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从脓肿液及病变组织中检出龟分枝杆菌

2013-03-19邹晓艳杨德远杨玲孔昌盛

微生物与感染 2013年2期
关键词:米卡同济抗酸

邹晓艳,杨德远,杨玲,孔昌盛

1. 湖北省宜昌市夷陵医院检验科,宜昌443100; 2. 湖北省宜昌市三峡大学校医院,宜昌443002

快速生长分枝杆菌(rapid-growing mycobacterium,RGM)主要有偶然分枝杆菌、龟分枝杆菌及脓肿分枝杆菌。该菌常见于水、土壤、医院等环境,可引起皮肤及皮下软组织、肺部及其他部位感染。2012年10月我科从一门诊患者的脓肿液及病变组织中检出1株快速生长分枝杆菌,经华中科技大学同济医学院附属同济医院进行分子生物学测序,最终鉴定为龟分枝杆菌。

1 病例资料

患者,女,65岁,农民。2012年10月因左小腿皮肤结节、腹股沟淋巴包块2个月余,当地抗感染治疗10多日无好转来我院就诊。患者自述3个月前因田间劳作左小腿有外伤史。查体左小腿内侧可见5.0 cm×3.0 cm大小的脓肿灶,表面小部分破溃,有少量稀薄、淡红色、无臭分泌物。左侧腹股沟触及数枚肿大淋巴结(2个约2.0 cm×3.0 cm,1个如花生米大小),患者无发热、恶心、呕吐等症状。实验室检查血常规:白细胞计数6.6×109/L,血红蛋白96 g/L。肝、肾功能正常,结核菌素(old tuberculin,OT)试验(+),纯蛋白衍生物(purified protein derivative,PPD)试验(++),痰培养及抗酸染色阴性,肺部计算机断层扫描(computed tomography,CT)未提示异常,取伤口分泌物做细菌培养。抗感染治疗3 d后切除炎性组织,取切除组织直接涂片检出抗酸染色强阳性杆菌,同时送检细菌培养。

2 培养鉴定

分泌物及组织标本经处理后,分别接种于羊血平板,35 ℃培养2 d未见细菌生长;培养至第4天可见大小不均、稍显干燥、不溶血的灰白色菌落生长。生理盐水涂片似油脂状,革兰染色为受色浅淡且着色不均的阳性杆菌,抗酸染色强阳性且呈明显分枝状,初步判定为快速生长分枝杆菌。该菌株送华中科技大学同济医学院附属同济医院进行分子生物学测序。引物序列为P11P(F):5′-GAGGAAGGTGGGGATGACGT-3′;P13P(F):5′-AGGCCCGGGAACGTATTCAC-3′。测序结果与美国国立生物技术信息中心(National Center for Biotechnology Information,NCBI)数据库中的数据进行比对(BLAST),最终鉴定为龟分枝杆菌。

3 讨论

快速生长分枝杆菌属非结核分枝杆菌(non-tuberculous mycobacterium,NTM)[1]。虽然早在Koch发现结核分枝杆菌后不久即被注意到,但其病原学意义于20世纪50年代初才被确认。快速生长分枝杆菌是NTM中常见的致病菌群[2],有报道超过50%[3,4]。在致病性快速生长分枝杆菌群中,龟分枝杆菌是引起感染的首位病原菌[5],也是 NTM 医源性感染最常见的菌种。有文献报道[6],国外20世纪70~90年代中期至少发生25起NTM医院感染暴发流行事件,病例数达600例以上,菌种鉴定结果均为快速生长的NTM,其中以龟分枝杆菌和偶然分枝杆菌多见。Wallace等[7]报道的125例快速生长分枝杆菌感染病例中,74例(59.2%)为皮肤、软组织感染,其中40例为术后感染、34例由意外穿透伤所致。致病菌依次为偶然分枝杆菌、脓肿分枝杆菌和龟分枝杆菌。1998年深圳市某医院发生一起由龟分枝杆菌引起的医院内术后感染暴发流行事件,手术切口感染率57.5%。快速生长分枝杆菌引起的非医院内感染病例国内报道较少。近年来由 NTM 引起的感染呈逐渐上升趋势,日益引起关注。

最近研究[8,9]表明,龟分枝杆菌对常用抗结核药物的耐药率居高不下,对氨基糖苷类抗菌药(阿米卡星、妥布霉素)、克拉霉素、多西环素(强力霉素)和氟喹诺酮类药物等敏感。虽然阿米卡星和克拉霉素可作为核心药物用于快速生长分枝杆菌感染的治疗,但尚无特异高效的抗NTM药物,而多数传统抗结核药物对大多数NTM的活性很小或没有[10],所以NTM感染治疗困难,预后不佳。对龟分枝杆菌感染的治疗,体外实验显示妥布霉素的疗效优于阿米卡星,对头孢西丁耐药可用亚胺培南/西司他丁代替。本例用阿米卡星、克拉霉素、头孢西丁、利福平联合治疗,病情明显好转,后续效果尚在观察中。

快速生长分枝杆菌按常规细菌培养难以检出,临床医师应提高对其感染的认识,尤其在局部外伤、手术或局部穿刺后出现脓肿者,要及时对可疑病例行NTM培养及鉴定,对分泌物、手术切除组织等标本做抗酸染色检查,这样才能找出真正的病原菌,避免治疗延误。

致谢

本文得到华中科技大学同济医学院附属同济医院孙自镛、陈中举老师的帮助和支持,在此表示感谢!

[1] 夏祥新,桂晓红.非结核分枝杆菌肺病96例临床分析[J].中华结核和呼吸杂志,1999,22(4):239-241.

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[3] 李昕洁,谭守勇,黄业伦,蔡杏珊,刘志辉.812 株非结核分枝杆菌临床分离株流行病学特征分析[J].中国防痨杂志,2010,32(12):811-814.

[4] 何霞,蔡杏珊,刘志辉.非结核分枝杆菌分离与致病的相关性研究[J].国际医药卫生导报,2008,14(21):13-14.

[5] 陈品儒,蔡杏珊,肖芃,谭耀驹.致病性速生型非结核分枝杆菌 MIC 法检测及药敏结果分析[J].广东医学, 2012,33(23):3620-3622.

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[10] 陈升汶.快速生长分枝杆菌病的诊断和治疗[J].中华结核和呼吸杂志,2000,23(5):273-274.

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