医学，2012，23(1): 82.

［2］ Rumpf TH，Krizmaric M，Grmec S，etal.Capnometry in suspected pulmonary embolism with positive D－dimer in the field［J］.Crit Care，2009，13(6):R196.

［3］ Madzhuga AV，Somonova OV，Elizarova AL，etal.The clinical value of D－dimer in the diagnosis and treatment of thromboembolic complications and DIC syndrome in cancer patients［J］.Anesteziol Reanimatol，2005，(5):55.

［4］ Oya M，Akiyama Y，Okuyama T，et al.High preoperative plasma D－dimer level is associated with advanced tumor stage and short survival after curative resection in patients with colorectal cancer［J］.Jpn JClin Oncol，2001，31(8):388.

［5］ Suega K，Bakta IM.Correlation between clinical stage of solid tumor and D dimer as amarker of coagulation activation［J］.Acta Med Indones，2011，43(3):162.

［6］ 卡米拉，朱 琳，许莲芬，等.十种病种D二聚体检测结果的分析［J］.海南医学，2004，15(12):116.

［7］ Malato A，Saccullo G，Iorio A，et al.Residual vein thrombosis and D－dimer for optimizing duration of anticoagulation in idiopathic deep vein thrombosis［J］.Curr Pharm Des，2010，16(31): 3483.

［8］ 余 杏，姚 敏，魏晓斌，等.血浆D二聚体在临床疾病诊断中的应用［J］.海南医学，2012，23(6):129.