动物检验检疫样品血液样品送检

张慧燕 巴彦淖尔市铁路动物卫生监督检验站 015000

采集动物检验样品是动物检疫工作的重要内容。采样的时机是否适宜，样品是否具有代表性，样品的处理、保存、运送是否合适及时，这些与检验结果的准确性和可靠性关系极大，所以要按照规定采集检验样品。

1 适时采样

根据检疫要求及检验项目的不同，选择适当的采样时机十分重要。采样是有时间要求的，应该严格按规定时间采样；有临诊症状需要作病原分离的，必须在病初的发热期或症状典型时采样，病死的动物应立即采样。

2 合理采样

按照检疫规定要求，除了必须严格按照规定采集各种足够数量的样品外，不同疫病的需检样品各异，应按可能的疫病侧重采样。对未能确定为何种疫病的应全面采样。

3 典型采样

选取未经药物治疗、症状最典型或病变最明显的样品采样，如有并发症还应兼顾采样。

4 无菌取样

采集检验样品除供病理组织学检验外，供病原学及血清学等检验的样品必须无菌操作采样，采样用具和容器均须灭菌处理，尸体剖检需采集样品的先采样后检查，以免人为污染样品。

5 适量采样

采集样品的数量要满足检疫检验的需要并留有余地，以备必要的复检使用。

6 样品处理

采集的样品应一种样品一个容器立即密封，根据样品的性状及检疫检验要求不同，作暂时的冷藏、冷冻或其他处理。冻结方法是将样品放入－30℃冰箱内冻结，然后再装入有大小冰块或干冰的冷藏瓶（箱）内运送，亦可将装入样品的容器放入隔热保温瓶内再放入冰块，然后按100g 冰块加入食盐约35g，立即将隔热瓶瓶口塞紧，保证瓶内温度达到－21℃左右。供细菌学检验或血清学检验的样品冷藏送实验室即可。装样品的容器应贴上标签，标签要防止因冻结而脱落，标签标明采集时间、地点、号码和样品名称，并附上发病、死亡等相关资料，尽快送实验室。

7 安全采样

采样过程中必须做好采样人员的安全防护，并防止病原污染，尤其必须防止外来疫病的扩散，避免事故发生。

8 样品包装

装载样品的容器可选择玻璃的或塑料的，可以是瓶式、试管式或袋式。容器必须完整无损，密封不漏出液体。装供病原学检验样品的容器，用前彻底清洁干净，必要时经清洁液浸泡，冲洗干净后经干热或高压灭菌并烘干。如选用塑料容器，能耐高压的经高压灭菌，不能耐高压的经环氧乙烷熏蒸消毒或紫外线距离20cm 直射2h 灭菌后使用。根据检验样品性状及检验目的选择不同的容器，一个容器装量不可过多，尤其液态样品不可超过容量的80%，以防冻结时容器破裂。装入样品后必须加盖，然后用胶布或封箱胶带固封。如果是液态样品，在胶布或封箱胶带外还须用熔化的石蜡加封，以防液体外泄。如果选用塑料袋则应用两层袋，分别用线结扎袋口，防止液体漏出或入水污染样品。

9 送检迅速

样品经包装密封后必须尽快送往实验室，延误送检时间常会严重影响检疫结果。因此在样品送检过程中，要根据样品的保存要求及检验目的妥善安排运送计划。供细菌检验、寄生虫检验及血清学检验的冷藏样品，必须在24h 内送到实验室；供病毒检验的冷藏处理样品，须在数小时内送达实验室；经冻结的样品须在24h 内送到，24h 内不能送到实验室的，必须使送检样品在运送过程中保持温度处于-20℃以下。样品在送检过程中，为了防止样品的容器破损，样品装入冷藏瓶(箱)后应妥善包装，防止碰撞。用飞机运送时，样品应放在增压仓内，以防压力改变导致样品受损。

10 送检样品的采集

10.1 病毒检验样品的采集

一般情况下，采集样品适宜在动物发病初体温升高时进行，对于没有症状的带毒动物，一般在进入隔离场后7天以前采样。血样品必须是脱纤血或是抗凝血。抗凝剂可选择肝素或EDTA，枸橼酸钠对病毒有微毒性，一般不宜采用。采血前，在真空采血管或其他容器内按每10mL 血加入0.1%肝素1mL 或EDTA20mg。牛、马、羊从颈静脉或尾静脉真空采血，猪从前腔静脉真空采血或用注射器抽取，用量少时也可以从耳静脉抽取，家禽从翅膀静脉或颈静脉用注射器抽取血液。采得的血样立即与抗凝剂充分混合，防止凝固；采脱纤血时，先在容器内加入适量小玻珠，加入血液后反复振荡血液，以便脱去血液纤维。采得的血液经密封后贴上标签，以冷藏状态立即送实验室。必要时可在血中按每毫升加入青霉素和链霉素各500-1000IU，以抑制血源性或采血中污染的细菌。

10.2 细菌检验样品的采集

采血应在动物发病初体温升高或发病期，并未经药物治疗期间采集，血应脱纤或加肝素抗凝剂(或EDTA 或枸橼酸钠)，但不可加入抗生素。血液密封后贴上标签，冷藏尽快送实验室，否则须置4℃冰箱内作暂时保存，但时间不宜过久，以免溶血。

10.3 血清学检验样品

全血用真空采血管或注射器由动物颈静脉或其他静脉采集，用作血清学检验的血液不加抗凝剂或脱纤处理。为了保障血清质量，一般情况下空腹采血较好。采得的血样贴上标签，室温静置待凝固后送实验室，并尽快将自然析出的血清或经离心分离出的血清吸出，按需要分装若干小瓶密封，再贴上标签冷藏保存备检或冷藏送检。作血清学检验的血液，在采血、运送和分离血清的过程中应避免溶血，以免影响检验结果。中和试验用的血清，数天内检验的可在4℃左右保存。较长时间才能检验的应冻结保存，但不能反复冻融，否则抗体效价下降。供其他血清学检验的血清，一般不必加入防腐剂或抗生素，若确有需要时也可加入抗生素(每毫升血清加青霉素、链霉素500-1000IU)，亦可加入0.01%硫柳汞、0.08%硫柳汞、0.08%叠氮钠。加入防腐剂时不宜加入过量的液态量，以免血清被稀释。加入防腐剂的血清可置4℃下保存，但存放时间过长应冻结保存。采集双份血清检测比较抗体效价变化的，第一份血清采于病的初期并作冻结保存，第二份血清采于第一份血清后3-4 周，双份血清同时送实验室。

10.4 寄生虫检验样品

因不同的血液寄生虫在血液中出现的时机及部位各不相同，因此需要根据各种血液寄生虫的特点，取相应时机及部位的血制成血涂片，送实验室。

10.5 常规检验样品

血液需加抗凝剂，防止血液凝固，抗凝剂可用肝素或枸酸钠、EDTA 钠，血由静脉采得并与抗凝剂充分混合，尽快送实验室。运输中血浆不可冻结，不可剧烈振动，以免溶血。