盆炎净胶囊中益母草薄层色谱法的改进

闫春风 董晓强 崔雅慧 徐晓伟 李君 朱磊

[摘要]目的改进盆炎净胶囊中益母草薄层色谱法。方法采用TLC法，展开剂：乙酸乙酯-无水乙醇-甲酸（3∶2∶2）；显色剂∶稀碘化铋钾试液-三氯化铁试液（10∶1）混合溶液。结果展开时间短，分离效果好，斑点比原方法清晰，重复性好。结论本方法可用于盆炎净胶囊益母草药材的质量标准控制。

[关键词]盆炎净胶囊；益母草；薄层色谱；质量标准

[中图分类号]R927.11 [文献标识码]A [文章编号]1674-4721（2012）12（a）-0063-02

盆炎净胶囊是在《中华人民共和国卫生部药品标准》WS3-B-2387-97“盆炎净颗粒”的基础上改变剂型而成，处方由忍冬藤、鸡血藤、狗脊、蒲公英、益母草、车前草、川芎、赤芍等8味中药组成。功能清热利湿、活血通络、调经止带，用于湿热下注、白带过多、盆腔炎见以上的证候者[1]。益母草为方中臣药，在原标准中益母草的鉴别存在一定问题，为更好控制产品质量，保证药品疗效，笔者对原鉴别方法进行了改进，现报道如下：

1仪器与试剂

硅胶G板（青岛谱科分离材料有限公司，批号：20120323）；盐酸水苏碱对照品（购自中国药品生物制品检定所，批号：110712-200709）；盆炎净胶囊（承德颈复康药业集团有限公司，批号：101001，191104，191186）；水为二次蒸馏水；其他试剂均为分析纯。

2方法与结果

2.1盆炎净胶囊质量标准中益母草的鉴别方法

取本品10粒，研细，加乙醇30mL，加热回流0.5h，放冷，滤过。滤液浓缩至5mL，置于已处理好的活性炭-氧化铝柱[依次加入活性炭0.5g及氧化铝（100～200目）2g，内径10～20mm]上，用乙醇30mL洗脱，收集洗脱液，置水浴上蒸干，残渣加1mL乙醇使溶解，作为供试品溶液。另取盐酸水苏碱对照品，加乙醇制成每1mL含5mg的溶液，作为对照品溶液。取缺益母草阴性样品4.5g，按供试品溶液的制备方法制得阴性对照液。照薄层色谱法[《中华人民共和国药典》（简称《药典》）2005年版一部附录ⅥB]试验[2]，吸取上述供试品溶液及对照品溶液各10μL，分别点于同一羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以正丁醇-盐酸-水（4∶1∶0.5）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性对照品溶液对鉴别无干扰，见图1。

2.2改进后益母草的鉴别

供试品、对照品溶液及阴性溶液的制备与原质量标准中的方法相同。照薄层色谱法（中国药典2010年版一部附录ⅥB）试验，吸取供试品溶液及对照品溶液各10μL，分别点于同一羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-无水乙醇-甲酸（3∶2∶2）为展开剂，展开，取出，在105℃环境下加热10min，放冷，喷以稀碘化铋钾试液-三氯化铁试液（10∶1）混合溶液。热风吹至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性对照品溶液对鉴别无干扰，见图2。

2.3结果

结果证明，该法展开时间短，斑点显色清晰，Rf值适中，重复性好，故建议将盆炎净胶囊中益母草薄层色谱鉴别方法定为改进后的方法。

3讨论

3.1鉴别方法的选择

在检测过程中发现，益母草的鉴别方法存在以下不足：（1）方法灵敏度较低。用原标准方法，盆炎净胶囊中的盐酸水苏碱的斑点不清晰；（2）展开时间长。原标准中所用展开剂展开需要6h以上，时间过长，影响展开效果；（3）重复性差。鉴于上述情况，笔者参考有关文献[2-5]，通过反复试验，确定了改进后的方法。

3.2提取方法的选择

本实验考察了用乙醇回流（0.5、1h）和超声[6]（0.5h）两种不同方法提取后过柱，结果并没有显著的差别，故样品处理方法没有变。

3.3展开剂和显色剂的选择

实验过程中考察了不同展开剂丙酮-无水乙醇-盐酸（10∶6∶1）、正丁醇-盐酸-乙酸乙酯（8∶3∶1）、乙酸乙酯-无水乙醇-甲酸（3∶2∶2）。结果几种展开剂展开均只需15～20min，展开时间均缩短，但前两种展开剂的分离度比较低，Rf值偏小，而用乙酸乙酯-无水乙醇-甲酸（3∶2∶2）为展开剂效果最好。比较几种不同显色剂稀碘化铋钾试液、改良碘化铋钾试液、稀碘化铋钾试液-三氯化铁试液（10∶1）混合液，结果用稀碘化铋钾试液-三氯化铁试液（10∶1）混合溶液，灵敏度最高，故实验选择用乙酸乙酯-无水乙醇-甲酸（3∶2∶2）为展开剂。显色剂为稀碘化铋钾试液-三氯化铁试液（10∶1）混合液，而且所用展开剂也符合环保和低毒的要求。

改进后的实验较好地解决了原标准中益母草鉴别的缺点，为盆炎净胶囊中益母草薄层色谱法的改进提供了一定的理论依据。

[参考文献]

[1] 钟月平.益母草及其制剂在妇科的临床应用[J].湖南中医药大学学报，2010，30（10）：70.

[2] 国家药典委员会.中华人民共和国药典[S].一部.北京：中国医药科技出版社，2010：272，1026.

[3] 郝立芳.益母草冲剂中益母草的薄层色谱鉴别法[J].海峡药学，2004，16（4）：89-90.

[4] 涂宏海，赵汝海，杜军强，等.产后康口服液质量标准的研究[J].解放军药学学报，2004，20（2）：143-145.

[5] 张霞，江延辉.复方归芍妇康胶囊的制备与质量控制[J].中国现代中药，2011，13（8）：31-32.

[6] 郭孝武，杨锐.不同频率超声提取对益母草总碱提出率的影响[J].中国医院药学杂质，1999，19（8）：465-466.

（收稿日期：2012-09-06 本文编辑：袁 成）